Определение микробного числа воздуха

Для работы используется питательная среда МПА (мясо-пептонный агар), разлитая в чашки Петри по 10 мл. Чашки засевают воздухом, выдерживают в термостате 5 суток при 35ºС, затем подсчитывают все выросшие колонии. Это число принимают за количество микробов, попавших первоначально на чашку. В зависимости от метода засева чашек воздухом (см. ниже) несколько отличается и методика подсчета результатов.

1. Посев методом Коха наиболее прост и сводится к тому, что чашку Петри открывают в помещении на 5 мин. За это время на поверхность чашки размером 100 см² оседает столько микробов, сколько находится их в 10 л воздуха. Площадь стандартной чашки Петри 78,5 см². Предположим, что на ней обнаружено в результате посева 25 колоний (т. е. 25 бактерий). Необходимо подсчитать, сколько бы бактерий осело на чашку площадью 100 см². Составим пропорцию:

25 бак. – 78,5 см²

бак. – 100 см²

бак.

Следовательно, 31 бактерия выросла бы на площади в 100 см², т. е. столько бактерий содержится в 10 л воздуха. Один кубический метр воздуха равен 1000 л, поэтому в нем будет содержаться бактерий. Полученное количество бактерий в 1 м³ воздуха сравнивают с нормами для каждого типа помещений. Опыт проводят в четырех повторах, с нормой сравнивается среднее количество бактерий.

Владея этим методом, чашки Петри можно размещать в различных животноводческих помещениях на различных уровнях, учитывая среднее количество бактерий (прил. 13).

К роме метода Коха, основанном на простом осаждении воздуха на поверхности питательной среды, можно для посева использовать различные приборы, дающие более точные данные.

2. П

   Рис. 25. Аппарат Кротова:

   1 – вентиль ротаметра; 2 – ротаметр; 3 – накидные замки, 4 – вращающийся диск, 5 – крышка; 6 – диск; 7 – клиновидная щель; 5 – корпус; 9 – основание

   осев аппаратом Кротова (рис. 25) основан на использовании ударного дей­ствия воздушной среды на питательную среду в чашках Петри. Прибор состоит из трех частей: для отбора воз­духа, микроманометра и электрической части. Сущ­ность его действия заключа­ется в том, что при работе электромотора вращается диск с поставленной на него чашкой Петри, центробеж­ный вентилятор засасывает через клиновидную щель в крышке воздух, который уда­ряется о поверхность пита­тельной среды, оставляя на ней микроорганизмы. За 1 мин прибор может засасывать от 25 до 50 л воздуха. В зависимости от предполагае­мого содержания микроорга­низмов в воздухе устанавли­вают ту или иную скорость его протекания. При обычных анализах пропускают 50 л возду­ха за 2 мин, при большом за­грязнении экспозицию со­кращают до 1 мин, иначе на чашках будет слишком много колоний и учесть их будет трудно. Рассчитывают по формуле

,

где количество вырос­ших на чашке коло­ний;

объем пропущенного через прибор возду­ха, л;

искомый объем воздуха, л.

3. Посев с помощью бактериоуловителя Речменского, состоящего из стеклянного цилиндра с ре­зервуаром, содержащим сте­рильную жидкость (физиоло­гический раствор, бульон). При прохождении воздуха происходит образование аэ­розоля и обсеменение жидко­сти, которая затем высеивается на питательные среды с последующим подсчетом выросших колоний.

4. Посев с помощью приборов, содержащих мем­бранные фильтры (Петрянова, «Микрофил» и др.), установленные на пути воздушной струи. Фильтры после контакта с воздухом прижимаются к поверхности питательных сред в чашках Петри; осевшие на них микробы переносятся в чашку, затем инкубируются в термостате и подсчитываются.