5.4.Дослідження крові.

5.4.1.Визначення кількості еритроцитів в крові.

Меланжерний метод: набираємо кров у меланжер до мітки 0,5 (розведення у 200 разів). Кінчик меланжера витираємо ватою. Набираємо 3 % розчин NaCН до мітки 101. Знімаємо гумову трубочку, меланжер закриваємо з обох боків пальцями і струшуємо.

До лічильної камери Горяєва притираємо покривне скельце, до появи райдужних кілець. Із меланжера на ватку видуваємо перші краплі крові,наступною краплею торкаємося збоку до покривного скельця і середньої пластинки камери. Внаслідок капілярності рідина заповнює камеру. Зайву рідину видаляємо ватою, або фільтрувальним папером.

Підрахунок еритроцитів проводимо при малому збільшенні мікроскопа (ок.10-15;об.8). Клітини підраховуємо у 5 великих квадратах, розміщених по діагоналі сітки, кожний з яких розділений на 16 малих. Клітини у великому квадраті починають рахувати з лівоговерхнього маленького квадрата, потім переходять на другий,третій, четвертий. Після верхнього ряду, рахують еритроцити у нижче розміщеному ряду, починаючи з першого правого квадрата і т.д. Рахують еритроцити, що знаходяться всередині маленьких квадратів, а також на лівому і верхньому боках великоого квадрата, а еритроцити на нижньому і правому боках не рахують.

Кількість еритроцитів в 1 мкл. крові визначаємо за формулою:

Х=

a – кількість еритроцитів, підрахованих у п’яти великих квадратах;

с – розбавлення крові; n - кількість квадратів у яких рахували еритроцити;

s – площа великого квадрата ( 1/25 мм²); h – висота камери (0,1 мм).

У п’яти великих квадратах підрахували 360 еритроцитів,формула виглядатиме так:

Х = =3,6 млн.ер.

5.4.2. Визначення кількості лейкоцитів в крові.

Меланжерний метод: набираємо кров у меланжер до мітки 0,5(розведення у 20 разів). Кінчик меланжера витираємо ватою. Набираємо 3 % розчин оцтової кислоти, забарвлений 1% розчином генціанвіолету до мітки 11. Знімаємо гумову трубочку, меланжер закриваємо з обох боків пальцями і струшуємо. До лічильної камери Горяєва притираємо покривне скельце, до появи райдужних кілець. Із меланжера на ватку видуваємо перші краплі крові,наступною краплею торкаємося збоку до покривного скельця і середньої пластинки камери. Внаслідок капілярності рідина заповнює камеру. Зайву рідину видаляємо ватою, або фільтрувальним папером. Клітини підраховуємо у 100 великих чистих квадратах, при малому збільшенні мікроскопа (ок.10-15;об.8).

Кількість лейкоцитів в 1 мкл. крові визначаємо за формулою:

Х=

a – кількість лейкоцитів, підрахованих у п’яти великих квадратах;

с – розбавлення крові; n - кількість квадратів у яких рахували лейкоцити;

s – площа великого квадрата ( 1/25 мм²); h – висота камери (0,1 мм).

У 100 великих квадратах підрахували 68 лейкоцитів.

Х== 3400 = 3,4 Г/л.

5.4.3. Визначення кількості гемоглобіну.

Гемоглобінціанідний метод: ми до 5 мл робочого розчину додали 0,02 мл крові і перемішали. Через 20 хвилин досліджуємо на фотоелектрокалориметрі з довжиною хвиль 540 нм (зелений світлофільтр) встановлюємо у кювету шириною 10 мм проти контрольної проби (робочий розчин або дистильована вода). Записуємо показники оптичної щільності розчинів, і за формулою чи калібрувальним графіком визначаємо вміст гемоглобіну в крові.

Оптична щільність – 8,75

=8,9 г/100мл, 89г/л

5.4.4. Визначення КП і ВГЕ.

Колірний показник – це насиченість еритроцитів(Ер₂) гемоглобіном (Нb₂) у хворої тварини, порівняно з аналогічним середнім показником у здорових тварин певного виду. Визначають за наступною формулою :

КП =

Нb₂ і Ер₂ – кількіть гемоглобіну та еритроцитів у досліджуваної тварини;

Ер₁ і Нb₁ – середній вміст гемоглобіну та еритроцитів у здорових тварин.

КП = = 0,6

Середній вміст гемоглобіну в одному еритроциті визначають діленням його вмісту в 1 л крові на кількість еритроцитів у тому ж об’ємі. ВГЕ виражають у пікограмах ( пг; 1 г = 10¹² пг ).

ВГЕ = = 24,7 пг

5.4.5. Лейкограма.

Визначення загальної кількості лейкоцитів не дає уявлення про кількість окремих видів лейкоцитів. Такі дані можна отримати при виведенні лейкограми – процентного співвідношення між окремими видами лейкоцитів.

Визначаємо на забарвлених мазках крові диференційованим підрахунком 100 або 200 лейкоцитів за методами Меандра або Філіпченка. Підраховуємо загальну кількість лейкоцитів, визначаємо абсолютну кількість кожного виду клітин в 1 мкл крові.

Метод Філіпченка:

Метод Меандра:

Вид тварин	Базофіли	Еозинофіли	Нейтрофіли			Лімфоцити	Моноцити
			юні	-	s
ВРХ	0-2	5-8	0-1	2-5	20-35	40-65	2-7	1
Вівці	0-1	4-12	0-2	3-6	35-45	40-50	2-5	2
Кози	0-1	3-12	-	1-5	29-38	45-64	2-4	3
Коні	0-1	2-6	0-1	3-6	45-62	25-44	2-4	4
Свині	0-1	1-4	0-2	2-4	40-48	40-50	2-6	5
Собаки	0-1	3-9	-	1-6	43-70	21-40	1-5	6
Коти	0-1	2-8	0-1	3-9	40-45	36-50	2-5	7