Л/р2. Определение гематокрита методом Уинторба.

Цель.

Ознакомиться с техникой определения гематокрита. Освоить метод центрифугирования цельной крови.

Приборы и материалы.

1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.

2. Центрифуга, градуированные трубочки, резиночки. Объект исследования: белая лабораторная крыса или человек.

Ход работы.

У обездвиженных крыс производится забор капиллярной крови (см. л/р 1) в градуированные трубочки, края которых затем закрываются с помощью мягких резиночек. Трубочки следует поместить в гнезда центрифуги, и включить ее на 30 мин. в режиме 1000 об/мин.

После выключения центрифуги необходимо дождаться ее окончательной остановки, после чего извлечь трубочки, и по нанесенной на них шкале определить гематокрит – часть объёма крови, приходящаяся на форменные элементы крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты). Гематокрит (Ht) выражают в процентах к общему объему крови (тогда он обозначается в %), или в литрах на литр (л/л) - тогда он обозначается десятичной дробью (с точностью до сотых), соответствующей доле форменных элементов в 1 литре крови.

Следует обратить внимание на распределение форменных элементов: эритроциты скапливаются на периферии, лейкоциты формируют тонкий белый поясок, а над ним расположена плазма. Это происходит, потому что плотность лейкоцитов и кровяных пластинок ниже, чем эритроцитов.

Рекомендации к оформлению.

К оротко запишите название л/р, ее цель и ход работы. В выводах следует сравнить полученные значения с нормой. Объяснить возможные расхождения. В норме гематокрит мужчины равен 0,41-0,53, а женщины – 0,36-0,46. У новорождённых гематокрит примерно на 20 % выше, а у маленьких детей – примерно на 10 % ниже, чем у взрослого. У крыс гематокрит на 2-4% больше, чем у человека. Изменение гематокрита связано преимущественно с изменением количества эритроцитов. Следует также учитывать, что реологические свойства эритроцитов, от которых зависит вязкость крови и гематокрит, различны в венозной, артериальной и капиллярной крови. Среднее значение гематокрита составляет 0,9 от гематокрита крови, взятой из локтевой вены.

Снижение количества эритроцитов наиболее часто встречается в клинической практике и является одним из характерных признаков анемий и острой кровопотери. Следует помнить, однако, о возможности относительной эритроцитопении, связанной с увеличением объема плазмы (гидремия), за счет усиленного притока тканевой жидкости в период схождения сердечных или почечных отеков или при введении в кровяное русло больших количеств жидкости (внутривенные инфузии) и т. п.

Повышение количества эритроцитов (эритроцитоз) может быть обусловлено двумя причинами: 1. Эритремией (полицитемией, болезнью Вакеза) – заболеванием, в основе которого лежит миелопролиферативный процесс в костном мозге. Заболевание относится к числу гемобластозов и обычно сопровождается пролиферацией других ростков кроветворения. В этих случаях выраженный эритроцитоз обычно сочетается с лейкоцитозом и тромбоцитозом.

2. Вторичными эритроцитозами, которые могут быть абсолютными и относительными. Вторичные абсолютные эритроцитозы обусловлены усилением гемопоэза в костном мозге. Они характеризуются увеличением объема циркулирующих эритроцитов при малоизмененном объеме циркулирующей крови. Наиболее частыми причинами вторичных абсолютных эритроцитозов являются: а) хронические обструктивные заболевания легких (хронический обструктивный бронхит, бронхиальная астма, обструктивная эмфизема легких), сопровождающиеся выраженной дыхательной и сердечно-легочной недостаточностью; б) врожденные или приобретенные пороки сердца с признаками нарушения периферического кровообращения и гипоксией органов; в) первичная легочная гипертензия (болезнь Аэрза); г) синдром Пиквика (ожирение, сочетающееся с артериальной гипертензией и легочной недостаточностью); д) пребывание в высокогорных районах; е) стеноз почечных артерий; ж) поликистоз почек; з) гидронефроз; и) некоторые злокачественные новообразования: гипернефроидный рак почек, первичный рак печени, гормонально-активные опухоли (рак надпочечников, аденома гипофиза); к) болезнь и синдром Кушинга; л) лечение стероидами. Как видно из вышеперечисленного, во многих случаях (см. пункты а-д) вторичный абсолютный эритроцитоз обусловлен гипоксией органов, в частности, гипоксией почек, что сопровождается усиленной выработкой эритропоэтических факторов, стимулирующих эритропоэз. Повышенное образование эритропоэтинов характерно также для многих заболеваний почек (е–з). При некоторых опухолях, помимо эритропоэтинов, стимуляция эритропоэза может быть связана с усиленной выработкой глюкокортикостероидов (опухоль коркового слоя надпочечников, аденома гипофиза). Вторичный относительный эритроцитоз возникает в связи с уменьшением объема плазмы при неизмененном объеме циркулирующих эритроцитов. При этом уменьшается также общий объем циркулирующей крови. Наиболее частыми причинами вторичных относительных эритроцитозов являются заболевания и синдромы, сопровождающиеся быстрой и массивной потерей жидкости: а) неукротимая обильная рвота; б) диарея (энтериты, холера и др.); в) массивные ожоги; г) шок.