- •Федеральное агентство по образованию Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского
- •Учебно-методическое пособие Большой практикум
- •Содержание
- •Раздел 1. Белковый гомеостаз. Белки плазмы крови, диагностическое значение.
- •Раздел 11 3. Активность ферментов и изоферментов. Диагностическое значение их определения.
- •Раздел 111 4. Диагностическое значение определения отдельных показателей углеводов и родственных соединений.
- •Раздел 1у. Диагностическое значение определения показателей липидного обмена.
- •9. Значение определения гормонов
- •Белковый гомеостаз. Белки плазмы крови, диагностическое значение их определения
- •Методы определения общего белка крови
- •2.3. Осадочные пробы
- •2.3.1. Тимоловая проба
- •2.3.2. Сулемовая проба
- •2.3.3. Проба Вельтмана
- •2.2. Белковые фракции. Основные методы фракционирования белков сыворотки крови
- •Метод электрофоретического разделения на пленках целлюлозы
- •Разделение белков сыворотки крови методом электрофореза в полиакриламидном геле (пааг)
- •Характеристика основных белковых фракций и их диагностическое значение.
- •Определение некоторых индивидуальных белков сыворотки крови
- •Определение гаптоглобина
- •2.4.2. Определение содержания церулоплазмина
- •2.4.3. Определение гемоглобина
- •Активность ферментов и изоферментов. Диагностическое значение их определения
- •3.1. Методы определения активности ферментов
- •3.1.1. Метод определения аспартатаминотрансферазы (аст) с динитрофенилгидразином
- •3.1.2. Метод определения аланинаминотрансферразы (алт) в сыворотке и плазме крови с динитрофенилгидразином
- •3.1.3. Метод определения лактатдегидрогеназы (лдг)
- •3.1.4. Метод определения щелочной фосфатазы (щф)
- •3.1.5. Определение активности амилазы
- •3.1.6. Определение активности липазы
- •3.1.7. Определения креатинкиназы (кк)
- •4. Диагностическое значение определения отдельных показателей углеводов и родственных соединений
- •4.1. Определение концентрации глюкозы
- •4.2.Углеводные компоненты гликопротеидов
- •4.2.1 Исследование сиаловых кислот
- •4.2.2. Определение связанных с белком гексоз
- •4.2.3. Метод определения гексоз, связанных с серомукоидом
- •5. Диагностическое значение определения показателей липидного обмена
- •5.1. Унифицированный метод определения общего холестерина (метод Илька)
- •5.2. Унифицированный метод определения общего холестерина по реакции с хлорным железом (метод Златкис-Зака)
- •5.3. Унифицированный метод определения триглицеридов по реакции с ацетилацетоном после экстракции смесью гептана и изопропилового спирта
- •5.4. Фракционирование липопротеидов в полиакриламидном геле
- •6. Низкомолекулярные азотистые вещества
- •6.1. Уреазный метод определения мочевины
- •6.2. Уреазный метод определения мочевины по салицилатно-гипохлоритной реакции
- •6.3. Унифицированный метод определения креатина по цветной реакции Яффе
- •7. Пигменты. Билирубин
- •7.1. Унифицированный метод определения билирубина по диазореакции (метод Ендрассика-Грофа)
- •8. Гормоны
- •Метод совместного определения гистамина и серотонина
- •Онкомаркёры
- •Оценка надежности лабораторных методов исследования
- •Вопросы для контроля
- •Литература
- •Большой практикум «биомедицинские методы исследования гомеостаза организма человека» Программа
- •2. Белковый гомеостаз. Белки плазмы крови, диагностическое значение.
- •4. Диагностическое значение определения отдельных показателей углеводов и родственных соединений.
- •5. Диагностическое значение определения показателей липидного обмена.
4.2.Углеводные компоненты гликопротеидов
Вещества, содержащие белковый и углеводный компоненты, называются гликопротеидами. Различают гликопротеиды и протеогликаны. Гликопротеиды содержат короткие углеводные группы, в которых нет периодически повторяющихся олигосахаридных последовательностей. Протеогликаны или гликозаминпротеогликаны или аминополисахариды или мукополисахариды значительно богаче углеводами, каждая углеводная цепь состоит из повторяющихся дисахаридных фрагментов, содержащих аминосахар и уроновую кислоту или галактозу.
Большинство белков плазмы крови содержит некоторое количество углеводов, поэтому формально относятся к гликопротеинам (трансферрин, церулоплазмин, гаптоглобин и др.). Содержание их увеличивается при воспалительных процессах, в связи с чем их называют белками острой фазы и определяют в тех случаях, когда надо выявить воспалительный процесс или оценить его активность. При этом возможно несколько подходов:
Определение индивидуальных гликопротеидов острой фазы специфическими методами и
Выявление электрофоретических фракций богатых гликопротеидами
Определение суммы углеводов, связанных с сывороточными белками.
В состав гликопротеидов входят углеводы:
1) гексозы – галактоза и манноза и в небольших количествах глюкоза;
2) пентозы – ксилоза и арабиноза;
3) дезоксисахара – фукоза и рамноза;
4) аминосахара – ацетилглюкозамин и ацетилгалактозамин;
5) нейраминовая кислота и ее уксуснокислые эфиры, которые называются сиаловыми кислотами.
О количестве сывороточных гликопротеидов можно судить, определяя любой из этих компонентов, но широкое распространение нашло определение связанных с белком гексоз и сиаловых кислот.
Многие богатые углеводами белки обладают выраженными кислотными свойствами, растворимы в хлорной и трихлорной кислотах и составляют группу серомукоидов. О количестве серомукоидов можно судить по содержанию белкового или углеводного компонента. Содержание в плазме гексоз, связанных с белком, свидетельствует об общем количестве гликопротеидов, а определение гексоз, которые растворимы в хлорной кислоте и нерастворимы в фосфорновольфрамовой, служит показателем количества серомукоидов.
Протеогликанами богато межклеточное вещество соединительной ткани, патологические процессы в которой отражаются на обмене углеводного компонента . Протеогликаны очень гидрофильны, они способны впитывать большое количество воды, в связи с чем их раньше называли мукополисахариды.
Протеогликаны ( гликозаминогликаны, ГАГ) состоят из повторяющихся дисахаридных единиц, каждая из которых содержит аминосахар и уроновую, глюкуроновую кислоту. Глюкуроновую кислоту содержит гиалуроновая кислота, хондроитин- 4-сульфат, гепарин и гепарансульфат; дерматансульфат содержит идуроновую кислоту, а кератансульфат – галактозу.
Увеличение экскреции ГАГ с мочой служит признаком повреждения соединительной ткани вследствие иммунного процесса, воспаления, при тяжелых, деструктивных процессах, при преобладании фибротических, склеротических и дистрофических процессах.
