Порядок выполнения работы

1. Наливают в две пробирки периблизительно по 5 мл раствора крахмала. В одну из них добавляют около 1 мл разбавленной слюны, которая должна быть предварительно тщательно прокипячена. В другую пробирку добавляют 1 мл не кипяченой разбавленной слюны.

2. Перемешивают содержимое и ставят обе пробирки в водяную баню при 37С на 10 минут.

3. Определение крахмала проводят в двух пробирках с 1 мл раствора Люголя.

4. Определение глюкозы с помощью реактива Фелинга: к 1 мл исследуемой слюны приливают 1 мл реактива Фелинга, перемешивают. Верхний слой жидкости нагревают до кипения, появляется желтый осадок гидроксида меди (I) или красный осадок гидроксида меди (II). Запишите результаты наблюдения и выводы.

Опыт 2. Влияние температуры на акривность сахаразы дрожжей

Реактивы:

1. Сахароза кристаллическая;

2. Реактив Фелинга;

3. Дрожжи.

Оборудование:

1. Водяная баня;

2. Пробирки;

3. Термометр.

Порядок выполнения работы

Наливают в две пробирки по 3 мл воды и вносят в каждую по несколько кристалликов сахарозы. В одну из них добавляют 1 мл предварительно прокипяченной водной взвеси дрожжей. В другую пробирку добавляют 1 мл некипяченого раствора дрожжей.

Перемешивают содержимое и ставят обе пробирки в водяную баню при 37С на 10 минут.

В гидролизе (или его отсутствии) убеждаются с помощью реактива Фелинга (см. опыт 1)

Объясните выпадение или отсутствие осадка. Напишите уравнение реакции.

2.6.2 Лабораторная работа №4 "Ферментативный гидролиз сахарозы в биологических объектах"

Реактивы:

1. Сахароза, 2%-ный раствор;

2. Реактив Фелинга;

3. Дрожжи;

4. Сахарная свекла;

5. Редис;

6. Кварцевый песок.

Оборудование:

1. Водяная баня;

2. Фарфоровая ступка;

3. Бумажные фильтры;

4. Пробирки;

5. Термометр.

Порядок выполнения работы

Прессованные дрожжи 2-3 г смешивают с 2-3 г кварцевого песка, добавляют 5 мл воды и тщательно растирают в фарфоровой ступке. Затем приливают еще 15 мл воды, нагретой до 40С и продолжают растирать в течение 10 минут.

Раствор отфильтровывают через складчатый фильтр. Первые порции мутного фильтрата сливают снова на фильтр.

В фильтрате будет находится -фруктофуранозидаза – фермент, расщепляющий сахарозу на глюкозу и фруктозу.

Ту же процедуру проделать и с кусочком корнеплода сахарной свеклы или редиса, получив в фильтрате раствор, содержащий дисахарид сахарозу.

Затем в три пробирки помещают по 5 мл раствора фильтрата свеклы или редиса. Одну оставляют для контроля, во-вторую приливают 1 мл фильтрата дрожжей, в третью – 1 мл фильтрата, предварительно прокипяченого.

Пробирки ставят в водяную баню с температурой 40С. Предварительно проводят опыт с 2%-ным раствором сахарозы.

Через 15-20 минут в них добавляют 5 мл реактива Фелинга, а затем содержимое следует хорошо прокипятить в пламени спиртовки.

В присутствии восстанавливающих сахаров выпадает кирпично-красный осадок меди (I).

На основании результатов опытов сделать вывод о действии фермента -фруктофуранозидазы и о влиянии на его активность высокой температуры.

Напишите уравнение реакции.