Лабораторная диагностика сибирской язвы

Материал

• содержание карбункула и пузырьков при кожной форме

• мокрота и испражнения при легочной или кишечной форме

• кровь и моча при септических явлениях (от трупов людей рекомендуется брать на исследование кровь из поверхностных кровеносных сосудов, от трупов животных рекомендуется брать ухо, помещая его в банку)

• образцы кож, шерсти, щетины

• пробы из объектов внешней среды (пробы воздуха, вода, почва, смывы с поверхностей).

• пищевые продукты

Микроскопия мазка

Bacillus anthracis представляет собой обрубленные палочки, расположенные в виде коротких цепочек или попарно (в виде бамбуковой трости).

• Окраска по Граму (грамположительные стрептобактерии)

• Окраска по Романовскому-Гимзе (бактерии окрашиваются в темно-синий цвет, капсулы - в розовый)

• Окраска раствором Ребигера (бациллы окрашиваются в фиолетовый цвет, капсулы - в красно-фиолетовый). Bacillus anthracis образует капсулы in vivo, in vitro капсулы образуются только на специальных средах.

• Окраска по Ожешко (споры окрашиваются в рубиново-красный цвет, вегетативные формы – в голубой)

Феномен «жемчужного ожерелья». На МПА с пенициллином наблюдается превращение бактерий в сферопласты (вид отдельных шаров, расположенных цепью) из-за нарушения синтеза клеточной стенки.

ИФМ (обработка мазка люминесцирующей сывороткой)

Бактериологическая диагностика

Bacillus anthracis хорошо размножаются на простых питательных средах.

• Оптимальная температура - 37°С.

• Оптимальный рН 7,0.

• Время инкубации - 18-20 часов

Характер роста:

• На МПА растут в виде R-колоний крупных (2-3 мм в диаметре) шероховатых с матовой поверхностью и неровными локонообразными краями. Их сравнивают с головой медузы, гривой льва, клубком спутанных нитей. R-колонии представлены чаще вирулентными микробами

• S- колонии округлые в проходящем свете имеют вид «стеклянного среза», авирулентны

• На кровяном агаре колонии серые, без признаков гемолиза в отличие от сапрофитных бактерий, которые, обычно проявляют гемолитическую активность

• На жидкой питательной среде растут в виде комочка ваты на дне (непатогенные микробы дают диффузное помутнение)

• В столбике желатина (10-15%) рост в виде «перевернутой елочки»

Серологическая диагностика

Используется реакция преципитации /РП/ по Асколи с полисахаридным антигеном.

Биологический метод диагностики

1. Кожная проба («аллергическая проба») с антраксином. В область предплечья вводят в/кожно антраксин (0,1 мл). Антраксин - белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, полученный гидролизом вегетативных форм сибиреязвенных бацилл. Учет проводят через 24-48 часов. У иммунных лиц образуется папула более 15 мм. Положительной реакция становится в первые дни болезни и сохраняется таковой в течение многих лет после выздоровления.

2. Проба на животных

Морские свинки, кролики погибнут через 24-36 часов после введения микробсодержащего материала. Характерными признаками пробы являются: неокоченение трупов, не свертывание крови.