- •Методические указания к лабораторному практикуму по дисциплине «Общая биология и микробиология» для студентов направления 240700.62 «Биотехнология»
- •Введение
- •Правила работы при выполнении микробиологического практикума. Техника безопасности в микробиологической лаборатории.
- •1 Устройство микроскопа. Препараты для микроскопирования.
- •1.1 Микроскоп. Основные правила микроскопирования.
- •1.2 Приготовление препаратов для микроскопирования.
- •2 Питательные среды и их стерилизация. Техника посевов микроорганизмов. Выделение чистых культур.
- •2.1 Питательные среды. Стерилизация питательных сред и посуды
- •2.2 Техника посева и пересева культур микроорганизмов
- •2.3 Выделение чистых культур микроорганизмов.
- •3 Культуральные и морфологические признаки микроорганизмов.
- •5 Бактерии
- •5.1 Культуральные признаки бактерий
- •5.2 Выявление морфологических признаков бактерий путем окрашивания.
- •6 Определение количества клеток микроорганизмов высевом на плотные питательные среды (метод Коха).
- •7 Актиномицеты.
- •7.1 Культуральные и морфологические признаки актиномицетов.
- •7.2 Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
- •8 Грибы.
- •8.1 Культуральные признаки и морфологические признаки грибов
- •9 Определение размеров клеток.
- •10 Дрожжи.
- •10.1 Культуральные и морфологические признаки дрожжей.
- •10.2 Изучение псевдомицелиальной структуры дрожжей.
- •10.3 Определение сбраживающей способности дрожжей.
- •10.4 Количественный учёт микроорганизмов с помощью счётных камер.
- •11 Микробиологические методы исследования воздуха и пищевых продуктов.
- •11.1 Микробиологические методы исследования воздуха производственных помещений.
- •11.2 Микробиологические методы исследования пищевых продуктов.
- •11.2.1 Определение количества мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (кмафАнМ).
- •11.2.2 Определение бактерий группы кишечной палочки (бгкп).
- •11.2.3 Определение количества дрожжей и плесеней.
11 Микробиологические методы исследования воздуха и пищевых продуктов.
Обнаружение и количественный учет микроорганизмов в объектах окружающей среды необходимы при санитарно-гигиенических и экологических исследованиях для моделирования природных систем и разработке основ управления природными процессами, а также при контроле качества окружающей среды и продуктов питания, соответствия их гигиеническим нормативам, обеспечивающим безопасность условий труда и здоровье человека.
В соответствии с гигиеническими нормативами содержание патогенных микроорганизмов не допускается. Непатогенные микроорганизмы могут оказывать аллергенное воздействие на отдельных индивидуумов, вызывать порчу и непригодность использования продуктов и сырья. На содержание живых клеток микроорганизмов в производственной зоне установлены гигиенические нормативы.
11.1 Микробиологические методы исследования воздуха производственных помещений.
Воздух производственных помещений может стать источником микробного загрязнения сырья, полуфабрикатов и готовых пищевых продуктов, что может привести к ухудшению их качества, снижению сроков хранения, а также вызвать различные заболевания человека.
Состав микрофлоры и количество микроорганизмов, обнаруживаемых в 1 м3 воздуха (микробное число воздуха) зависят от санитарно-гигиенического состояния помещений, числа находящихся в помещении людей, состояния их здоровья и других условий.
В воздух могут попадать и патогенные микроорганизмы от животных и людей (больных и носителей).
Для микробиологического исследования воздуха пользуются методами оседания (седиментация), аспирации, а также используют мембранные фильтры (для исследования воздуха в зимних условиях). Седиментационные методы дают общее представление о встречающихся в воздухе микроорганизмах. Аспирационные (основаны на улавливании бактерий жидкостью) позволяют определить не только качественное, но и количественное содержание бактерий в определенном объеме воздуха.
Метод оседания основан на оседании клеток микроорганизмов и капель под влиянием силы тяжести на поверхности агаризованной питательной среды открытой чашки Петри. Чашки экспонируют 5-10-15 мин в зависимости от предполагаемого микробиологического загрязнения.
Метод оседания не дает количественного представления о содержании микрофлоры в воздухе, так как на открытых чашках плохо улавливаются тонкодисперсные фракции пылевых частиц, но задерживаются крупные частицы, которые оседают на поверхности среды.
Для расчёта микробного числа воздуха используют формулу:
Х = (а · 100 · 1000 · 5) / (в · 10 · t),
где Х – количество микробов в 1 м3 воздуха; а – количество колоний в чашке; в – площадь чашки; t – время экспозиции; 5 – время экспозиции; 10 – объём воздуха из которого происходит оседание микробов за 5 мин, л; 100 – площадь, на которую происходит оседание, см2; 1000 – объём воздуха, дм3.
Пробы воздуха следует отбирать на уровне дыхания сидящего или стоящего человека.
Задание:
1. Приготовить агаризованную ПС типа ГРМ-агар.
2. Приготовить для стерилизации чашки Петри (по 1 чашке на каждого студента).
3. Провести микробиологическое исследование воздуха в различных помещениях ВУЗа.