Микробиологическая диагностика трихомониаза

В связи с широким распространением трихомониаза мочеполовых органов, возможностью малосимптомного его течения, особенно у мужчин, тяжестью осложнений, в том числе развитием бесплодия, лабораторная диагностика этого заболевания занимает одно из ведущих мест в борьбе с ним. Клинический диагноз трихомониаза во всех случаях должен быть подтвержден обнаружением типичных форм влагалищных трихомонад при лабораторном исследовании.

Материал для исследования: мазки со слизистой оболочки урогенитального тракта.

Методы диагностики:

1. микроскопический

2. культуральный

Микроскопическое исследование нативного препарата

Методика: материал наносят на слегка подогретое предметное стекло, смешивают с каплей теплого изотонического раствора натрия хлорида, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Ввиду того, что при длительном пребывании препаратов при комнатной температуре трихомонады довольно быстро теряют подвижность, исследование следует проводить непосредственно после получения материала.

Оценка результатов: в нативных препаратах влагалищная трихомонада узнается по грушевидной или овальной форме тела величиной немного большей лейкоцита, характерным толчкообразным движениям и жгутикам, которые особенно хорошо видны в микроскопе с темнопольным или фазовоконтрастным конденсором. При исследовании нативных препаратов влагалищные трихомонады иногда путают со жгутиковыми семейства бодонидов, которые могут быть занесены в препарат из воды, загрязненной посуды и т.д. В отличие от трихомонад, бодониды имеют лишь 2 жгутика и очень быстро двигаются по прямой.

Микроскопическое исследование окрашенного препарата

Преимуществом исследования трихомонад в окрашенных препаратах является возможность изучения их спустя длительное время после взятия материала

Методика: в повседневной практике наиболее широко применяют окраску высушенных на воздухе и фиксированных препаратов 1% раствором метиленового синего или по Граму, что позволяет выявлять трихомонады при одновременном исследовании мазков на гонококки.

Оценка результатов: в окрашенных препаратах трихомонады имеют овальную, круглую или грушевидную форму с хорошо выраженными контурами и нежно ячеистым строением цитоплазмы, ядро расположено эксцентрично и интенсивно окрашено.

Для выявления более тонкого строения трихомонад применяют более сложные методики окраски препаратов (по Романовскому-Гимза, Лейшману-Романовскому), которые позволяют видеть жгутики, ундулирующую мембрану и т.д.

Значительно повышают выявляемость трихомонад повторные анализы, в частности, с использованием провокации, а также применение культурального метода в комплексе с другими методами исследования. При обследовании на трихомониаз применяют только алиментарный и механический способы провокации (см. выше); инстиляции и смазывания препаратами серебра и раствором Люголя не проводят, так как последние губительно действуют на влагалищную трихомонаду и затрудняют ее обнаружение.

Культуральный метод исследования

Наиболее широкое распространение для культуральной диагностики трихомониаза получили питательные среды, в состав которых входят асцитическая жидкость, солянокислый цистеин, сыворотки крови, пищевой белок (мясо, печень) и т.д. Общим недостатком таких сред является нестандартность их основы, трудоемкость приготовления, дефицит составных частей и ограниченные сроки хранения. Инкубируют в термостате при температуре 35- 37°С.

При выращивании на жидких питательных средах влагалищные трихомонады дают придонный рост в виде плотного беловатого осадка, из которого пастеровской пипеткой берут материал для исследования в нативном препарате. Микроскопическое исследование культур следует производить на 3-5, а при отрицательных результатах - повторно на 7-9 и 11-17 день после посева, т.к. длительность цикла развития влагалищных трихомонад в культуре зависит от величины посевной дозы.

Серологическое исследование

Предложены методики постановки реакции иммунофлюоресценции с сыворотками крови обследуемых лиц. Разработано несколько модификаций реакции со свежей кровью, взятой из пальца. Вследствие высокой чувствительности и специфичности данной реакции рекомендовано использовать ее в качестве отборочного теста на трихомониаз. Возможна постановка РИФ-абс с высушенной кровью и с определением титра антител. Концентрация антител в крови тем выше, чем длительнее протекает инфекция. Критерием излеченности РИФ-абс служить не может.

Внутрикожная проба. Разработана методика постановки внутрикожной пробы с аллергеном, приготовленным из влагалищных трихомонад методом щелочного экстрагирования. На большом клиническом материале была показана высокая чувствительность (92,%) и специфичность (93,%) пробы, что дает возможность рекомендовать ее в качестве отборочного теста на трихомониаз. Внедрение данной методики в практику тормозит отсутствие производственного выпуска трихомонадного аллергена.