
- •Министерство сельского хозяйства российской федерации
- •Опд.Ф.07.01 фитопатология
- •Методические указания Специальность 110102 Агроэкология
- •Тема 7. Методы фитоэкспертизы семян. Головневые болезни зерновых культур. Ржавчинные и прочие болезни зерновых культур
- •Общие сведения
- •Ржавчинные и прочие болезни зерновых культур общие сведения
- •Методы фитоэкспертизы семян общие сведения
- •Порядок выполнения работы:
- •Описание болезней сельскохозяйственных культур
- •Вопросы для самоконтроля:
Методы фитоэкспертизы семян общие сведения
В числе вредоносных болезней зерновых культур, передающихся семенами, головневые занимают одно из первых мест. В случае сильного поражения растений пшеницы и ячменя видами твердой головни зерно нового урожая ухудшается до такой степени, что может стать непригодным для употребления не только в пищу человеку, но и на корм домашним животным.
Определение поверхностной заспоренности семян пшеницы, ржи, ячменя и овса твердой головней; ячменя ложной пыльной (черной) головней и проса обыкновенной головней проводят методом центрифугирования. Для этого отсчитывают подряд две пробы по 100 семян и помещают их в пробирки, заливают 10 мл воды и взбалтывают в течение 5-10 минут. После этого промывную воду сливают в отдельную чистую пробирку центрифуги и центрифугируют в течение 3 минут. Затем прозрачную жидкость сливают, осадок взмучивают пипеткой и готовят препараты для микроскопирования. Идентифицируют гриб по спорам под микроскопом. Подсчет спор в суспензии осуществляют в камере Горяева.
Видовая принадлежность пыльной головни пшеницы, ржи, овса в полевых условиях устанавливается по разрушенным частям колоса, содержащего рыхлую споровую массу. Для определения вида пыльной или ложной пыльной (черной) головни ячменя в посевах необходимо с каждого поля отобрать не менее 10 пораженных колосьев, которые отдельно помещают в бумажный пакет, снабжают соответствующей этикеткой с указанием сорта и номера поля. Затем с каждого пораженного колоса берут три пробы хламидоспор, которые высевают в три капли воды, нанесенные на предметное стекло, и ставят в чашки Петри на несколько слоев фильтровальной бумаги, увлажненной водопроводной водой. Чашки помещают в термостат с температурой 20-22 °С. Через сутки проводят определение вида возбудителя. Это делается следующим образом. Каплю воды с содержащимися в ней хламидоспорами покрывают покровным
7
стеклом и просматривают под микроскопом. Вид возбудителя легко определить по признаку прорастания хламидоспор.
Хламидоспоры ложной пыльной головни прорастают без базидий, одной ростковой трубочкой.
Определение процента семян пшеницы, ржи и ячменя, зараженных пыльной головней, и глубины поражения осуществляют эмбриональным методом. Для этого берут пробу - 1000 штук семян, заливают их одним литром 10% раствора NaOH или КОН и держат 24 часа при комнатной температуре, после этого кипятят 10 минут, а затем выливают в набор сит с отверстиями 3 и 1 мм и тщательно промывают горячей водой при температуре 50-60 °С.
Отмытые зародыши помещают в стеклянный бюкс, куда наливают 10 см3 раствора анилинового красителя, и кипятят 20 секунд. За это время зародыши приобретают хорошо выраженную синюю окраску. Для удаления излишков красителя зародыши переносят в другой стеклянный бюкс с 40 % раствором молочной кислоты и доводят до кипения, затем их раскладывают на предметное стекло и просматривают под бинокуляром. При анализе отмечают локализацию мицелия пыльной головни в частях зародыша и определяют процент с сильной степенью зараженности партии семян по формуле распространения болезни (Р):
n * 100 %
Р = --------------,
N
где п - число пораженных зародышей; N-общее число просмотренных зародышей.
При просмотре особое внимание уделяют поражению зародышевой почки и щитка: чем сильнее они заражены, тем выше процент поражения растений в поле. При слабом поражении зародыша мицелий возбудителя в малом количестве локализуется в одном из краев щитка. В полевых условиях такие семена продуцируют свободные от головни колосья и условно считаются здоровыми. При сильном поражении щитка, корешков зародышевой почки и колеоптиле семена необходимо протравить системными препаратами.
Зараженность семян зерновых культур поверхностной или внутренней инфекцией (гельминтоспориоз, фузариоз, альтернариоз,
8
плесневение) определяют методом влажной камеры с применением бумажных рулонов.
Образец семян отбирают согласно ГОСТ 12037-88. Из этого образца берут навеску 200 г и отсчитывают 2 пробы по 100 семян. Семена не стерилизуют. Для проращивания семян одной пробы берут полоску фильтровальной бумаги шириной 12-15 см и длиной 100 см. Вдоль этой полоски на расстоянии 2 см от верхнего края простым карандашом проводят линию. Вверху записывают характеристику образца и дату посева. Затем бумагу смачивают до полного увлажнения, кладут ее на полиэтиленовую пленку такой же длины и шириной 10 см. По очерченной линии раскладывают семена зародышем вниз (расстояние между семенами 1 см) по 100 шт. на каждую ленту. Семена закрывают этой же полоской бумаги, свернув ее пополам вдоль, и сдвигают на нижний край полиэтиленовой пленки. Уложенную полоску скатывают в рулон вместе с пленкой, ставят вертикально в стеклянный стакан вместимостью 200-250 мл семенами вверх, на дно наливают немного воды. Семена проращивают 7 дней в термостате при температуре 20-22 °С (или на столе при такой же комнатной температуре). Затем ножницами обрезают корешки, которые находятся ниже фильтровальной бумаги, разворачивают рулон и приступают к анализу. Подсчитывают число проростков, пораженных гельминтоспориозом, фузариозом, альтернариозом и другими микроорганизмами, по баллам. Если на проростках два или несколько видов заболеваний, относят их к смешанной инфекции.
Грибы рода фузариум проявляются в виде слегка пушистого налета белого или розового оттенка. Грибница окрашивает в розовый цвет также бумагу.
Гельминтоспориозная инфекция отчетливо видна в зерновках в виде черного бархатистого налета, который переходит и на бумагу. Болезнь проявляется и в виде побурения корешков и колеоптилe у основания.
Семена, пораженные альтернариозом, покрываются налетом от серого до почти черного цвета, визуально похожим на грибницу гельминтоспориума. Для точного определения необходимо микроскопирование или просмотр через лупу большого увеличения (10х). Споры гельминтоспориума значительно крупнее и имеют веретеновидную форму.
9
Пораженность семян патогенными грибами оценивают по 4-балльной шкале:
-
- имеется слабый налет или спороношение грибов, корешки и проросток нормально развиты, но окраска не изменена или видны слабые штрихи и пятна;
-
- наблюдаются налет или спороношение грибов, интенсивное побурение нормально развитых зародышевых корешков и проростка у основания;
-
- обильные налет и спороношение грибов, сильное побурение
корешков и проростка. Корешки и проросток отстают в разви-
тии;
4 - обильные налет и спороношение грибов, зерновка буреет и за-
гнивает. Корешки и проросток повреждены, сильно угнетены,
закручены и загнивают.
Первый балл соответствует поражению зерновок внешней инфекцией. Проростки, пораженные сильнее (2, 3, 4 балл), как правило, несут внутреннюю инфекцию. Зараженность семян гельминтоспориoзом, фузариозом и другими патогенами (Р) определяют по формуле 1.
Развитие болезни (R) вычисляют по формуле:
Σ (a * b) * 100
R = ---------------------, %
4 N
где Σ (a * b) – сумма произведения числа зараженных зерновок по баллам (а) на соответствующий балл заражения (b);
N – число семян в пробе;
4 – максимальный балл поражения.
Чем сильнее развитие болезни, тем больше вероятность сильного поражения корневыми гнилями, снежной плесенью в поле и тем острее необходимость протравливания.
В семенах суперэлиты не допускается наличие пыльной головни, примесей твердой головни и внутренней инфекции возбудителей проростков и корешков; внешняя инфекция не должна превышать 30%. В семенах элиты процент зерен, зараженных пыльной головней, не может быть выше 0,3, а последующих репродукций -2 %. По посевным качествам в семенах 1 -го и 2-го классов не допускается наличие пыльной и твердой головни
10
и выше 20 % зараженных внутренней инфекцией проростков и корешков.
На основании результатов фитоэкспертизы делается заключение о возможности использования конкретной партии для семенных целей и о необходимости протравливания (табл. 1).
Таблица 1.Выбор технологии протравливания в зависимости от степени зараженности семян зерновых культур по данным фитоэкспертизы (рекомендации ВИЗР)
Болезнь |
Степень зараженности |
Принимаемые меры |
Пыльная головня |
До 0,3% |
Протравливание с использованием биологических средств |
Твердая головня (каменная, стеблевая, черная, покрытая и др.) |
До 100 спор на 1 зерновку |
То же |
Болезни проростков и корешков (фузариум, би-полярис, септория и др.) |
До 30% внешней инфекции |
То же |
Пыльная головня |
0,3-0,5% |
Протравливание биопрепаратом + ? дозы системного протравителя или контактным препаратом в полной дозе |
Твердая головня |
100-500 спор на 1 зерновку. |
То же |
Болезни проростков и корешков |
До 10% внутренней и 31-50% внешней инфекции |
То же |
Пыльная головня |
0,5-2,0% |
Использование системных протравителей |
Твердая головня |
500-2000 спор на 1 зерновку |
То же |
Болезни проростков и корешков |
10-20% внутренней и более 50% внешней инфекции |
То же |
Пыльная головня |
Более 2% |
Партия выбраковывается |
Твердая головня |
Более 2000 спор на 1 зерновку |
То же |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
Болезни проростков и корешков |
Более 20% внутренней инфекции |
То же |