Характеристика санитарно-показательных микроорганизмов

– индикаторов орального загрязнения

К индикаторам орального загрязнения относят представителей аэробных грамположительных кокков из семейств Micrococcaceae и Streptococcaceae. Они обычно обитают на слизистых оболочках полости рта и верхних дыхательных путей и способны выделяться в окружающую среду при разговоре, кашле, чихании.

Стафилококки (Staphylococcus) – неподвижные, аспорогенные, Грам⁺, факультативно-анаэробные бактерии семейства Micrococcaceae диаметром 0,5–1 мкм. Под микроскопом представлены несимметричными гроздьями. В клеточной стенке обнаруживается пептидогликан и ассоциированные с ним тейхоевые кислоты, а у S. aureus – протеин А.

Стафилококки растут на основных средах при 37 ⁰С, рН = 7…7,5, формируя гладкие колонии желто-оранжевого цвета. Цвет колоний обусловлен наличием липохромного пигмента, а его образование происходит только в присутствии кислорода и наиболее выражено на средах, содержащих кровь, углеводы или молоко. Большинство штаммов стафилококков растет на средах с 5–10 %-ным NaCl.

Восстанавливают нитраты, образуют сероводород, разлагают глюкозу, ксилозу, сахарозу, мальтозу, глицерин, маннит с выделением кислоты. Уреаза-положительны, крахмал не гидролизуют, индол не продуцируют.

Антигенная структура стафилококков сложная, вариабельная. Видоспецифичными антигенами являются тейхоевые кислоты. Типовой вид – S.aureus, синтезирующий золотистый или оранжевый пигмент, но встречаются и беспигментные штаммы. Некоторые штаммы продуцируют капсулу или слизистое вещество. В клеточной стенке содержится видоспецифичный преципитирующий белок А, в составе тейхоевых кислот - рибитол. Образуют коагулазу, α-токсин, термоустойчивую нуклеазу.

Обитают на коже и слизистых оболочках человека и животных, часто вызывают у них заболевания. В род также входят виды: S. saprophyticus, S.epidermidis, S.hominis и др.

Стрептококки (Streptococcus) – неподвижные факультативно-анаэробные, аспорогенные, Грам⁺ бактерии из семейства Streptococcaceae с диаметром клеток менее 1 мкм, располагаются попарно или цепочками, кроме штаммов группы D. Образуют капсулу. Питательные потребности сложные. Обычно растут на средах с добавлением крови, кровяной сыворотки, асцитической жидкости, углеводов. На плотных средах образуют мелкие сероватые колонии, на жидких дают придонный рост. Температурный оптимум – 37 ⁰С, рН = 7,2…7,4. Чувствительны к пенициллину и тетрациклинам. Погибают при пастеризации и действии рабочих растворов многих дезинфектантов и антисептиков.

Являются паразитами животных и человека. Обитают в дыхательных и пищеварительных путях, особенно в полости рта, носа, в толстом кишечнике. Выделяют 20 серогрупп: А, В, С, D…О. Для патологии человека особое значение имеют виды: S. pyogenes - β-гемолитический стрептококк группы А, S. pneumoniae, S. sanguis, S. salivarius, S. mitis, S. mutans.

Методические основы санитарно-микробиологического контроля

Основные методы контроля санитарно-микробиологического состояния самых разных объектов абсолютно идентичны, так как направлены на выявление общего микробного числа (ОМЧ), СПМ, патогенов и на определение степени доброкачественности каждого обследуемого объекта, то есть его санитарного состояния, характеризующего объект в целом. Практически в санитарной микробиологии используются два основных метода контроля за состоянием окружающей среды: прямое обнаружение патогенных микроорганизмов и косвенные методы, позволяющие опосредованно судить о наличии патогенов.

Прямой метод санитарно-микробиологического контроля считается наиболее точным и надежным критерием оценки эпидемиологической опасности. Отобранные для анализа образцы гомогенизируют и вводят краситель (эритрозин). Количественный учет патогенов осуществляют при использовании специальных камер Петрова или электронных счетчиков. Данный метод применяют в экстренных случаях (например, при авариях в системе водоснабжения или на очистных сооружениях) с целью получения срочного ответа о количественном содержании в тестируемых объектах патогенных микроорганизмов.

Описанный метод имеет массу недостатков, в частности низкую чувствительность, так как не дает возможности отличить живые и мертвые клетки микроорганизмов, не позволяет выявить микроорганизмы, обладающие субмикроскопическими размерами, и провоцирует получение ошибочных результатов при анализе образцов, загрязненных примесями.

Затруднения с выявлением патогенных микроорганизмов связаны со следующими причинами:

• патогены составляют лишь незначительную (1/30000) часть от всего видового разнообразия микрофлоры;

• патогены способны быстро изменяться во внешней среде, что затрудняет их распознавание;

• патогены не выдерживают конкуренции с сапротрофными микроорганизмами при их совместном культивировании на питательных средах;

• патогенные микроорганизмы невозможно культивировать на обычных средах, для этой цели необходимо использовать культуры тканей и клеток, а также яйца и эмбрионы лабораторных животных;

• выявление какого-либо патогенного вида не всегда свидетельствует, что в исследуемом объекте присутствуют другие виды патогенов.

Косвенные методы санитарно-микробиологического контроля - определение в исследуемых объектах ОМЧ и СПМ, которые хотя и опосредованно, но все же могут дать точный и надежный ответ о возникновении санитарных нарушений и появлении высокого уровня эпидемиологической опасности для человека, исходящих от природной среды и рукотворных объектов.

ОМЧ – общее микробное число (количественный показатель, характеризующий содержание жизнеспособных клеток микроорганизмов различных физиологических групп в 1 г или 1 мл). Критерий оценки: чем больше объект исследования загрязнен микроорганизмами, тем выше ОМЧ и тем вероятнее наличие большого количества патогенов в исследуемом образце, а, следовательно, и в тестируемом объекте окружающей человека среды обитания. В то же время нельзя не отметить, что во многих случаях большая численность ОМЧ означает большое количество сапротрофных микроорганизмов и незначительное – патогенов.

Определение СПМ также позволяет судить о наличии в исследуемых объектах патогенных микроорганизмов. Критерий оценки в этом случае: чем больше в объекте исследования санитарно-показательных микроорганизмов, тем больше он загрязнен фекалиями и тем вероятнее в нем присутствие патогенов. СПМ выявляют как при использовании метода прямого подсчета, так и методом культивирования на элективных (избирательных) питательных средах.

Содержание СПМ в объектах окружающей среды принято выражать в титрах и индексах. Титр – наименьшие объем (мл) или масса (г) исследуемых образцов, в которых обнаруживается хотя бы одна особь СПМ. Индекс – количество особей, обнаруживаемых в определенном объеме или массе исследуемого образца. Индекс и титр – величины обратные, зная один из них, можно легко выразить другой.

Следует иметь в виду, что выбор определенного вида СПМ – индикатора фекального или орального загрязнения, характеризующего тот или иной объект окружающей среды, отнюдь не случаен и базируется на допущениях:

• СПМ должен постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и постоянно выделяться в окружающую среду;

• СПМ не должен размножаться во внешней среде, исключая пищевые продукты;

• устойчивость СПМ во внешней среде, а следовательно, длительность выживания должны быть выше, чем у патогенных микроорганизмов;

• СПМ не должны иметь во внешней среде двойников, с которыми их можно перепутать;

• СПМ не должны видоизменяться во внешней среде;

• методы обнаружения СПМ должны быть экспрессными.

Мониторинг ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

и его значение для человеческой ЦИВИЛИЗАции