3.3.1 Розподільна хроматографія

Розподільна хроматографія побудована на різниці у величинах коефіцієнтів розподілу окремих компонентів між ру­хомою і нерухомою фазами.

Для хроматографування необхідна наявність двох фаз: нерухо­мої (полярні розчинники: вода, метиловий спирт) і рухомої (менш полярні рідини, що не змішуються з водою, - хлороформ та інші), а також твердого носія (папір, силікагель, алюмінію оксид).

Особливе значення мають різновиди розподільної хроматогра­фії - паперова і тонкошарова.

Розподільна хроматографія на папері

Цей спосіб ґрунтується на різному розподілі речовин між дво­ма рідинами, що не змішуються.

Як носій нерухомої фази використовується хроматографічний папір, який утримує у своїх порах воду - нерухомий розчинник. При обробці паперу рухомим розчинником нанесені на папір ре­човини, що хроматографуються, переходять у рухому фазу і, руха­ючись з різними швидкостями по капілярах паперу, розділяють­ся, утворюючи хроматограму.

Паперова хроматографія розділяється на висхідну, низхідну і кругову. Висхідні хроматограми одержують під час пересування рухомого розчинника по порах паперу знизу вгору, низхідні - згори вниз. Найбільш швидким є круговий спосіб, але хроматографування висхідним і низхідним способами дає більш повне роз­ділення компонентів.

Здатність речовини до пересування на папері характеризуєть­ся величиною R_f яка показує відношення швидкості руху речови­ни до швидкості руху розчинника.

Розподільна хроматографія в тонкому шарі сорбенту

Тонкошарова хроматографія є одним з найбільш зручних, швид­ких і достатньо точних методів розділення та ідентифікації орга­нічних та неорганічних сполук.

Відрізняють тонкошарову хроматографію із закріпленим ша­ром сорбенту, коли сорбент закріплюється на пластинці за допо­могою фіксатора і з незакріпленим шаром. Як сорбент викорис­товують силікагель, алюмінію оксид та ін. Часто використовують готові пластинки для тонкошарової хроматографії із закріпленим шаром сорбенту. Хроматографування проводять у спеціальних хроматографічних камерах. Нанесення досліджуваних проб і хро­матографування виконують аналогічно методу паперової хрома­тографії, відповідно наведеної далі методики хроматографічних визначень. Хроматографія в тонкому шарі сорбенту має ряд пере­ваг перед паперовою хроматографією:

• можливість використання як нерухомих фаз різноманітних сорбентів;

• висока швидкість процесу хроматографування;

• можливість використання агресивних рухомих фаз, які вза­ємодіють з папером;

• можливість використання для проявлення хроматограм аг­ресивних реагентів, які взаємодіють з папером.

Для кількісної оцінки здатності розділення речовин розрахо­вують величини R_f. Щоб запобігти впливу будь-яких побічних фак­торів на значення величин R_f зазвичай використовують метод свідків. Свідки (стандартні речовини) хроматографують паралель­но з пробою досліджуваної речовини. Збіг значень R_f досліджува­них речовин і взятих як свідки дає можливість встановлювати то­тожність речовин.