Тема 3Физиология лейкоцитов л/р7. Подсчет лейкоцитов крови.

Цель

Овладеть техникой подсчета лейкоцитов в камере, определить их количество в крови белой крысы.

Приборы и материалы

1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.

2. Микроскопы, счетные камеры, смесители, покровные стекла, мандрены, резиновые трубочки, 2-3%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим. Объект исследования: белая лабораторная крыса или человек.

Ход работы.

Подсчет лейкоцитов камерным методом обычно выполняют, следуя указаниям л/р 1. Его можно вести при малом увеличении. Камеру выбирают самостоятельно. Раствор уксусной кислоты гемолизирует эритроциты, а ядра лейкоцитов при этом окрашиваются в голубой цвет и отчетливо видны.

Рекомендации к оформлению:

Коротко запишите название л/р, ее цель и ход работы. Результаты сравните с нормой. В норме общее количество лейкоцитов (WBC) составляет 4,0×10⁹/л-8,8×10⁹ /л. У новорожденных детей, особенно в первые дни жизни, количество лейкоцитов может сильно варьировать от 9 до 30×10⁹/л. У детей в возрасте 1-3 года – в пределах 6-17×10⁹/л, а в 6-10 лет в пределах 6-11×10⁹/л. У крыс это количество составляет 8-14×10⁹/л. При отклонении от нормы коротко опишите его возможные причины. Лейкоцитоз может развиваться по нескольким причинам: 1. Ускорение созревания лейкоцитов под воздействием стимуляторов лейкопоэза: физических и химических факторов воспаления, продуктов распада тканей, гипоксемии, иммунных комплексов, некоторых токсичнов (в т.ч. молочной кислоты), повышенной функции гипофизарно-надпочечниковой системы, контролирующей процесс созревания лейкоцитов, и др.. Большинство из этих факторов являются естественными сигналами к активации защитных функций лейкоцитов. 2. Пролиферация одного из ростков кроветворения в результате неконтролируемого опухолевого роста (лейкозы). 3. Выраженная сосудистая реакция с высвобождением большого количества лейкоцитов из кровяных депо. 4. Иногда у здоровых людей после приема пищи, богатой белком, после мышечной нагрузки ( вследствие кратковременного усиления метаболизма тканей); после стресса, перегревания или охлаждения (в основе лежат выраженные сосудистые реакции). Физиологический лейкоцитоз в большинстве случаев является умеренным (до 10×10⁹/л-12×10⁹/л, и кратковременным (2–3 часа). Относительно длительное повышение числа лейкоцитов наблюдается у беременных и пациентов, принимающих кортикостероиды, АКТГ.

Причинами патологического лейкоцитоза являются: 1. Острые бактериальные инфекции. 2. Любые острые и хронические (в стадии обострения) воспалительные заболевания. 3. Некрозы (инфаркт миокарда, инсульт, панкреонекроз, инфаркт кишечника, почек, селезенки, обширные ожоги и т. д.) и/или интоксикации (уремия, диабетический кетоацидоз и др.). 4. Гипоксемия (например вследствие острой кровопотери и др.). 5. Действие токсинов (угарный газ, ртуть, производные бензола, свинец и др.), ионизирующего излучения. 6. Злокачественные новообразования. 7. Лейкозы, полицитемия. 9. Заболевания, сопровождающиеся иммунными реакциями (коллагенозы, сывороточная болезнь, острый гломерулонефрит и др.). Лейкоцитоз в большинстве случаев отражает удовлетворительную реактивность системы кроветворения (если речь идет не о перераспределении кровотока, изменении проницаемости эндотелия, лейкозах). Наиболее выраженный лейкоцитоз встречается при 1) лейкозах и 2) гнойных заболеваниях (абсцесс, гангрена и т. п.). Отсутствие лейкоцитоза при вышеперечисленных заболеваниях связано со снижением иммунной сопротивляемости организма.

Лейкопения (WBC < 4,0×10⁹/л) обусловлена угнетением лейкопоэза, наблюдается при следующих состояниях: 1. Вирусные инфекции (грипп, корь, краснуха, вирусный гепатит, СПИД и др.). Исключение составляют вирусные заболевания дыхательных путей, оспа и некоторые другие. 2. Некоторые бактериальные (брюшной тиф, паратифы, бруцеллез и др.), риккетсиальные (сыпной тиф, риккетсиоз и др.) и протозойные инфекции (малярия и др.). 3. Все виды генерализованной инфекции (септицемия, милиарный туберкулез и др.). 4. Гипоплазия и аплазия костного мозга. 5. Побочное действие цитостатических препаратов, антибиотиков, сульфаниламидов, нестероидных противовоспалительных препаратов, тиреостатиков и некоторых других медикаментов. 6. Агранулоцитоз, сопровождающийся выраженным уменьшением или исчезновением из периферической крови гранулоцитов (нейтрофилов). 7. Некоторые аутоиммунные заболевания. 8. Спленомегалия, нередко сопровождающаяся развитием синдрома гиперспленизма (лейкопения, анемия, тромбоцитопения). 10. Гипотиреоз. 11. Анафилактический шок. 12. Метастазы опухолей в костный мозг. Наиболее выраженная лейкопения (до 1-1,5×10⁹/л) встречается при трех патологических состояниях: 1) апластической анемии; 2) агранулоцитозе; 3) после лучевых воздействий.