2. Исправленные параметры удерживания

Чтобы исключить влияние некоторых факторов на первичные параметры удерживания, их преобразуют («исправляют»). Среди таковых можно указать следующие.

Исправленное время удерживания (t'_R) — время, прошедшее с момента появления пика несорбирующегося газа до появления пика соответствующего соединения:

t'_R = t_R – t_M, (5)

где t_М — время удерживания несорбируемого компонента (иногда употребляют термин «мертвое» время удерживания). Исправленное время удерживания t'_R отвечает времени, в течение которого элюируемое вещество находится в неподвижной фазе (в растворенном или сорбированном состоянии). В газовой подвижной фазе все вещества, независимо от времени удерживания, проводят одно и то же время, равное t_M — поправка на объем колонки, занимаемый газовой фазой, объем дозатора, детектора и соединительных газовых линий.

Для экспериментального определения t_M необходимо измерить время удерживания какого-либо несорбируемого соединения, отличного от газа-носителя. В случае работы с катарометром можно за t_M взять время выхода пика воздуха. При работе с ДИПом можно приравнять t_M к времени удерживания метана.

Отношение приведенного времени удерживания к «мертвому» времени называется коэффициентом емкости (извлечения) k:

k = t'_R / t_M. (6)

Это отношение является характеристикой продолжительности нахождения молекул анализируемого соединения в неподвижной фазе относительно времени их пребывания в подвижной газовой фазе.

Исправленное расстояние удерживания − расстояние от пика несорбирующегося газа (l_M) до максимума выхода пика соответствующего компонента (l_R):

l'_R = l_R – l_M, (7)

а также исправленный удерживаемый объем, приведенный удерживаемый объем, эффективный удерживаемый объем т. д.

Вообще в практике хроматографического анализа вводятся десятки различных параметров удерживания, характеризующих хроматограмму.

Воспроизводимость и правильность измерений всех параметров удерживания зависят от класса применяемой аппаратуры, опыта опе­ратора и его квалификации. Основные ошибки, вызывающие погрешно­сти измерений, возникают по следующим причинам:

а)нестабильность температурного режима колонок, испарителя и скорости газа-осителя;

б)перегрузка колонки за счет большой дозы, немгновенность дозирования;

в)несинхронность операции дозирования и включения средств измерения времени удерживания или отметки начала ввода пробы.

При выполнении качественного анализа нужно стремиться исключить ошибки измерения или свести их к минимуму.

3. Закономерности хроматографического разделения веществ

При прохождении через колонку можно получить хроматограммы различного вида (рис. 6). Данные примеры иллюстрируют хроматографическое разделение, отличающиеся разрешением, эффективностью при равной селективности (рис. 5, а и б) и селективностью при равной эффективности (рис. 5, в и г). Это сохраняется и при различном соотношении высоты пиков. Все теории хроматографического разделение сводятся к рассмотрению этих величин.

Прохождение зоны вещества через колонку всегда сопровождается ее размытием. В итоге ухудшается разделение компонентов смеси. Таким образом, с точки зрения конечного результата, т.е. определения компо­нентов пробы, размывание является нежелательным процессом и должно сводится к минимуму.

В соответствии с классическими представлениями размывание зон определяется тремя, считающимися независимыми, факторами: неравно­мерностью движения потока подвижной фазы, молекулярной диффузией и тем, что система не достигает состояния равновесия.