Микробиологическая диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза

Клиническая диагностика невозможна из-за полиморфизма проявлений заболевания, поэтому большое значение имеют лабораторные методы диагностики.

Материал для исследования: выделения и мазки со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, сперма, выделения из шейки матки, осадок мочи.

Методы диагностики:

1. микроскопический;

2. бактериологический;

3. серологический

4. молекулярно-биологический.

Микроскопическое исследование

Исследование нативных препаратов не дает положительных результатов. Фиксированные в ацетоне мазки окрашиваются по Романовскому-Гимзе или обрабатываются мечеными антителами и микроскопируются в люминесцентном микроскопе. Возбудители выявляются на мембранах эпителиальных клеток и в межклеточном пространстве.

Бактериологическое исследование проводят путем посева исследуемого материала на богатые элективные питательные среды сложного состава, содержащие нативные добавки (экстракт из плаценты, триптический перевар бычьего сердца, сыворотку и т.д.). Для посева исследуемого материала используют плотные, полужидкие и жидкие среды. В последнем случае в среду добавляют индикатор для контроля роста, поскольку накопление микоплазм и уреаплазм не сопровождается выраженным помутнением. С целью подавления роста других бактерий добавляют антибиотики группы пенициллина (100 ЕД/мл), не активные в отношении микоплазм и уреаплазм. Посевы инкубируют при 37°С в течение 48 часов.

На плотных средах микоплазмы и уреаплазмы образуют микроколонии в виде яичницы-глазуньи с врастающим в среду центром и полупрозрачной периферией, которые обнаруживают путем микроскопии посевов при малом увеличении. Идентификацию выделенной культуры возбудителя проводят по биохимическим (ферментация углеводов, разложение аргинина) и антигенным свойствам в реакции ингибирования роста культуры специфической сывороткой и нейтрализации метаболизма аргинина той же сывороткой. Возбудитель микоплазмоза M.hominis в отличие от других видов микоплазм не ферментирует углеводы и разлагает аргинин. Уреаплазмы вызывают гидролиз мочевины.

Серологическое исследование

Серологические исследования проводятся только в динамике заболевания, т.к. противомикоплазменные антитела в невысоких титрах встречаются у 60-80% здоровых лиц. Диагностическим считается нарастание титра антител в 4 и более раз. При вялотекущих заболеваниях антигены и антитела находятся в составе циркулирующих иммунных комплексов. Диссоциация таких комплексов в сыворотке крови с помощью буфера с рН2,4 позволяет выявлять антигены микоплазм и уреаплазм в высоких титрах.

Для обнаружения антител в сыворотке крови больных используют реакцию агглютинации эритроцитов 1-й группы крови микоплазмами на холоду; РСК со специфическим диагностикумом: РИГА, РТГА, ИФА, РП.

Для выявления антигена в культуре, материале, сыворотке крови больного используют ИФМ и ИФА.

ИФА используется также как дополнительный серологический метод при дифференциальной диагностике урогенитальных инфекций, вызванных хламидиями и микоплазмами.

Литература:

1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник / Л.Б.Борисов. М. : ООО «Медицинское информационное агенство», 2001. - 736 с.

2. Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии: Учеб. пособие / Л.Б. Борисов,

Б.Н. Козьмин-Соколов, И.С. Фрейдлин. - М. : Медицина. - 1993. - 240 с.

3. Евплов В.И. Профилактика внутрибольничных инфекций. Сборник документов, комментарии, рекомендации. – Ростов н /Д : «Феникс», 2003. – 235 с.

4. Елинов Н.П. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии

/ Н.П. Елинов, Н.А. Заикина, И.П. Соколова. - М. : Медицина. - 1988. - 206 с.

5. Костенко Т.С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии

/ Т.С. Костенко, В.Б. Родионова, Д.И. Скородумов - М.: «Колос», 2001. – 344 с.

6. Красильников А.П. Микробиологический словарь – справочник /А.П.Красильников., Т.Р. Романовская. – Минск : «Асар», 1999. - 399 с.

7. Коротяев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник / А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. – С-Пб: Спец. лит., 2002. - 580 с.

8. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. Учебник

/ Л.Б.Борисов, А.М.Смирнова, И.С. Фрейдлин и др. - М. : Медицина, 1994. - 528с

9. Покровский В.И. Медицинская микробиология. / В.И.Покровский.,

О.К. Поздеев - М. : ГЭОТАР МЕДИЦИНА. - 1998. - 1200 с.

10. Королюк А.М. Медицинская микробиология: Учебное пособие / Под ред. А.М. Королюка, В.Б Сбойчакова. – С-Пб, 2002. –266 с.

11. Микробиология и иммунология /Под ред. А.А. Воробьева – М: Медицина, 1994.- 385 с.

12. Методические рекомендации по микробиологической диагностике раневых инфекций в лечебно-диагностических учреждениях армии и флота /Сост. В.М. Добрынин (руководитель), И.А. Добрынина, В.В. Кацалуха., О.В. Хлопунова, В.Д. Бадиков, Е.П.Сиволодский ; главное военно-медицинское управление – С-Пб : «Савож», 1999- 75 с.

13. Основные методы лабораторных исследований в клинической бактериологии / Пер. с англ., J. Vandepitte, K. Engbaek, P. Piot, C.C. Heuck; Всемирная организация здравоохранения, Женева. – М.: Медицина, 1994 – 132 с.

14. Поздеев О.К. Медицинская микробиология. / Гл. ред. В.И Покровский., - М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА. - 2001. - 765 с.

15. Пяткин К.Д. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии / К.Д. Пяткин, Н.С. Маркова, Н.Д. Трофимова. – М. : Медицина, 1969. – 295 с.

16. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. /Под ред. Л.Б. Борисова - 2-ое изд., перер. и доп. - М. : Медицина. - 1984. - 256 с.

17. Синюшина М.Н.,., Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М.Н Синюшина., М.Н.Самсонова. - М. : Медицина.- 1974. - 180 с.

18. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методов исследования / Под ред. М.О. Биргера– М. Медицина, 1967.- 462 с.

19. Шлегель Г. Общая микробиология / Пер. с нем.; под ред. Е. Н. Кондратьевой– М. : Мир, 1987. – 567 с.