Методы выделения
Иридоиды
В настоящее время не существует универсального метода выделения иридоидов. Анализ научных публикаций по этой теме позволяет сделать следующие обобщения:
Для выделения иридоидных гликозидов пригодно как высушенное, так и свежее растительное сырье.
Экстракцию растительного сырья можно проводить водой, водно-спиртовыми растворами (этанолом или метанолом) на холоду или при нагревании.
Для очистки от липофильных примесей целесообразно промывание водных растворов иридоидных гликозидов растворителями не смешивающимися с водой.
С целью освобождения от сопутствующих фенольных примесей целесообразно фильтрование водных растворов через слой нейтральной Al2O3.
5. Наиболее эффективный метод освобождения от примеси сахаров - адсорбция иридоидных гликозидов из их водных растворов на активированном угле, отмывание водой сахаров и последующая десорбция иридоидных гликозидов с угля водно-спиртовыми растворами.
6. Сгущение растворов иридоидных гликозидов следует проводить при пониженном давлении, минимальном тепловом воздействии и в нейтральной среде.
Разделение очищенных перечисленными методами иридоидных фракций на отдельные гликозиды
проводят хроматографией на колонках с полиамидным сорбентом силикагелем, сефадексом,
целлюлозой.
Т омыление ерпены:
Некоторые эфирные масла используются для получения индивидуальных терпенов, применяющихся как лекарственные средства: их кориандрового
масла получают цитралъ, применяющийся в глазной практике, из мятного
масла получают ментол, из пихтового масла получают левовращающую
камфору, из эфирного масла багульнику - ледол, для производства
препарата «Ледин».
4. Качественное обнаружение иридоидов в растительном сырье.
Содержание иридоидных гликозидов в растениях обычно высокое, порядка 1% и более, считая на вес сухого растительного сырья. Уже первым указанием па наличие иридоидов может служить изменение цвета растения (посинение или почернение) происходящее иногда в течение часа после сбора.
Универсального метода в достаточной степени однозначно определяющего наличие иридоидных гликозидов в растениях не существует. В зависимости от структурных особенностей иридоидов наиболее часто используются следующие реакции:
а) С щелочным раствором гидроксиламина и раствором окисного железа в соляной к-те. Эту реакцию дают иридоиды содержащие сложноэфирную связь.
Образовавшийся комплекс хлорида железа с гидроксамовыми к-ми окрашен в красно-фиолетовый цвет.
Эта реакция включена как качественная в ФС на траву пустырника, корневища и корни пиона уклоняющегося, корневища с корнями валерианы.
Другой распространенной реакцией является реакция Трима - Хилла.
Реакция Трима -Хилла (10 мл СН3СООН + 1 мл 0,2% СuS04 + 0,5 НCl (конц.)
При нагревании извлечения с этой смесью образуется синее или фиолетовое окрашивание. Эту реакцию дают аукубин, монотропин, асперулозид, но не дают, например, логанин и каталпол.
Для иридоидов валерианы кроме реакции с гидроксиламином и хлоридом окисного железа, наиболее характерной является реакция с концентрированной СНзСООН и НСl. Образующиеся пирилиевые соли валепотриатов окрашены в синий цвет. Эта реакция, получившая название "галацухром – реакция” включена в измененную редакцию ГФ XI ст. 77 на корни валерианы как качественная.
Чаще качественную идентификацию проводят на ТСХ пластинках. Чаще других используют реактив Шталя (п-ДМБА в смеси фосфорной и уксусной к-т), реактив Бэкона - Эдельмана (раствор бензидина и ТХУК в этаноле) и растворы H2SO4 различной концентрации. После опрыскивания хроматограмм этими реактивами их выдерживают несколько минут в сушильном шкафу при t=100-1050С. Реакция с реактивом Шталя используется в ГФXI для идентификации иридоидов в коре калины (сине-зеленое окрашивание) и в траве пустырника (сиреневое окрашивание). Реакция с разведенной Н2SO4 на ТСХ пластинках включена в ФС на траву пиона уклоняющегося и корневища и корни этого растения (пионифлорин - розовато-сиреневое окрашивание).