Индикация бактериальных средств

Одной из самых сложных и необходимых мер борьбы с ин­фекционными болезнями, особенно при бактериологическом на­падении, является индикация патогенных микробов. От того, как быстро обнаружен возбудитель (возбудители), чем раньше они типированы, тем полнее возможности дальнейших меропри­ятий.

Специфическая индикация – это комплекс мероприятий, про­водимых для быстрого обнаружения патогенных бактерий, гриб­ков, риккетсий, вирусов, бактериальных токсинов и определения их видовой принадлежности. Индикация – относительно мало раз­работанная глава микробиологии. Лишь в последние годы она стала обогащаться более современными методами исследований.

Индикация проводится с учетом возможного наличия в иссле­дуемом материале различных и в первую очередь патогенных микробов и их токсинов. Индикацию следует начинать с прие­мов, в первую очередь выявляющих возбудителей особо опасных инфекций.

В условиях бактериологической войны наиболее вероятным способом распространения микробов, вирусов и пр. станет аэро­зольный способ. Он может быть использован не только для рас­пространения так называемых «аэрогенных» (дифтерия, чума и пр.), но и для микробов других групп, особенно риккетсиозов.

В связи с этим исследования необходимо проводить на на­личие всех микроорганизмов, которые возможно могут быть применены при биологическом нападении.

При индикации важно строго выполнять правила забора проб и срочной доставки их в лабораторию. Не менее важна чувствительность того или иного метода. К сожалению, совре­менные методы бактериологических исследований в ряде слу­чаев мало чувствительны и не всегда позволяют обнаружить в пробе единичные микробные клетки.

При индикации патогенных микробов бактериолог может встретить измененные формы микроорганизмов. Они могут воз­никнуть не преднамеренно, а в силу воздействия факторов внеш­ней среды. Так, у чумных микробов, распыленных в воздухе, наблюдается понижение потребности в кислороде и ослабленная вирулентность для морских свинок.

Большое значение приобретает изменчивость микробов. До­казано, что под действием ряда мутагенных факторов могут воз­никать штаммы, не растущие на обычных питательных средах, изменяющие не только свою антигенную структуру, но и отно­шение к антибиотикам, питательным средам, дезинфицирующим веществам и пр. Необходимо разработать специальные, пригод­ные для обнаружения таких штаммов методы.

Основное направление бактериологических исследований при индикации — получение чистой культуры с последующей ее идентификацией всеми современными методами.

Различают специфическую и неспецифическую индикацию.

Неспецифическая индикация

Методы неспецифической индикации являются общими для бактерий и вирусов и сводятся к визуальному наблюдению за районом предполагаемого заражения, а также к определению увеличенной концентрации аэрозольных частиц и животного белка в воздухе, сравнительно с предыдущим периодом или со средними данными обычной концентрации. Это определение осу­щест­вля­ется с помощью приборов, работающих на физико-хими­ческих принципах.

Как было указано выше, наиболее вероятным способом рас­пространения патогенных микробов является аэрогенный. По­явление аэрозольного облака за летящим самолетом — простей­ший визуальный сигнал бактериологического нападения. Метод визуального наблюдения отличается простотой и, несмотря на субъективность результатов, позволяет обнаруживать подозри­тельные частицы пыли, порошкообразные вещества, капли жид­кости, переносчиков и грызунов и, при опре­де­ленных условиях, даже аэрозольный туман.

Наиболее эффективным способом рассеивания микроорганиз­мов служит аэрозоль, поэтому особенную ценность представля­ют устройства для автоматического улавливания в воздухе белка и анализа частиц аэрозоля. К таким устройствам относятся струнные фотоэлектриче­ские счетчики. Принцип конструкции струнных счетчиков со­стоит в том, что в этом приборе возникают электрические им­пульсы при ударе мельчайших частиц о медную нить. Импульсы в дальнейшем усиливаются и передаются в счетчик, способный учесть до 2000 частиц в секунду. Фотоэлектрический счетчик учитывает взвешенные в воздухе частицы. Усеянный аэрозолями свет учитывается фотоэлемен­том, который посылает на усилитель, последний автоматически определяет интенсивность заражения (до 1000 частиц в 1 мл воздуха).

Названные типы приборов постоянно совершенствуются. На­ряду с автоматическими сигнализаторами для улавливания и учета частиц аэрозоля создаются различные модели импакторов, аэрозолескопов, электростатических и фотоэлектронных счетчиков и других анализирующих устройств.

Наиболее современными являются каскадные импакторы, в которых происходит принудительная седиментация частиц аэрозоля на стеклянные пластинки с последующим их анализом с помощью светового микроскопа. Термопреципитаторы обеспе­чивают осаждение частиц на движущуюся бумажную или пласт­массовую ленту. Электростатические счетчики учитывают элек­трические импульсы, возникающие при ударе частиц о медную нить, аэрозолескопы подсчитывают частицы аэрозоля, опреде­ляют их размеры; фотоэлектронные счетчики основаны на улав­лива­нии фотоэлементом лучей света, рассеянных частицами аэро­золя, и трансформации их в электрические импульсы, улавли­ваемые счетчиком.

Устройства, предложенные для исследования воздуха на бе­лок, работают на принципах той или иной химической реакции (биуретовая, пиролиза и др.).

Биуретовая проба. К суспензии микробов прибавля­ют гидроокись натрия и сульфат меди, и с помощью фотоэлек­трического абсорбциометра определяют интенсивность пурпур­ной окраски, которая пропорциональна количеству микроорга­низмов. Этот метод прост, но не чувствителен.

Более эффективная реакция пиролиза — разложение белка под действием высокой температуры. При 315—482° мик­робные клетки разлагаются и образуют синильную кислоту, определя­е­мую специальным индикатором. Однако этим методом нельзя определить происхождение белка.

Необходимость методов неспецифической индикации несом­ненна. Однако эффективность существующих приборов неодина­кова и часто недостаточна. Необходимы упрощения их конст­рукции и использования мощных воздухозаборников. Наиболее перспективными из них являются автоматические сигнализаторы, сочетающие принципы улавливания белка и подсчет частиц аэрозоля с одновременной сигнализацией и распылением в воз­духе бактерицидных веществ.