Тема 3. (14.) Защитные функции крови. Физиология лейкоцитов
Задание |
Программа действий |
Ориентировочные основы действий |
1.Определение концентрации лейкоцитов |
1. Подготовить камеру Горяева. 2. Набрать кровь в капилляр, развести 3% р-ром уксусной кислоты. 3. Заполнить камеру разведённой кровью, считать под малым увеличением (об. 8, ок. 10 или 15). 4. Зная объем камеры и разведение крови, высчитывают кол-во форменных элементом в 1 л крови Ах4000х20 Х= = Ах50 1600 (400) |
Подсчет проводят в 100 больших неразграфленных квадратах сетки Горячева, расположенных по четыре, учитывая, правило Егорова. Для определения кол-ва лейкоцитов в 1мкл крови необходимо число, полученное при подсчёте, умножить на 50. Для пересчёта на 1 л крови число лейкоцитов, выраженное в тысячах, умножить на 106. |
2.Подсчёт лейкоцитарной формулы |
1. Окрашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой. Используют окуляр 7 или 10 и об. 90 (конденсор поднят, диафрагма открыта). 2. На мазок наносят каплю иммерсионного масла. 3. Считают все встречающиеся лейкоциты, дифференцируя их по видам. Всего считают 200 клеток, подсчитывают каждый вид и делят на 2, чтобы получить процентное соотношение |
Лейкоциты располагаются о мазке неравномерно: более тяжёлые (эозинофилы, моноциты) встречаются чаше по краю мазка, а более лёгкие (лимфоциты) в середине, поэтому счёт ведут по всему мазку в тонкой его части по методу зигзага, где хорошо просматривается структура клеток. |
Тема 4. (15.) Физиологические основы свертывания и переливания крови
Задание |
Программа действий |
Ориентировочные основы действий |
1 Определение времени свертывания крови (метод Сухарева, Бюркера и Дьюка). |
Метод Сухарева: 1. Кровь в кол-ве 25-30 мл набирают в капилляр от аппарата Панченкова и переводят в середину капиллярной трубки. 2.Включают секундомер и через каждые 20 сек. наклоняют капилляр вправо, влево, под углом 30-40 градусов. 3. Определяют начало и конец свёртывания, с замедления движения и до полной остановки в капилляре. Метод Бюркера: Каплю крови берут на предметное стекло и углом другого предметного стекла приподнимают каплю крови. Определяют время свёртывания от начала появления нитей до конца образования сгустка. По Дьюку: Проколоть палец, ватным тампоном вытирают каплю крови через каждые 30 сек. До прекращения кровотечения. Определить время свёртывания. |
Время свёртывания даёт общие представления о внутреннем механизме мерной фазы процесса свёртывания, выражается в мин. В норме начало - от 30 сек. до 2 мин., конец свёртывания - от 3 мин. до 5мин. Удлинение времени свёртывания крови до 15мин. и более наблюдается при тяжёлой недостаточности факторов, участвующих во внутреннем пути образования протромбиназы, дефиците протромбина и фибриногена, а также при наличии в крови ингибиторов свёртывания, в частности гепарина. Метод Дьюка позволяет судить о сосудисто-тромбоцитарном гемостазе (первичном), т.к. протекает в сосудах микроциркуляторного русла(капиллярах). |
2. Исследование сосудистого компонента гемостаза |
1.Проба жгута: отступив на 1,5-2см вниз от локтевой ямки очерчивают круг, диаметром 2,5см. На плечо накладывают манжетку тонометра и создают давление 80мм рт. ст. в течение 5 мин. В очередном круге подсчитывают все появившиеся петехии. |
У здоровых лиц петехии не образуются или их не более 10 (отрицательная проба жгута). При нарушении резистентности стенки капилляров количество петехии пробы резко возрастает. |
3. Определение группы крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов анти-А и анти-В |
В две ячейки белой пластины вносят по капле исследуемой крови, затем в одну вносят цоликлон анти-А, в другую – анти-В (соотношение 1: 10), планшет покачивают и наблюдают за агглютинацией. |
Цоликлоны анти-А и анти-В содержат антитела к агглютиногенам А и В соответственно, значит, если агглютинация произошла с цоликлоном анти-А то это II(А) группа, если с анти-В, это III(В), если агглютинация не произошла – это I(0) группа, если произошла в обоих случаях – это IV (АВ) группа крови. |
4. Определение резус-фактора |
В ячейку белой пластины внести каплю крови и цоликлон анти-D. |
Если агглютинация произошла, то резус положительный, если нет – отрицательный. |