Задание 7. Количественное определение концентрации белка с помощью красителя бромфенолового синего (бфс) - демонстрационное

Принцип метода: Метод основан на связывании красителя бромфенолового синего с белками в кислой среде. При этом образуется окрашенный комплекс синего цвета с максимум поглощения при длине волны 610 нм. Окрашенный комплекс стабилен в течение 8 ч. Чувствительность метода составляет 10 мкг/мл.

Ход работы: Концентрацию белка определяют либо по калибровочной кривой, либо как в данном случае по пропорции. Составляют следующие пробы:

Реагенты, мл	Номера пробирок
	Контроль	1	2
Раствор БФС	3,0	3,0	3,0
Н2О	0,6	—	—
Стандартный раствор альбумина	—	0,6	—
Задача	—	—	0,6

Концентрация стандартного раствора альбумина составляет 0,5мг/мл.

Пробы выдерживают в течение 5 мин при комнатной температуре и затем фотометрируют против контроля при длине волны 610 нм. Окраска стабильна в течение 8 ч. Рассчитывают концентрацию белка с помощью пропорции.

7