Методы экспресс диагностики стрептококковых инфекций

Для обнаружения пиогенного стрептококка в клиническом материале используется реакция коагглютинации и метод флюоресцирующих антител (МФА).

Биологический метод. В связи с тем, что исходный материал (мокрота) может быть загрязнен сопутствующей микрофлорой, выделить чистую культуру пневмококков очень трудно с использованием питательных сред. В таком случае приходится прибегать к предварительному заражению белой мыши, в организме которой пневмококк размножается быстрее, чем другие микробы. Мышь заражают внутрибрюшинно 0,5 мл взвеси первичного материала. Через 6-8 часов можно взять из брюшной полости выпот и выделить чистую культуру, посеяв 1-2 капли на чашку. Можно забрать материал от погибшего животного, гибель наступает через 18-24 часов при наличии в исследуемом материале пневмококков.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных энтерококками

Род Enterococcus состоит из 13 видов бактерий, способных вызывать гнойно-воспалительные заболевания органов пищеварения, перитонит, урологические и раневые инфекции, эндокардит, остеомиелит, отит, менингит и сепсис. Чаще всего заболевание вызывают E.faecalis u E.faecium и E.durans. Энтерококки представляют собой слегка удлиненные грамположительные кокки диаметром 0,5-1 мкм, которые чаще всего располагаются в парах и коротких цепочках, спор не образуют, некоторые виды ограничено подвижны, капсул не имеют.

Соответственно локализации патологического процесса проводится забор материала в стерильные флаконы, пробирки, шприцы. Тампоны с материалом, кровь помещают в питательную среду на основе СКС.

Бактериоскопическое исследование Мазки окрашивают по Граму.

Бактериологическое исследование Выделение возбудителя обычно не представляет трудностей, т.к. энтерококки хорошо растут на простых питательных средах. Селективными являются среды, содержащие кровяной агар с добавлением азида натрия, канамицина, полимиксина, налидиксовой кислоты. Инкубацию посевов осуществляют при температуре 37°С в течение 24-48 часов.

На жидких средах энтерококки дают интенсивный рост, вызывая диффузное помутнение. На пластинчатых средах стрептококки растут в виде сероватых колоний диаметром 0.4-1 мм, на кровяном агаре образуют колонии с альфа - или гамма- гемолизом, E.mundtii и E.casseliflavus образуют желтый пигмент. При наличии характерных колоний, часть колонии засевают в сахарный бульон и на сектор кровяного агара в чашке Петри для накопления чистой культуры. Чистая культура определяется на принадлежность ее к роду Enterococcus. Культура вносится в молоко с 0,1% метиленового синего и на чашку с желточно-щелочным агаром (ЖЩА). Энтерококки редуцируют метиленовый синий, что приводит к изменению цвета среды с голубого на кремовый уже через'6-16 часов при температуре 37°С. На ЖЩА растут только энтерококки, колонии могут появиться лишь на 3 сутки. Для дифференцировки энтерококков от стафилококков ставят пробу на каталазу (энтерококки каталазоотрицательные). Для дифференциации от гноеродных кокков

культуру засевают на в МПБ, содержащий 10% желчи крупного рогатого скота, через 1 час инкубирования при 37°С гноеродные кокки лизируются, энтерококки не лизируются.

Таблица 2.

Основные отличительные признаки энтерококков, патогенных для человека

Признак	E.durans	E.faecalis	E.faecium
Подвижность	-	+-(11-20% изолятов)	+- (11-20% изолятов)
Рост при 45°С	+	+	+
Рост при 50°С	-	+-(11 -20% изолятов)	+ (80-89% изолятов)
Рост на средах содержащих:
6,5%NaCl	+	+	+
0,04% теллурита	-	+	-
молоко с 0,1% метиленовым синим	+	+	?
Образование желтого пигмента	-	-	-
Гемолиз	α, β	Иногда β	Иногда α
Гидролиз гиппурата	+-	+-	+ (80-89%)
Образование кислоты из:
Рамнозы	-	+-	-
Сахарозы	-	+	+-
Арабинозы	-	-	+
Глицерина	-	+	+
Сорбита	-	+ (80-89% изолятов)	-
Маннита	+ - (11-20% изолятов)	+	-
Серологическая группа по Ленсфильд	D	D	D