
- •Вопрос-ответ по дисциплине: «Методы гематологических и общеклинических лабораторных исследований»
- •2.Физико-химические свойства мочи и лабораторные методы её исследования.
- •4.Физико-химические свойства кала и лабораторные методы его исследования.
- •5. Исследование физических свойств мокроты, микроскопическая картина. Клиническое значение.
- •Лабораторные методы исследования спинномозговой жидкости (ликвора). Диагностическое значение.
- •7. Исследование физических и химических свойств семенной жидкости, секрета предстательной железы. Оценка репродуктивной функции.
- •8.Микрофлора влагалища. Причины дисбиоза влагалища. Микроскопическое исследование вагинального отделяемого. Клинико-диагностическое значение.
- •9.Лабораторные методы исследования экссудатов и транссудатов. Клинико-диагностическое значение.
- •Лабораторные методы оценки системы гемостаза
- •1 Исследование начальных этапов коагуляционного гемостаза Время свертывания по Ли-Уайту
- •Содержание фибриногена а
- •17. Система антигенов аво. Естественные и иммунные антитела системы аво. Клиническое значение. Методы определения антигенов аво и возможные ошибки.
- •18.Антигены системы резус. Группы системы резус. Клиническое значение. Методы определения антигенов резус и возможные ошибки.
- •22. Лабораторная диагностика мегалобластных анемий (в-12-дефицитные анемии, фолиево-дефицитные анемии). Мегалобластическое кроветворение.
- •23. Лабораторная диагностика гемолитических анемий. Виды гемолиза. Компенсированный и субкомпенсированный гемолиз.
- •24. Постгеморрагические анемии (острые и хронические). Картина периферической крови и костного мозга в разные периоды заболевания.
- •1. Лейкемоидные реакции миелоидного типа
- •2.Лейкемоидные реакции лимфоидного типа
- •3. Инфекционный мононуклеоз
- •26. Острые лейкозы. Этиология и патогенез. Классификация лейкозов. Особенности клеточного состава, периферической крови и костного мозга при различных формах лейкозов.
- •28.Лабораторная диагностика хронических лимфопролиферативных заболеваний. Лимфопролиферативные заболевания. Хронический лимфолейкоз. Клинико-лабораторная характеристика.
- •29. Лабораторная диагностика парапротеинемических гемобластозов. Миеломная болезнь. Клинико-лабораторная характеристика. Картина периферической крови и костного мозга.
- •Понятие о контроле качества лабораторных исследований. Виды ошибок при проведении клинических лабораторных исследований.
Лабораторные методы исследования спинномозговой жидкости (ликвора). Диагностическое значение.
Физические свойства ликвора
Цвет.Нормальная цереброспинальная жидкость бесцветна. При ряде патологических состояний (эпидемический энцефалит, туберкулезный менингит, сухотка спинного мозга) она остается бесцветной. Определение слабой окраски ликвора производят путем сравнения ее с дистиллированной водой, налитой в пробирку такого же диаметра, как и пробирка с ликвором.
Сероватый, серо-зеленый, зеленоватый цвет цереброспинальной жидкости обусловлен большим содержанием в ней лейкоцитов наблюдается при менингитах различного происхождения, при абсцессах мозга. Красный цвет обусловлен примесью крови (эритрохромия) и может наблюдаться при свежих субарахноидальных кровоизлияниях, геморрагических инсультах (при наличии связи очага кровоизлияния с ликворными путями), травме мозга. Иногда появление красного цвета ликвора может быть вызвано случайной примесью крови при неудачно проведенной пункции. Чтобы решить вопрос о природе эритроцитов, можно использовать пробу с двумя или несколькими пробирками. Если примесь крови является результатом пункции, то 2-я и последующие порции ликвора, взятого в разные пробирки, не содержат эритроцитов или содержат их в значительно меньшем количестве по сравнению с 1-ой порцией. При субарахноидальном кровоизлиянии все порции ликвора содержат примерно одинаковое количество эритроцитов. Решить вопрос о происхождении крови в цереброспинальной жидкости помогают повторные пункции — в случаях кровоизлияний при последующих пункциях появляется ксантохромия. Желтый цвет (ксантохромия) может быть связан с присутствием продуктов превращения гемоглобина (билирубин, биливердин). Иногда ксантохромия может быть результатом случайной примеси эритроцитов при производстве пункции. Для решения этого вопроса жидкость центрифугируют. В случаях, когда ксантохромия была обусловлена примесью эритроцитов, после центрифугирования жидкость становится бесцветной, а эритроциты выпадают в осадок.
В клинической практике важно отличать застойную ксантохромию от геморрагической. Застойная возникает в результате замедления тока крови в сосудах мозга, когда в связи с нарушением проницаемости стенок сосудов окрашенная в желтый цвет плазма крови поступает в ликвор. Геморрагическая ксантохромия обусловливается попаданием в ликворные пути эритроцитов крови, гемоглобин которых, превращаясь в билирубин, и дает желтое окрашивание ликвора. Отличительной чертой является и то, что застойная ксантохромия, проявляющаяся обычно в результате блокирования субарахноидальных пространств, обычно бывает стабильна в своей интенсивности и сопровождается, как правило, выраженной протеинорахией, в то время как геморрагическая ксантохромия при отсутствии продолжающегося кровотечения исчезает через 10—14 суток после попадания крови в субарахноидальное пространство и не сопровождается столь резко выраженным увеличением содержания белка в ликворе. Застойная ксантохромия наиболее часто встречается при опухолях ЦНС, блокирующих ликворные пространства. Как физиологиче ский фактор ксантохромия встречается у недоношенных новорожденных. Это явление объясняется повышенной проницаемостью гематоэнцефалического барьера к билирубину. После 7 суток пигмент исчезает и жидкость становится бесцветной.
Прозрачность.Ликвор в норме прозрачный. Мутность определяют так же, как цвет ликвора, но обе пробирки, встряхнув, помещают на черном фоне. В зависимости от степени помутнения различают слабую, умеренную и большую мутность. Она может быть обусловлена присутствием большого количества клеточных элементов (лейкоцитов, эритроцитов) или большого количества микроорганизмов. Мутность, обусловленная форменными элементами крови, после центрифугирования исчезает, а связанная с наличием микроорганизмов — остается.
Опалесценцияликвора, появление которой связано в основном с большим содержанием грубодисперсных белков и фибриногена, может наблюдаться при туберкулезном менингите, сифилитическом менингите, тромбозе синусов головного мозга. При большом содержании фибриногена образуется пленка в виде желеобразного сгустка илликвор свертывается. Появление пленки фибрина в цереброспинальной жидкости отмечается при туберкулезном менингите, в ней иногда обнаруживают микобактерии туберкулеза. Быстрая коагуляция ликвора наблюдается при застойных явлениях в ликворных путях.
Запах.Нормальная цереброспинальная жидкость при большинстве патологических процессов не имеет запаха. При уремической коме ликвор приобретает запах аммиака, при диабетической — запах ацетона.
Относительная плотностьнормальной цереброспинальной жидкости, полученной при люмбальной пункции, равна 1,006— 1,008. Относительная плотность определяется с помощью ареометров малого размера. Повышение относительной плотности наблюдается при воспалении мозговых оболочек, травмах головного мозга. Снижение относительной плотности — при гиперпродукции ликвора (гидроцефалия). Среда ликвора в норме слабощелочная — рН = 7,35—7,4; при патологических состояниях существенно не изменяется, определяется с помощью универсальных индикаторных бумажек.
МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Микроскопическое исследование цереброспинальной жидкости предусматривает определение цитоза,т. е. количества лейкоцитов в определенном объеме, при увеличенном содержании клеточных элементов дифференциацию их состава.
Нормальное содержание лейкоцитов в цереброспинальной жидкости следующее: в жидкости из желудочков мозга и большой цистерны 0—I х 106/л, в люмбальной жидкости 0—5 х 106/л.
У детей цитоз выше, чем у взрослых, и с возрастом постепенно падает. У новорожденных до 20—10б/л, у детей до года 14—15 х 106/л, затем эта величина постепенно падает (приблизительно на 1 клетку за год жизни) и к 10 годам составляет 4— 5 х 106/л.
Клиническое значение.Повышенный цитоз (плеоцитоз) наблюдается при воспалительных поражениях мозговых оболочек различной этиологии и органических поражениях вещества мозга (опухоль, сифилис, абсцесс и др.), а также при травмах, кровоизлияниях, цистицеркозе и др.
Исследование окрашенных препаратов
Морфология клеточных элементов
В окрашенных препаратах ликвора лимфоцитывыглядят в виде клеток округлой формы с круглым гиперхромным ядром, занимающим почти всю клетку. Количество их увеличивается при опухолях ЦНС, при серозных менингитах, вирусных энцефалитах, нейросифилисе и др.
Нейтрофилъные лейкоцитыликвора по виду идентичны таким же клеткам периферической крови Наличие неизмененных нейтрофильных лейкоцитов свидетельствует об остром воспалительном процессе при бактериальных менингитах, после оперативных вмешательств, при попадании свежей крови в ликвор.
Эозинофильные лейкоцитыпо своим морфологическим особенностям не отличаются от таких же клеток периферической крови, имеют ту же величину и оранжево-красную, четкую, довольно крупную, равномерную зернистость в цитоплазме. В большом количестве они встречаются при паразитарных заболеваниях нервной системы (цистицеркозе, эхинококкозе).
В окрашенных препаратах плазматическиеклетки имеют округлую форму и круглые гиперхромные глыбчатые ядра, расположенные эксцентрично, цитоплазма базофильная, размеры клеток от 6 до 12 мкм. В цереброспинальной жидкости плазматические клетки встречаются только в патологических случаях при длительно текущих воспалительных процессах в головном, спинном мозге и в мозговых оболочках (рассеянном склерозе, нейросифилисе, туберкулезном менингите, в послеоперационном периоде при вялотекущем процессе заживления).
ГистиоцитыВ нормальной цереброспинальной жидкости гистиоциты встречаются редко, в виде единичных экземпляров. При выраженной длительно текущей воспалительной реакции мозговых оболочек обнаруживается большое количество гистиоцитов. После операций на ЦНС гистиоциты указывают на активную тканевую реакцию, нормальные процессы заживления.
Макрофагимогут иметь ядра различной формы, чаще расположеные эксцентрично, цитоплазма вакуолизирована, содержит включения. Величина клеток от 7 до 17 мкм, иногда 20—30 мкм. У здорового человека макрофаги в ликворе не встречаются.
Липофаги— это макрофаги, содержащие в цитоплазме капли жира. Обнаруживаются липофаги обычно при опухолях и в жидкости из мозговых кист различного происхождения.
Клетки паутинной оболочкив ликворе встречаются редко. Это крупные неправильной формы клетки с небольшим центрально расположенным круглым ядром. Ядро окрашивается гипохром- но, цитоплазма серовато-голубого цвета, часто разрушена. Единичные клетки не указывают на патологию, так как они выстилают подпаутинное пространство и, слущиваясь, попадают в ликвор. Увеличение количества клеток паутинной оболочки наблюдается при арахноидитах, цистицеркозе мозга.
Опухолевые клеткив цереброспинальную жидкость попадают при прорастании опухоли в ликворные пространства.
ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИКВОРА
Белки— важная составная часть цереброспинальной жидкости. Их количественное и качественное отклонение от нормы указывает на органическое поражение ЦНС. Имеется значительное расхождение в содержании белка на различном уровне ликворной системы. Люмбальный ликвор содержит до 0,22—0,33 г/л; ликвор желудочков мозга — 0,12—0,2 г/л; большой цистерны — 0,1—0,22 г/л; его уровень у новорожденных более высок — 0,6— 0,9 г/л, что связано с недостаточным развитием гематоэнцефалического барьера. При опухолях, воспалении мозговых оболочек, травмах, изменениях гемодинамики в головном и спинном мозгу, нарушениях проницаемости стенок капилляров содержание белка увеличивается (протеинорахия). Наиболее характерно увеличение количества белка для экстрамедулярно расположенных опухолей спинного мозга. Количество белка при них может быть так велико, что цереброспинальная жидкость сразу же после пункции выделяет желеобразный сгусток фибрина. Цитоз при этом может оставаться в норме или слегка повышаться, тогда говорят о белково-клеточной диссоциации (синдром Нонне — Фроан). Увеличение содержания белка в ликворе при опухолях объясняется венозным застоем в сочетании с нарушением циркуляции жидкости. Кроме того, в ликвор поступают продукты белкового обмена самой опухоли и продукты белкового распада из очагов кровоизлияний в ткани опухоли.
Увеличение содержания белка в ликворе наблюдается при травмах ЦНС, поражении гематоэнцефалического барьера после операций на центральной нервной системе. Высота протеинорахии зависит от остроты воспалительного процесса и степени вовлечения в него мозговых оболочек. Значительное повышение уровня белка в ликворе характерно для менингококковых и гнойных менингитов, субарахноидальных кровоизлияний различной этиологии (аневризма, инсульт), различных поражениях нервной ткани головного и спинного мозга (энцефалиты, полиомиелиты, сифилис ЦНС, переломы позвоночника со смещением в сочетании с блоком спинно-мозгового канала).
Большое клиническое значение имеет установление соотношения белковых фракций. В норме показатель отношения содержания глобулинов к уровню альбумина колеблется в пределах 0,2-0,3.
Определение белка.
Количество белка в цереброспинальной жидкости определяют так же, как и в моче, для этого используют метод Брандберг — Роберте — Стольникова (применяют капельный метод разведения) и фотоэлектроколориметрический метод, основанный на образовании преципитата в среде, содержащей сульфосалициловую кислоту и сульфат натрия (унифицированный метод).
Большое значение в диагностике заболеваний нервной системы имеет определение содержания глюкозыв цереброспинальной жидкости. Для этого используют любой из методов, принятых для определения глюкозы крови. Жидкость исследуют сразу, так как быстро наступает гликолиз. У здорового человека содержание глюкозы в ликворе колеблется в пределах 2,8—3,9 ммоль/л. Источником ее является глюкоза крови. Попадает глюкоза из крови в ликвор не только через сосудистые сплетения, но и через оболочки мозга. При заболеваниях нервной системы содержание глюкозы в цереброспинальной жидкости уменьшается или увеличивается без изменения содержания ее в крови. Уровень глюкозы бликворе снижается при остром и подостром серозном менингите (гриппозном, вирусном, токсическом). Резкое снижение концентрации глюкозы наблюдается при туберкулезном менингите. При стрептококковом и менингококковом менингите глюкоза в ликворе может отсутствовать.
Увеличение содержания глюкозы в ликворе при нормальном уровне ее в крови наблюдается при энцефалитах, эпилепсии, тетании, столбняке. При опухолях уровень глюкозы может и повышаться, и понижаться. При сахарном диабете содержание глюкозы повышается и в крови, и в цереброспинальной жидкости.
У здорового человека содержание хлоридовв цереброспинальной жидкости варьирует в пределах 120—130 ммоль/л. Понижение содержания хлоридов в ликворе наблюдается при ме- нингите, особенно туберкулезном, реже при нейросифилисе, бруцеллезе. Повышение содержания хлоридов может быть при уремии, опухолях мозга, рассеянном склерозе, эхинококкозе.