- •Вопрос-ответ по дисциплине: «Методы гематологических и общеклинических лабораторных исследований»
- •Основы и организация лабораторной службы в Республике Беларусь. Охрана труда и техника безопасности при выполнении лабораторных исследований.
- •2.Физико-химические свойства мочи и лабораторные методы её исследования.
- •Исследование физических и химических свойств желудочного и дуоденального содержимого. Клинико-диагностическое значение.
- •4.Физико-химические свойства кала и лабораторные методы его исследования.
- •5. Исследование физических свойств мокроты, микроскопическая картина. Клиническое значение.
- •Лабораторные методы исследования спинномозговой жидкости (ликвора). Диагностическое значение.
- •7. Исследование физических и химических свойств семенной жидкости, секрета предстательной железы. Оценка репродуктивной функции.
- •8.Микрофлора влагалища. Причины дисбиоза влагалища. Микроскопическое исследование вагинального отделяемого. Клинико-диагностическое значение.
- •9.Лабораторные методы исследования экссудатов и транссудатов. Клинико-диагностическое значение.
- •Лабораторные методы оценки системы гемостаза
- •1 Исследование начальных этапов коагуляционного гемостаза Время свертывания по Ли-Уайту
- •Содержание фибриногена а
- •17. Система антигенов аво. Естественные и иммунные антитела системы аво. Клиническое значение. Методы определения антигенов аво и возможные ошибки.
- •18.Антигены системы резус. Группы системы резус. Клиническое значение. Методы определения антигенов резус и возможные ошибки.
- •22. Лабораторная диагностика мегалобластных анемий (в-12-дефицитные анемии, фолиево-дефицитные анемии). Мегалобластическое кроветворение.
- •23. Лабораторная диагностика гемолитических анемий. Виды гемолиза. Компенсированный и субкомпенсированный гемолиз.
- •24. Постгеморрагические анемии (острые и хронические). Картина периферической крови и костного мозга в разные периоды заболевания.
- •1. Лейкемоидные реакции миелоидного типа
- •2.Лейкемоидные реакции лимфоидного типа
- •3. Инфекционный мононуклеоз
- •26. Острые лейкозы. Этиология и патогенез. Классификация лейкозов. Особенности клеточного состава, периферической крови и костного мозга при различных формах лейкозов.
- •28.Лабораторная диагностика хронических лимфопролиферативных заболеваний. Лимфопролиферативные заболевания. Хронический лимфолейкоз. Клинико-лабораторная характеристика.
- •29. Лабораторная диагностика парапротеинемических гемобластозов. Миеломная болезнь. Клинико-лабораторная характеристика. Картина периферической крови и костного мозга.
- •Понятие о контроле качества лабораторных исследований. Виды ошибок при проведении клинических лабораторных исследований.
Исследование физических и химических свойств желудочного и дуоденального содержимого. Клинико-диагностическое значение.
Физические свойства желудочного содержимого
В норме натощак объем сока колеблется от 5 до 50 мл, количество желудочного сока увеличивается при язвенной болезни 12-перстной кишки, при антральных гастритах. Уменьшение объема сока имеет место при атрофических гастритах, раке желудка. Желудочный сок в норме беловато-серого цвета. Его цвет изменяется при забросе дуоденального содержимого в зависимости от присутствия свободной соляной кислоты. Так, зеленый цвет появляется за счет биливердина при наличии свободной соляной кислоты, желтый — при ее отсутствии. Примесь крови придает соку розовые, красные и бурые оттенки.
Химическое исследование желудочного содержимого Кислотность желудочного сока определяется титрованием 0,1 N NaOH в присутствии индикаторов. Для определения общей кислотности используют спиртовой раствор фенолфталеина (10 г/л: 1 г фенолфталеина на 100 мл 96° этанола). Раствор стойкий, в кислой среде индикатор остается бесцветным, а в щелочной при полной нейтрализации всех кислореагирующих веществ становится розово-красным. Общая кислотность представляет собой все кислореагирующие вещества желудочного сока и состоит из свободной, связанной соляной кислоты и кислотного остатка. Свободную соляную кислоту определяют, используя для титрования 5 г/л спиртовой раствор диметиламидоазобензола (0,5 г реактива растворяют в 100 мл 96° этанола), в кислой среде индикатор окрашивает раствор в красный цвет, а в момент полной нейтрализации свободной соляной кислоты придает раствору оранжево-желтый цвет (цвет «семги»). Свободная соляная кислота — это свободно диссоциированные ионы Н+ и Сl- в желудочном содержимом.
Связанную соляную кислоту выявляют при титровании в присутствии 10 г/л водного раствора ализарина С, который в кислом соке имеет желтый цвет и переходит в слабо фиолетовый оттенок в щелочной среде, при этом нейтрализуются все кислые валентности, кроме связанной соляной кислоты. Связанная соляная кислота — это кислота, которая находится в соединении с белками и продуктами их переваривания. Кислотный остаток представлен кислыми фосфатами.
Связанная кислота = общая кислотность — (сумма свободной кислоты и кислотного остатка) = 44—20 = 24 ммоль/л.
Дефицит соляной кислоты определяют в любой порции желудочного сока, кроме натощаковой, в которой отсутствует свободная соляная кислота, при угнетении кислотообразования. Максимально возможный дефицит соляной кислоты составляет 40 ммоль/л. Этот дефицит указывает на полное прекращение секреции соляной кислоты, т. е. при истинной целлюлярной ахлоргидрии — состоянии, при котором отсутствует свободная соляная кислота в желудочном содержимом в результате атрофических процессов в слизистой желез желудка, при уменьшении количества париетальных клеток.
Определение дебита соляной кислоты. Для получения количественной характеристики кислотообразующей функции желудка исследуют абсолютную величину продукции соляной кислоты во времени — дебит-час соляной кислоты. Дебит-час свободной кислоты — это количество свободной соляной кислоты, выработанной париетальными клетками за час.
Для получения истинных значений дебит-часа необходимо полностью извлекать желудочное содержимое.
Определение молочной кислоты. Молочная кислота в желудочном соке появляется при выраженной ахлоргидрии, при застойных явлениях в желудке, при онкозаболеваниях, образуется в результате патологического брожения, вызванного палочкой молочнокислого брожения, и указывает на отсутствие свободной соляной кислоты, свидетельствует о застое в желудке или появлении опухоли желудка. Исследуется натощаковая порция. Проводится качественная реакция Уффельмана в натощаковой порции (нулевая порция) при отсутствии свободной соляной кислоты.
Принцип. Молочная кислота с солями трехвалентного железа изменяет цвет сока за счет образования лактата железа (желто-зеленое окрашивание).
Показатели желудочной секреции в норме.
Натощак: объем 5—50 мл, общая кислотность до 40 ммоль/л, свободная кислота до 20 ммоль/л, связанная кислота до 10 ммоль/л, кислотный остаток до 8 ммоль/л, дебит-час обшей кислотности до 2 ммоль/л, дебит-час свободной кислотности до 1 ммоль/л.
Базальная секреция: часовое напряжение 50—100 мл, общая кислотность 40—60 ммоль/л, свободная соляная кислота 20— 40 ммоль/л, связанная соляная кислота 10—20 ммоль/л, кислотный остаток 2—8 я ммоль/л, дебит-час общей кислотности 1,5—5,5 ммоль/ч, дебит-час свободной соляной кислоты 1,0—4,0 ммоль/ч.
Показатели желудочной секреции на пищевые пробные раздражители: часовое напряжение 50—110 мл, общая кислотность 40—60 ммоль/л, свободная соляная кислота 20—40 ммоль/л, связанная соляная кислота 10—20 ммоль/л, кислотный остаток 2—8 ммоль/л, дебит-час общей кислотности 1,5—6,0 ммоль/ч, дебит-час свободной соляной кислоты 1,0—4,5 ммоль/ч.
Гиперсекреция — увеличение количества соляной кислоты натощак до 100—150 мл и выше. Наблюдается при гиперацидном гастрите, язве желудка и 12-перстной кишки.
Гиперацидное состояние — увеличение количества соляной кислоты выше нормы.
Гипацидное состояние — снижение концентрации соляной кислоты в желудочном содержимом ниже нормы.
Анацидное состояние — отсутствие свободной соляной кислоты.
Ахилия — отсутствие свободной соляной кислоты и пепсина в желудочном содержимом.
Желудочная секреция меняется в зависимости от характера патологического процесса в слизистой желез желудка. Секреция повышается при эмоциональных состояниях, пилоро-дуоденитах, антральных гастритах, гипертрофических гастритах, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки, гастриномах, тиреотоксикозах, гиперпаратиреоидизме, опухолях мозга, неврастении. Высокие цифры базальной секреции, которые отражают степень возбудимости нервного аппарата желудка, наблюдаются у больных с гипертрофическими процессами в слизистой желез желудка, язвенной болезни 12-перстной кишки.
Снижается желудочная секреция у рабочих горячих цехов, при депрессии, при употреблении большого количества жира, дефиците или резком ограничении поваренной соли. Гипацидность имеет место при атрофических гастритах, язвенной болезни на фоне атрофического гастрита, раке желудка, энтероколитах, холециститах, циррозе печени, микседеме.
Микроскопическое исследование желудочного содержимого
Отбирают метериал на черном и белом фоне. Переносят на предметное стекло, покрывают покровным. Готовят нативный препарат. Позволяющий выявить присутствие патологических комплексов, яиц паразитов. Второй препарат с раствором Люголя на наличие крахмальных зерен, третий – с суданом 3 для выявления нейтрального жира. Препарат смотрят при малом увеличении (окуляр 7-10,объектив 8), затем на большом (объектив 40).
В норме в желудочном содержимом выявляются единичные лейкоциты, которые хорошо сохраняются в слизи, или только голые ядра при нормальной или повышенной кислотности, единичные эпителиальные клетки цилиндрического эпителия из желудка.
При патологии обнаруживаются элементы воспаления, остатки органической и растительной пищи, флора, кристаллические образования.
Слизь встречается в большом количестве при гипертрофических гастритах, ахилии, при атрофических процессах слизь может отсутствовать или ее количество резко уменьшается.
При повышенной кислотности слизь не обнаруживается.
Лейкоциты в большом количестве наблюдаются при воспалительных процессах в желудке. Лейкоциты сохраняются в желудочном содержимом с пониженной кислотностью, при ахилии. При гиперацидных состояниях цитоплазма лизируется и видны только ядра.
Эритроциты в желудочном содержимом разрушаются, и видим бурый пигмент (хлорид гематина). При ахилии или пониженной кислотности эритроциты сохраняют свою морфологию и окрашивают сок в красные оттенки. Встречаются эритроциты при язвенной болезни, онкозаболеваниях, травме слизистой.
Клетки цилиндрического эпителия могут быть при гастритах, язвенной болезни, располагаясь отдельно, группами, скоплениями. При гипертрофических процессах могут образовываться же-лезистоподобные структуры.
Примесь пищи в содержимом желудка натощак свидетельствует о нарушении эвакуаторно-моторной функции. Такая картина может быть при спазмах привратника у больных со свежей язвой 12-перстной кишки, при сужении пилорической части, рубцевании язвы и новообразованиях в пилорическом отделе.
Остатки пищи:
мышечные волокна разной степени переваривания, имеют цилиндрическую форму серого или зеленоватого оттенка с продольной, поперечной исчерченностью, располагаются отдельно, группами, пластами;
нейтральный жир в виде капель мелких, средних и крупных размеров, чаще округлой или неправильной формы, окрашивающиеся Суданом III в оранжевый цвет;
кристаллы жирных кислот — длинные, тонкие иглы, бесцветные или серые, располагаются отдельно и скоплениями;
клетчатка растительная: переваримая и непереваримая, бесцветная или окрашенная, различной формы и размеров;
крахмал в виде блестящих зерен округлой, овальной, многогранной формы, слоистые образования различной величины, окрашиваются раствором Люголя в сине-фиолетовый цвет.
Микробная флора:
1)палочки молочнокислого брожения: грубые, длинные, слегка изогнутые, располагаются под углом друг к другу, появляются в соке при отсутствии свободной соляной кислоты, при застое в желудке, при нарушении эвакуации из желудка, при раке желудка;
2) сарцины встречаются в соке в присутствии свободной соляной кислоты и напоминают вид перевязанных тюков желтого, зеленого или серого цвета. Представляют собой кокки, которые делятся в трех взаимноперпендикулярных плоскостях ;
3)дрожжеподобные грибы овальной, округлой формы, почкующиеся, располагающиеся отдельно, скоплениями, цепочками.
Патологические комплексы клеток можно обнаружить при раке пищевода, желудка.
Исследование дуоденального содержимого
Желчь извлекается тонким зондом с оливой. Разработано несколько способов извлечения дуоденального содержимого: трех-моментное дуоденальное зондирование с выделением порций А, В, С; многомоментное зондирование с получением пяти фаз желчевыделения; хроматическое дуоденальное зондирование, позволяющее более точно получить пузырную желчь; гастродуо-денальное зондирование с применением двухканального зонда и одновременным извлечением желудочного содержимого. Для получения пузырной желчи применяют различные раздражители, которые вводят медленно при температуре, равной температуре тела пациента. Наиболее часто используют 330 г/л раствор сульфата магния (50 мл), или два яичных желтка, или 20 мл раствора поваренной соли (100 г/л), оливкового масла, 100 г/л пептона, которые пациент выпивает. Иногда внутривенно назначают холецистокинин из расчета 1 ед/кг массы обследуемого больного.
ФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЖЕЛЧИ
Порция А — желчь прозрачная, имеет золотисто-желтый цвет, рН = 7,0—7,5, относительная плотность 1,008—1,016, за 30 мин выделяется 30 мл желчи. При микроскопическом исследовании в порции А можно обнаружить цилиндрический эпителий из 12-перстной кишки. Клетки могут лежать отдельно, группами в виде частокола или в виде сот. В детской практике, у пожилых людей, после введения сульфата магния обнаруживаются округлые клетки — лейкоцитоиды. Это измененный, округленный эпителий 12-перстноГ кишки. По размеру они несколько больше лейкоцита, серых, зеленых оттенков, круглой формы с выраженными включениями в цитоплазме, которые не позволяют выявить ядро при исследовании в нативном препарате. Роль лейкоцитоидов неясна. Их необходимо дифференцировать с лейкоцитами, чтобы не вызвать гипердиагностику воспалительного процесса.
Могут обнаруживаться лейкоциты, которые быстро разрушаются желчью. Эритроциты неизмененные и потерявшие гемоглобин встречаются при язвенной болезни 12-перстной кишки, желче-каменной болезни, опухолях желчевыделительной системы.
В порции А могут выявляться кристаллические образования в виде тонких игл жирных кислот, мелких зернышек желчных кислот, которые могут лежать отдельно, мелкой россыпью или образовывать скопления серых, желтых оттенков. Встречаются большие крупинки, комочки билирубината кальция, имеющие также различные оттенки от желтых до черных. Кристаллы холестерина выявляются при нарушении коллоидных свойств желчи. Кроме того, в этой порции могут быть обнаружены вегетативные формы лямблий, яйца анкилостомы дуоденале, кишечной угрицы, сибирского, печеночного сосальщиков, элементы эхинококка.
Порция В — желчь вязкая, прозрачная, темно-оливкового цвета, рН = 6,8—7,6, относительная плотность 1,016—1,032, за 30 мин получают 50 мл, в норме за 1 мин выделяется 4 мл желчи. Микроскопически в этой порции можно обнаружить клетки цилиндрического эпителия, элементы воспаления, кристаллические образования, микролиты, простейшие, яйца паразитов.
Порция С — прозрачная, светло-золотистого цвета, рН = 7,0— 7,4, относительная плотность 1,007—1,010. Печеночная желчь выделяется до тех пор, пока олива находится в полости 12-перстной кишки, за 1 мин получают 1 мл желчи. При микроскопическом исследовании могут обнаруживаться клетки кубического эпителия из желчных ходов. Эти клетки чаще квадратные с ядром, расположенным ближе к основанию клетки, кутикула не видна. Их образно сравнивают с фалангой большого пальца, встречаются при холангитах. Из кристаллических образований можно найти кристаллы жирных кислот, холестерина, желчных кислот, иногда микролиты, если желчь порции В была плохо извлечена.
