- •Федеральное агенство по образованИю
- •Оглавление
- •Биохимия простых белков
- •Лабораторная работа №1 Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №2 Реакции осаждения белков
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия Сложных белков (протеинов)
- •Лабораторная работа №3 Геминовая проба Тейхмана
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №4 Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №5 Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия ферменТов
- •Лабораторная работа №6 Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №7 Специфичность действия амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №8 Влияние температуры на активность α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №9 Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №10 Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны
- •Биохимия нуклеиновых кислот
- •Лабораторная работа №11 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Изучение реакций окисления
- •Лабораторная работа №12 Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №13 Обнаружение каталазы крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №14 Открытие пероксидазы
- •Лабораторная работа №15 Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Обмен углеводов
- •Лабораторная работа №16 Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-фкд»)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия липидов
- •Лабораторная работа №17 Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами
- •Лабораторная работа №18 Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №19 Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №20 Качественные реакции на холестерол
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия белков
- •Лабораторная работа №21 Качественный анализ желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №22 Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №23 Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия гормонов
- •Лабораторная работа №24 Качественная реакция на адреналин
- •Лабораторная работа №25 Обнаружение йодтиронинов
- •Витамины
- •Лабораторная работа №27 Качественные реакции на витамины Жирорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Водорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия печени
- •Лабораторная работа №27 Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №28 Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Калибровочный график для определения билирубина крови
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №29 Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочной кривой
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия крови
- •Лабораторная работа №30 Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика.
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия мочи
- •Лабораторная работа №31 Патологические компоненты мочи Качественные реакции на белок в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Определение глюкозы в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на кровяные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на желчные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на индикан в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Приложение Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях
- •Способы взятия крови
- •Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц
- •Фотоколориметрия
- •Построение калибровочных кривых.
- •Подготовка фотоколориметра к работе.
- •Измерение коэффициента пропускания.
- •Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •1. Электрофоретическое разделение белков сыворотки крови.
- •2. Окраска электрофореграмм.
- •3. Количественная оценка электрофореграмм.
- •Метод сахарной нагрузки
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Анализ гликемических кривых
- •Kлинико-диагностическое значение оценки гликемических кривых
- •Количественное определение кислотности желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок
- •Xод работы
Указания к оформлению лабораторной работы
В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, ход работы и зарисуйте схему полного распада РНК–протеинов с указанием, входящих в них компонентов.
Контрольные вопросы
Напишите схему распада нуклеопротеинов.
В чем отличие отдельных мононуклеотидов? Напишите реакцию гидролиза мононуклеотида (формулами).
Каков принцип выделения ДНК из ткани и её обнаружения?
Охарактеризуйте качественные реакции на составные части нуклеопротеинов.
Изучение реакций окисления
Биологическое окисление – это окисление различных веществ в клетке в процессе её жизнедеятельности.
Основной функцией биологического окисления является обеспечение организма энергией в доступной для использования форме (прежде всего в форме АТФ) и превращение питательных веществ в компоненты клеток.
Окисление субстрата в процессе дыхания начинается с его дегидрирования – отнятия водорода. Этот процесс катализируется ферментами дегидрогеназами, которые относятся к I классу ферментов – окисдоредуктазам. По химической природе анаэробные дегидрогеназы относятся к пиридинпротеинам и флавинпротеинам. Пиридинзависимые дегидрогеназы в качестве кофактора (кофермента) содержат никотинамидаденидиникулеотид (НАД+) или никотинамидадениндинуклеотидфосфат (НАДФ+). Флавинзависимые дегидрогеназы – флавинадениндинуклеотид (ФАД) или флавинмононуклеотид (ФМН).
Лабораторная работа №12 Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке
Фермент альдегиддегидрогеназа вырабатывается микроорганизмами, попадающими в молоко извне. По химической природе он относится к флавопротеинам, способным окислять альдегиды, в частности, формальдегид.
Принцип метода. При добавлении к некипяченому молоку формальдегида и метиленовой сини альдегиддегидрогеназа окисляет формальдегид в муравьиную кислоту, а освобождающийся при этом водород переносится на метиленовую синь, восстанавливая ее в бесцветное соединение.
Исследуемый материал и реактивы
1. Кипяченое молоко. 2. Некипяченое молоко. 3. Раствор формальдегида (0,4%). 4. Раствор метиленовой сини (0,01%).
Ход работы
В одну пробирку вносят 15 капель кипяченого молока, в другую — 15 капель некипяченого. В каждую пробирку вносят по капле 0,4% раствора формальдегида и по капле 0,01% раствора метиленовой сини. Пробирки встряхивают и закрывают пробками, чтобы создать относительно анаэробные условия. Пробирки помещают в термостат при 370С и отмечают через 5 мин. Постепенное обесцвечивание метиленовой сини.
Указания к оформлению лабораторной работы
В тетради для лабораторных работ запишите, принцип метода, ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска проб), сделайте вывод и укажите класс исследуемого Вами фермента.
Контрольные вопросы
К какому классу ферментов относится альдегиддегидрогеназа?
Назовите кофермент альдегиддегидрогеназы. Производным какого витамина является этот кофермент?
Лабораторная работа №13 Обнаружение каталазы крови
В процессе окислительно-восстановительных процессов в организме образуется токсичная для клеток перекись водорода. Обезвреживание перекиси водорода, путем разложения её на воду и молекулярный кислород, катализируется геминсодержащим ферментом – каталазой.
Каталаза содержится во всех тканях и жидкостях организма.
Принцип метода. В результате разложения перекиси водорода под действием каталазы крови происходит бурное выделение кислорода в виде пузырьков.