- •Внимание!
- •Занятие № 1. «Строение, свойства и функции белков».
- •Инструктаж по технике безопасности при работе в биохимической лаборатории.
- •Тема занятия: «Строение, функции и свойства белков».
- •Вопросы для контроля:
- •Тема: «Получение яичного альбумина».
- •Ход работы.
- •Анализ аминокислотного состава. Цветные реакции на белки.
- •1. Реакция на ароматические аминокислоты (реакция нитрования).
- •Ход работы.
- •2. Реакция на цистеин (реакция Фоля).
- •Ход работы.
- •Ход работы:
- •Занятие № 3 «Ферменты» (часть 1)
- •Тема: “влияние температуры на активность амилазы”.
- •Занятие 4 «Ферменты» (часть 2)
- •Лабораторная работа №4.
- •Ход работы.
- •Занятие 5. Строение и функции нуклеиновых кислот.
- •Лабораторная работа 6 «Выделение дезоксирибонуклеопротеидов из тканей животных»
- •Ход работы
- •Лабораторная работа 7. «Определение состава биополимера по результатам качественных реакций на продукты его гидролиза».
- •Ход работы
- •Лабораторная работа № 8. Тема: «качественная реакция на витамины (в1, с)».
- •Аскорбиновая кислота легко окисляется в дегидроаскорбиновую кислоту
- •Лабораторная работа № 9.
- •Ход работы.
- •Весенний семестр.
- •Ортотолуидиновый метод: определение глюкозы в сыворотке крови.
- •Ход работы:
- •Ход работы:
- •Указания к составлению отчета:
- •Лабораторная работа № 14. Определение содержания белка в моче.
- •Ход работы:
- •Принцип метода:
- •Реактивы, оборудование и исследуемый материал:
- •Ход работы.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема: «определение содержания общих липидов в сыворотке крови».
- •Тема: «определение сиаловых кислот в сыворотке крови методом гесса».
- •Тема: «определение перекиси липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой».
- •Ход работы.
- •(Метод мойдина и зака)».
- •Ход работы.
- •Тема: «качественная реакция на адреналин и фолликулин».
- •Ход работы.
- •Ход работы.
- •Для спиртового раствора фолликулина.
- •Для масляного раствора фолликулина.
- •Тема: «качественные реакции на гормон поджелудочной железы – инсулин».
- •Ход работы.
- •Тема: «реакция на билирубин».
- •Ход работы:
- •Тема: «определение содержания триацилглицеролов в сыворотке крови».
- •Ход работы:
Ход работы.
В одну пробирку наливают 5 капель раствора яичного белка, во вторую - раствора желатина. В пробирки добавляют 3-5 капель конц. азотной кислоты и нагревают. В первой пробирке образуется белый осадок, который при нагревании окрашивается в желтый цвет и постепенно растворяется (происходит гидролиз белка), который придает раствору желтую окраску. Пробирки охлаждают, к ним прибавляют по 10 капель 30%-ного раствора NаОН и наблюдают изменение окраски растворов в следствие образования натриевой соли динитротирозина.
2. Реакция на цистеин (реакция Фоля).
При добавлении к раствору белка раствора NaОН, ацетата свинца и последующем кипячении раствор начинает темнеть. Реакция обусловлена присутствием в белке цистеиновых и полуцистеиновых остатков, которые при нагревании в присутствии крепкой щелочи разрушаются с образованием сульфида натрия:
СН2SН СН2ОН
СНNH2 + 2 NaOH СНNH2 + Na2S + 2 Н2О
CООН COOH
цистеин серин
Ацетат свинца реагирует со щелочью с образованием плюмбата натрия:
(СН3СОО)2Рb + 2 NaOH Pb(ONa)2 + 2 CH3COOH
Сульфид натрия при взаимодействии с плюмбитом натрия дает черный осадок сульфида свинца:
Na2S + Pb(ONa)2 + 2 Н2О PbS + 4 NaOH
Ход работы.
В одну пробирку наливают 5 капель 1%-ного раствора яичного белка, во вторую - 1%-ный раствор желатина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель 30%-ного раствора NaOH и по 1 капле 5%-ного раствора ацетата свинца. При кипячении жидкость в пробирке с яичным белком темнеет, т. к. образуется черный осадок сульфида свинца. В пробирке с желатином черного осадка не образуется, т.к. желатин серосодержащих аминокислот не содержит.
3. Биуретовая реакция.
В одну пробирку наливают 5 капель 1%-ного раствора яичного белка, во вторую - 1%-ный раствор желатина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель 10%-ного раствора NaOH и по каплям 1%-ного раствора медного купороса. В начале появляется красноватая окраска, которая переходит в красно-фиолетовую и далее в сине-фиолетовую.
Занятие № 2
«Строение, свойства и функции белков»
Четвертичная структура белков. Простые и сложные белки. Глобулярные и фибриллярные белки.
Физико-химические свойства белков. Денатурация и ренатурация белков.
Методы разделения и очистки, их взаимосвязь с физико-химическими свойствами белков.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 2.
“Выделение казеина из молока”.
В молоке содержится специфический белок казеин, содержащий фосфор; 80% всех белков молока приходится на долю казеина. Этот белок обладает кислыми свойствами и находится в молоке в виде растворимой кальциевой соли.
Исследуемый материал: молоко.
Реактивы: 1%-ный раствор соляной кислоты, вода дистиллированная, 10%-ный раствор гидроксида натрия, концентрированная фосфорная кислота, молибденовый реактив, 1%-ный раствор сульфата меди.
Оборудование: химические стаканы емкостью 50 мл, мерные цилиндры на 10 мл, стеклянные палочки, воронки, бюретки, бумажные фильтры, штативы с пробирками.