- •Содержание
- •Тема 1 Общая физиология крови 2
- •Тема 1Общая физиология крови л/р1. Методы механического обездвиживания мелких грызунов. Техника взятия крови, подсчета форменных элементов у человека и крысы.
- •Методы обездвиживания мелких грызунов
- •Устройство смесителя
- •Устройство и подготовка счетной камеры (гемоцитометра)
- •Техника взятия капллярной крови у крыс
- •Техника взятия капллярной крови у человека
- •Л/р2. Определение гематокрита методом Уинторба.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Тема 2Физиология эритроцитов л/р3. Подсчет эритроцитов.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р4. Определение содержания гемоглобина в крови.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р5. Определение границ осмотической устойчивости эритроцитов, наблюдение осмотического гемолиза.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р6. Агрегация эритроцитов в микроциркуляторном русле.
- •Тема 3Физиология лейкоцитов л/р7. Подсчет лейкоцитов крови.
- •Л/р8. Освоение техники приготовления мазка крови, его фиксации и окраски. Подсчет лейкоцитарной формулы и лейкоцитарного профиля.
- •Тема 4Физиология тромбоцитов л/р9. Коагулометрия.
- •Тема 5Иммунные реакции л/р10. Определение групповой принадлежности крови
- •Основные источники, использованные при подготовке методических рекомендаций:
Тема 4Физиология тромбоцитов л/р9. Коагулометрия.
Цель
Овладеть техникой коагулометрии. Определить время свертывания крови.
Приборы и материалы
1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
2. Предметные стекла, капилляр от гемометра Сали, стеклянные палочки, мерные пипетки, термостат или печка с водяной баней, термометр. Объект исследования: белая лабораторная крыса или человек.
Ход работы.
1. Коагулометрия по Масу и Магро. На предметное стекло наносят каплю дистводы, а рядом – каплю крови, взятой с помощью капилляра от гемометра Сали. Капли быстро смешивают и помещают во влажную теплую среду (37°). Каждые 30 с кончиком палочки делают несколько зигзагообразных движений в смешанной капле. Время от момента взятия крови (прокола пальца) до того момента, когда за палочкой начнут тянуться нити фибрина, считается временем свертывания крови.
2. Микрометод (модификация метода Ли и Уайта). Кровь, взятую капилляром от гемометра Сали выпускают в среднюю пробирку гемометра и сразу же включают секундомер. Пробирку ставят на водяную баню (37°). Через 2 мин после включения секундомера, а затем через каждые 30 сек, ее наклоняют на 50-60°. Пока кровь не свернулась, она при таком наклоне растекается по стенке. При наступлении свертывания растекание крови прекращается. В этот момент выключают секундомер.
Оба метода из-за малого количества крови и отсутствия поправки на турбулентное движение крови уступают не только современным стандартизированным методикам исследования гемокоагуляции, но и классическому методу Ли и Уайта. Несмотря на это, они могут использоваться при диагностике грубых нарушений гемокоагуляции.
Рекомендации к оформлению.
Коротко записываю название, цель и ход работы. В выводах описывают результаты и сравнивают их с нормой. В норме время свертывания составляет 5-10 минут. При отклонении от нормы описывают его предполагаемые причины. Гипокоагуляция может быть связано с выраженным дефицитом одного или нескольких факторов свертывания либо с избытком в крови гепарина и др. антикоагулянтов. Увеличение времени свертывания крови отмечается при беременности (физиологическое), постгеморрагической анемии, тромбоцитопатиях, лейкозах, циррозе печени, снижении сопротивляемости капиллярной стенки к травме, длительном применении некоторых лекарственных средств (ацетилсалициловой кислоты). В наибольшей степени на показаниях теста отражается дефицит факторов, участвующих во внутреннем механизме образования протромбиназы (XII, XI, IX и VIII факторов), а также фибриногена. Однако при уровне VIII, IX и других факторов выше 4% нормы, время свертывания становится, как правило, нормальным. Поэтому данный тест не пригоден для выявления легких форм гемофилии, для контроля достаточности заместительной терапии и предоперационной подготовки.
Гиперкоагуляция наблюдается при гемофилии, апластической анемии.
При диссеминированном внутрисосудистом свертывании (ДВС-синдроме) тест выявляет кратковременную гиперкоагуляцию на протяжении первой минуты, а затем длительный период гипокоагуляции, вплоть до полной несвертываемости крови.