Тема 3 приготовление постоянных микропрепаратов. Подготовка биологических рисунков микрообъектов

Оборудование:

• микроскоп биологический рабочий, предметные и покровные стекла, препаровальные иглы, пинцет, скальпель, фильтровальная бумага, пипетка, склянка с водой, 8% и более концентрированный растворы Na Cl, вазелиновое масло

• Материалы для приготовления постоянных препаратов - глицерин-желатин, глянцеватели

• свежие материалы: луковица лука, листья элодеи (дополнительно - мниума), пыльца растений (дополнительно - споры плауна)

• Справочник по ботанической микротехнике

Работа 1. Приготовление временного и постоянного препарата однослойной ткани.

Изучение клетки эпидермы сочной чешуи луковицы лука (Allium cepa)

1.Приготовить предметное стекло с каплей воды.

2. Из мясистой чешуи луковицы скальпелем вырезать кусок около 1 см³. С внутренней стороны пинцетом или иглой снять прозрачную пленку эпидермы. Положить ее в каплю и накрыть покровным стеклом.

1. На слабом увеличении найти место без складок, пузырьков воздуха и повреждения клеток. Перевести на сильное увеличение.

2. Рассмотреть и зарисовать крупно одну клетку. Отметить оболочку, постенный слой цитоплазмы, ядро с ядрышками, вакуоль с клеточным соком.

3. Убрать препарат со столика микроскопа, и, не снимая покровного стекла, заменить воду под покровным стеклом 8%-ным раствором поваренной соли. Для этого каплю раствора нанести рядом с покровным стеклом, чтобы она слилась с водой, и, приложив фильтровальную бумагу с противоположной стороны, оттягивать жидкость (верхняя поверхность покровного стекла должна оставаться сухой).

4. При слабом увеличении найти клетки в состоянии плазмолиза. При сильном увеличении рассмотреть и зарисовать картину плазмолиза. Отметить отошедшую от оболочки цитоплазму.

5. Заместить жидкость в препарате более концентрированным раствором соли. Зарисовать картину плазмолиза, отметить нити Гехта (если есть).

6. Заместить жидкость в препарате чистой водой. Пронаблюдать деплазмолиз.

Работа 2. Приготовление постоянных препаратов кожицы лука, пыльцы, листа элодеи

1. Небольшой кусочек глицерин-желатина иглой перенести на предметное стекло, где находится кожица лука.

2. Стекло слегка нагреть на глянцевателе до расплавления глицерин-желатина и накрыть покровным стеклом.

3. Приготовить постоянные микропрепараты пыльцы и листа элодеи (или мниума).

Тема 4 приготовление срезов цилиндрических органов

Оборудование:

• микроскоп биологический рабочий предметные и покровные стекла, препаровальные иглы, пинцет, скальпель, фильтровальная бумага, пипетка, склянка с водой

• сердцевина бузины, клубень картофеля

• свежие материалы: корнеплод моркови, стебли и корни высших растений

• Справочник по ботанической микротехнике

Работа 1. Приготовление среза корнеплода моркови

1. На предметное стекло нанести 3 капли воды.

2. Подготовить для приготовления поперечного среза корнеплода моркови ровную площадку, перпендикулярную оси органа, для чего срезать зауженный кончик корнеплода. Бритву смочить и скользящим движением слева направо сделать несколько тонких небольших срезов, захватывающих часть подготовленной площадки.

3. Срезы перенести в подготовленные капли воды на предметном стекле. Накрыть покровными стеклами, опуская их сначала с одного края.

4. Привести микроскоп в рабочее положение и на слабом увеличении просмотреть полученные срезы.

5. Повторить работу, добиваясь получения тонких и нескошенных срезов.

6. Отрезать небольшой кусочек корнеплода и разрезать его вдоль на две равные части. С одной из половинок научиться делать продольные радиальные срезы (ход работы аналогичен проведенному процессу приготовления поперечного среза).

7. Вторую из половинок разрезанного вдоль кусочка корнеплода разрезать вдоль параллельно уже существующей продольной плоскости. Аналогично предыдущей работе с полученной площадки научиться делать продольные тангентальные срезы.

8. В тетради нарисовать схему сечения цилиндрического органа плоскостями поперечного, радиального и тангентального среза.

Работа 2. Приготовление срезов корней и стеблей высших растений

1. Приготовить срез стебля высшего растения.

2. Приготовить срез корня высшего растения.

3. Приготовить постоянные препараты срезов корня и стебля.