Вопрос 16. Оптическая микроскопия. Ход лучей.

Микроскоп явл одним из важнейших лаб приборов в мед и био исследованиях. Микроскоп – оптический прибор, служащий для увел угла зрения при рассмотрении оч мелких объектов. Микроскопы широко примен для наблюдения таких объектов, которые невозможно различить невооруженным глазом.

1. Источник света, 2диафрагма, 3конденсор,4 объектив,5окуляр, 7глаз.

Вопрос 17. Увеличение микроскопа. Предел разрешения. Разрешающая способность. Полезное увел.

Увел микроскопа: Г=∆S/f₁f₂, где f₁ – фокусное расстояние объектива, f₂ – фок расстояние окуляра, ∆ - оптическая длина тубуса, S- расстояние наилучшего зрения. Можно предположить, что подбирая значения этих величин можно получить микроскоп со сколь угодным большим увеличением. Но этого нет, тк возможность различения мелких деталей объектива в микроскопе ограничена. Это ограничение обусловливается влиянием дифракции света, происходящей в структуре рассматриваемого объекта. А связи с этим пол понятиями предела разрешения и разреш способности микроскопа. Предел разрешения – такое наим расстояние между 2 точками предмета, когда эти точки различимы. Разрешающей способностью обычно называют способность микроскопа давать раздельные изображения мелких деталей рассматриваемого объекта. Предел разрешения микроскопа опред по формуле: Z=λ/(2nsinΘ), где λ – длина волны света, освещающего предмет, n – показатель преломления среды между объективом и предметом, Θ – апертурный угол объектива, равный половине угла между крайними лучами конического светового пуска, входящего в объектив микроскопа. Вел-на А=nsin(u/2) явл числовой апертурой. Z=λ/(2A). Это формула справедлива в случае освещения предмета сходящимся пучком лучей. Учитывая наличие предела разрешения микроскопа и предела разрешения глаза, вводят понятие полезного увел микроскопа. Это увел, при кот микроскоп создает изображение предмета, имеющего размеры, равные пределу разрешения Z микроскопа, и размеры этого изображения равны пределу разрешения Z_гл невооруженного глаза на расстоянии наилучшего зрения: Г=Z_гл/Z. Нормальный глаз на расстоянии наилучшего зрения различает 2 точки предмета, если угловое расстояние между ними не менее 1’, что соотв расстоянию между этими точками 70 мкм. В этом случае полезное увел будет минимум: Г_min=70/Z. Подставляя: Г=2Z_глА/λ.

Вопрос 18. Специальные приемы микроскопа.

Измерение размеров микроскопических объектов с помощью микроскопа. Для этого примен окулярный микрометр – круглую стел пластинку, на кот нанесена шкала с делениями. Микрометр устанавливают в плоскости изображения, получаемого от объектива. При рассматривании в окуляр изображения объекта и шкалы сливаются и можно отсчитать, какое расстояние по шкале соотв измеряемой величине. Отсчет по шкале не дает размера объекта, так как совмещаемое со шкалой изображение не равно размеру предмета. Для этого надо найти цену одного деления. Вместо объективного микрометра можно применять любой препарат, размер кот известен, или исп счетную камеру Горяева.

Микропроекция и микрофотография. Формирование микроскопического изображения происходит с участием человека и завершается образованием действительного изображение в глазу. Обычный микроскоп сам по себе не создает действительного изображение, однако для фотографирования или проекции микроскопического изображения должно быть получено действ изображение. Для этого изображение, даваемое объективом надо расположить дальше фокусного расстояния окуляра.

Метод фазового контраста. Интенсивность световой волны, проходящей через прозрачный объект, почти не изменяется, но фазы претерпевают изменения, зависящие от толщины объекта и его показателя преломления. В этом смысле прозрачные объекты наз дефазирующими. Увидеть детали таких объектов обычным образом невозможно. Фазово-контрастный микроскоп дает возможность преобразовывать фазовые изменения световых волн, проходящих через объект, в амплитудные, в результате чего даже прозрачные объекты становятся видимыми. Прозрачные биообъекты при фазово-константной микроскопии хар-ся достаточно высокой контрастностью – в зав-ти от фазовой пластинки они могут давать темные изображения на более светлом поле (явление положительного фазового контраста) или же светлые изображения на темном поле (явление отрицательного фазового контраста).

Ультрамикроскопия. Этот метод обнаружения частиц, размеры кот лежат за пределами разрешения микроскопа. Микроскопы, работающие по этому методу, называют ультрамикроскопами. В них осущ боковое освещение, благодаря чему субмикроскопические частицы видны как светлые точки на темном фоне, строение частиц увидеть нельзя. Этот метод построен на эффекте Тиндаля (свечение пылинок в воздухе темного помещения, в кот солн луч проникает через небол щель).