Эталоны ответов к ситуационным задачам промежуточной аттестации.

Задача № 1.

1. Поставить в известность руководителя лаборатории.

2. Разбившуюся пробирку с биоматериалом залить 3% хлорамином (или другим дезинфектантом, допущенным к использованию в лаборатории) на 60 минут

3. Влияют физические, химические, биологические факторы.

Физические факторы:

А. температура – по отношению к ней микробы делятся на психрофилы, мезофиллы, термофилы. Вегетативные формы бактерий чаще погибают при 80 – 100 С в течение 1 – 2 минут. Споровые формы бактерий более устойчивы и погибают при 165 – 175 С в течение 60 минут, или при 1 атм в течение 30 минут.

Б. высушивание – обезвоживание цитоплазмы бактерий приводит к гибели их.

В. лучистая энергия: влияние УФЛ приводит к денатурации ДНК клетки.

Г. Ультразвук – приводит к разрыву микробной клетки в результате повышения внутриклеточного давления.

Химические факторы: дезинфектанты губительно действуют на клетку. По механизму действия делятся на группы: 1. фенол, крезол, 2. окислители, 3. красители, 4. альдегиды т. д.

Биологические факторы: воздействие на патогенную микрофлору микробов антагонистов (например, антибиотикопродуцирующие штаммы микробов).

Задача № 2.

1. с целью определения подвижности у микробов.

2. на подготовленное предметное стекло нанести пипеткой каплю культуры и покрыть ее покровным стеклом. Чтобы не образовались пузырьки воздуха, покровное стекло подводят ребром к краю капли и резко опускают его.

3. темнопольная микроскопия.

Задача № 3.

1. посуда для серологических реакций должна быть чистой и сухой.

2. реакции агглютинации, гемагглютинации, преципитации, связывания комплемента

3. кровь оставляют на 1 час при комнатной температуре или ставят в термостат при 37 С на 30 минут для образования сгустка. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок пробирки пастеровской пипеткой или петлей («обводят»). Пробирку ставят в холодильник, обычно на 1 час, но не более 48 часов. За это время сгусток оседает на дно пробирки. Надосадочная жидкость слегка соломено – желтого цвета и есть сыворотка. Ее аккуратно отделяют от осадка, чтобы не захватить форменные элементы.

Задача № 4.

1. в реакцию необходимо применить физиологический раствор вместо дистиллированной води и корпускулярный диагностикум вместо молекулярного.

2. с целью серодиагностики.

е. 3. – установить в штатив агглютинационные пробирки: 6 – рабочих и 2 – контроли;

- подписать пробирки: на рабочих ставят разведения – 1: 100, 1: 200, 1 : 400, 1: 800, 1 : 1600;

- в отдельной пробирке развести сыворотку 1 : 50 (0,1 сыворотки + 4,9 физ. р –ра)

- во все рабочие пробирки внести по 1 мл физ. раствора

- в первую пробирку внести 1 мл сыворотки в разведении 1: 50, из первой пробирки перенести во вторую 1 мл, из второй – в третью и так далее; из последней пробирки 1 мл перенести в дез. раствор;

- во все рабочие пробирки внести по 1 – 2 капли корпускулярного диагностикума;

- далее ставим контроль сыворотки – «КС»: 1мл сыворотки в разведении 1 : 50; «КА» - контроль антигена – 1 мл физ. раствора + 1 – 2 капли диагностикума;

- термостатирование 2 часа при 37 С – первичный учет, окончательный через 24 часа при выдержке пробирок при комнатной температуре.

Задача № 5.

1. стерилизация – это обеспложивание, т.е. полное освобождение объектов окружающей среды от микробов и их спор; автоклавирование; простые среды стерилизуют при 1 атм 20 минут; сложные – при 0,5 атм 15 минут;

2. простые среды: МПА. МПБ, пептонная вода, б/н Хоттингера; среды с углеводами: Эндо, ЭМС, Плоскирева, Рессель, Олькеницкий, сахарный бульон, сахарный агар;

3. проводят с помощью индикаторных полосок фирмы «Винар»; между стерилизуемых объектов раскладывают не менее 5 индикаторных полосок (первоначальный цвет белый); при достижении нужной температуры цвет ее меняется (смотри цвет прилагаемой стандартной полоски); если 5 полосок изменили цвет, значит стерилизация прошла полная, если цвет изменили менее 5 - заново стерилизовать объект.

Задача № 6.

1. диски с антибиотиками, чистую жидкую микробную культуру, чашку Петри со средой Мюллера – Хинтона или АГВ, спиртовку, пинцет, штатив, маркер;

2. Действие антибиотиков оценивается по феномену задержки роста микробов вокруг дисков. Диаметр зон задержки роста микробов определяют с помощью специальной линейки, включая диаметр самого диска. Чувствительные микробы к антибиотику - диаметр зоны задержки более 10 мм, малочувствительные – менее 10 мм, устойчивые – полное отсутствие зоны задержки роста.

3. Антибиотики – это продукты жизнедеятельности живых организмов, способные избирательно убивать микробы или подавлять их рост. Классификация антибиотиков может быть основана на различных принципах: по источнику получения, химическому строению, механизму и спектру антимикробного действия, способу получения.

Задача № 7.

1. Для определения сахаролитической активности.

2. Микробы способны расщеплять сахара до кислоты, или до кислоты и газа. Кислотообразование определяем по изменению первоначального цвета среды; газообразование: по разрыву, расслоению плотных сред и вспениванию жидких.

3. Ряд Гисса состоит из 5 пробирок с питательной средой и разными сахарами в каждой пробирке: глюкоза, мальтоза, маннит, сахароза, лактоза.

- взять бак. петлю, профламбировать ее;

- подготовленной петлей взять чистую культуру из чашки Петри или пробирки;

- взять первую пробирку ряда Гисса, извлечь пробку, профламбировать ее и края пробирки;

- ввести бак. петлю с микробной культурой в пробирку и сделать посев уколом;

- извлечь из пробирки бак. петлю с остатками культуры, вновь обжечь края пробирки и пробку, закрыть пробкой пробирку и поставить в штатив;

- бак. петлю продезинфицировать над пламенем спиртовки, вновь взять исследуемую культуру и аналогично сделать посев во вторую, третью, четвертую, пятую пробирку.