Государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Тихоокеанский государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
Кафедра _____микробиологии и вирусологии_____________
|
УТВЕРЖДЕНО на заседании кафедры протокол №__8_ от «__29_»__04____2013г.
Заведующий кафедрой _Шаркова В.А.____
|
Методические рекомендации для студентов
к практическим занятиям №8
«Вирусы – морфология и физиология. Методы культивирования вирусов и принципы их индикации»
Модуль Общая микробиология____________________________________________
(наименование модуля)
учебной дисциплины (модуля) микробиология, вирусология __________________
(наименование учебной дисциплины, (согласно учебному плану)
для специальности 060101- Лечебное дело_____________________________________
(шифр-наименование специальности)
курс ______2______семестр ____4______
|
Составитель: ___Шаркова В.А., д.м.н.,___ профессор, заведующая кафедрой_______ (Ф.И.О., ученая степень, звание, должность)
Рецензент:_Зайцева Е.А., д.м.н.,_________ профессор кафедры____________________ (Ф.И.О., ученая степень, звание, должность)
|
Владивосток - 2013г.
Тема занятия. Вирусы – морфология и физиология. Методы культивирования вирусов и принципы их индикации.
Мотивация изучения темы. Интерес к вирусологии и ее важность для медицины обуславливает, во-первых, ведущая роль вирусов в инфекционной патологии человека, вытесняющая заболеваемость бактериальными, грибковыми инфекциями и протозойными инвазиями на фоне практически отсутствия средств специфической химиотерапии и химиопрофилактики. Во-вторых, на моделях вирусов, как наиболее просто организованных формах жизни, разрешаются многие фундаментальные вопросы биологии и медицины (онкогены и др.). В-третьих, важное значение имеет выраженная изменчивость вирусов и их высочайшая адаптивная способность, позволяющая преодолеть видовые барьеры устойчивости к ним макроорганизмов. В-четвертых, мутационная активность вирусов в организме, вызывающая все новые и новые болезни с новыми неизвестными возбудителями (SARS и др.). При работе с ними и использовании традиционных подходов к изучению морфологии, ультраструктуры, способов культивирования и индикации, необходимо соблюдение особого противоэпидемического режима, наличие определенных знаний и навыков.
Знания по указанной теме необходимы для практической деятельности врачей всех специальностей, но преимущественно занимающихся инфекционными болезнями, врачей-педиатров, эпидемиологов, акушеров-гинекологов, дермато-венерологов, вирусологов и других.
Цели занятия.
Общая цель: изучения темы направлено на формирование компетенций по ФГОС специальности (компетенции, которые формируются на данном занятии- ОК1, ПК6, ПК7, ПК14, ПК31).
Конкретные цели и задачи.Познакомиться с морфологией, структурой, физиологией, репродукцией, принципами культивирования вирусов, их индикацией, обучиться методам заражения биологических объектов, в частности куриных эмбрионов.
При этом задачами дисциплины являются:
- приобретение студентами знаний по классификации, морфологии и физиологии вирусов, в области их биологических и патогенных свойств, влияния на здоровье населения;
- обучение студентов навыкам пользования биологическим оборудованием; методам микробиологической диагностики вирусных инфекций; алгоритму постановки микробиологического диагноза при вирусных инфекциях;
-на основе изучения учебного материала инициировать самообразовательную деятельность студентов: формировать умение сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества, научить стремиться использовать современные достижения науки.
После изучения темы студент должен:
Iуровень -«иметь представление»- обучающиеся способны дать качественное описание вириона, сформулировать его характерные свойства, указать этапы репродукции, уметь объяснить манипуляцию вирусологического метода, знать показания к его применению.
IIуровень -«Знать»- вопросы общей вирусологии (морфологии и физиологии вирусов), вирусологический метод исследования, варианты взаимодействия вирусной частицы и клетки; способы забора материала; знать условия, необходимые для качественного проведения вирусологических исследований.
IIIуровень - «Уметь»- определить характер и объем материала, подлежащего исследованию, сроки его взятия и сроки отбора проб; организовать взятие и доставку материала в лабораторию; определить условия и способ транспортировки и хранения материала для исследования; провести микроскопическое исследование нативного материала; определить целесообразность того или иного метода исследования; дать обоснованный ответ по завершении исследования материала; обеспечить обеззараживание инфекционного материала; проконтролировать соблюдение техники безопасности и противоэпидемического режима средним и младшим медицинским персоналом; проводить санитарно-просветительную работу среди населения; оценить результаты анализа.
IVуровень - «Владеть»- микроскопией материала исследования; инфицированием куриного эмбриона; работой с лабораторными приборами и оборудованием, интерпретацией результатов вирусологического исследования.
Вопросы, изученные на предшествующих дисциплинах и необходимые для освоения темы.
Особенности биосинтеза эукариотической клетки, понятие о геноме, нуклеиновых кислотах. (кафедра биологии).
5.Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию:
Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
Классификация вирусов (критерии, номенклатура).
Морфологическая структура вирусов (форма вириона, понятие о симметрии: геном вируса, капсид, обкладка вирусов белками, рецепторы, органотропность).
Этапы репродукции вирусов, особенности биосинтеза и его место в клетках макроорганизма, стратегия вирусного генома.
Репликативный цикл развития некоторых групп вирусов (ДНК-, PНК- содержащих вирусов).
Элементарные тельца и внутриклеточные включения.
Принципы и способы культивирования вирусов.
Методы индикации и идентификации вирусов.
Особенности эпидемиологии и меры защиты при вирусных инфекциях.
Способы и средства специфической профилактики.
Задания для СРС во внеучебное время
1.Зарисовать структуру вириона (на примере вируса гриппа). Подписать отдельные элементы.
2.Составить схему репродукции РНК- и ДНК-содержащих вирусов по этапам (от проникновения в клетку до новой популяции).
3.Составить перечень критериев классификации вирусов.
4. Составить: схему используемых методов культивирования вирусов; классификацию культуры клеток и тканей; схему выделения чистой культуры вируса гриппа из носоглоточного смыва.
5. Составить методы индикации и идентификации вирусов.
5.3. Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты) .
1. Вирус – это:
а) облигатный внутриклеточный паразит с самостоятельным геномом
б) клеточная структура
в) энергонезависимое образование
г) клетка с собственным обменом веществ
2. Вирион включает в себя
а) капсид
б) нуклеиновую кислоту
в) структурные белки
г) все перечисленное
3.Имеет ли смысл выращивать бактерии в культуре ткани? а) да
б) нет
в) после предварительного культивирования на питательных средах
г) только мезофилы
4.Можно ли культивировать вирусы на простом МПА, кровяном MIIA, МПБ? а) да
б) нет
в) с последующим культивированием в культуре ткани
г) с последующим культивированием в курином эмбрионе
5. Какой может быть форма вириона?
а) шаровидная
б) палочковидная
в) пулевидная
г) все перечисленное
6. Для профилактики вирусных инфекций используют все перечисленное, кроме:
а) марлевые четырёхслойные маски
б) проветривание
в) облучение воздуха бактерицидными лампами
г) антибиотики
7. Выбрать эффективный способ обезвреживания инфекционного материала, содержащего вирусы:
а) простое кратковременное кипячение
б) антибиотики
в) стерилизация в автоклаве
г) все названные методы и средства.
8. Методы окраски микропрепарата на определение вирусных включений
а) по Граму
б) по Павловскому
в) по Романовскому-Гимзе
г) по Бурри
9. Функции капсида
а) защита вирусного генома
б) адсорбция вириона к клетке
в) проникновение в клетку путем взаимодействия с клеточными рецепторами
г) все перечисленное
10. Вирион с суперкупсидом – это:
а) оболочечный вирус
б) безоболочечный вирус
в) «голый» вирус
г) капсомер
Этапы проведения практического занятия.
|
№ п/п |
Название этапа |
Цель этапа |
Время | |
|
1 |
2 |
3 |
4 | |
|
5-10 % | |||
|
|
Организация занятия |
Мобилизовать внимание студентов на данное занятие |
| |
|
|
Определение темы, мотивации, цели, задач занятия |
Раскрыть практическую значимость занятия в системе подготовки к профессиональной деятельности, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов |
| |
|
| |||
|
1 |
2 |
3 |
4 | |
|
|
Контроль исходных знаний, умений и навыков |
Проверка готовности студентов к занятию, выявление исходного уровня знаний, умений и навыков |
| |
|
|
Общие и индивидуальные задания на СРС в учебное время |
Дифференцированное ориентирование студентов к предстоящей самостоятельной их работе |
| |
|
|
Демонстрация методики |
Показать ориентировочную основу действия (ООД) |
| |
|
|
Управляемая СРС в учебное время |
Овладение необходимыми общекультурными, профессиональными компетенциями, исходя из конкретных целей занятия |
| |
|
|
Реализация планируемой формы занятия (семинар, практическая работа) |
Контроль результатов обучения и оценка с помощью дескрипторов |
| |
|
|
Итоговый контроль |
Оценивание индивидуальных достижений студента, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка |
| |
|
5-10 % | |||
|
|
Подведение итогов занятия |
Оценка деятельности студентов, определение достижения цели занятия |
| |
|
|
Общие и индивидуальные задания на СРС во внеучебное время |
Указание на самоподготовку студентов, ее содержание и характер |
| |
Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время (курация, выполнение лабораторной работы и т.д.).
1. Подготовить к проверке материалы по самоподготовке (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия).
2.Сформулировать цель занятия.
3.Контроль исходного уровня знаний.
4.Обсуждение алгоритма вирусологического метода исследования (см. п.6).
5. Выполнить самостоятельное составление алгоритма вирусологического исследования на разных объектах культивирования (биологический объект, культура клеток, куриный эмбрион) и с различным материалом исследования:
– выбрать метод и материал для лабораторного исследования; обосновать;
- подготовить препарат и провести микроскопию (на выявление включений),
- определить жизнеспособности куриного эмбриона, проведение его инфицирования
-- обосновывать выбор метода индикации и идентификации вируса
– обосновать на основании выше перечисленного и данных лабораторных исследований указать предположительный диагноз;
- обеспечить обеззараживание инфекционного материала.
Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.
Тестовый контроль
1. Каким из перечисленных признаков должна отвечать культура клеток, используемая для культивирования вируса?
а) способность к быстрой пролиферации
б) являться низкодифференцированной
в) все выше перечисленное
г) ни один из указанных
2.Какая из перечисленных стадий не характерна для репродукции вирусов?
а) адсорбция и проникновение вириона
б) депротеинизация, освобождение геномаи репродукция генома, синтез белка
в) интеграция в хромосому клетки хозяина
г) сборка вирионов и высвобождение вирионов из клетки
3.Каким образом можно выявить наличие вируса в зараженной культуре клеток?
а)по цитопатическому эффекту (деструкция)
б) по способности цитоплазматической мембраны инфицированных клеток адсорбировать эритроциты
в)по рН и цвету культуральной среды (цветная проба)
г) все перечисленное
4. Выход вирусных частиц у сложных вирусов происходит:
а) «взрывным механизмом»
б) путем «отпочковывания»
в) все перечисленное
г) ни один из указанных
5. Выход вирусных частиц у простых вирусов происходит:
а) «взрывным механизмом»
б) путем «отпочковывания»
в) все перечисленное
г) ни один из указанных
6. Что составляет генетический материал вируса:
а) ДНК
б) РНК
в) ДНК или РНК
г) ДНК и РНК
7. Проникновение вирусов в клетку происходит
а) путем виропексиса (рецепторного эндоцитоза)
б) при слиянии оболочки вируса с клеточной мембраной
в) сочетание их
г) все перечисленное
8. Гибель клетки хозяина при продуктивной вирусной инфекции не вызывает:
а) раннее подавление синтеза клеточных белков
б) накопление токсических и повреждающих клетку вирусных компонентов
в) повреждение лизосом и высвобождение их ферментов в цитоплазму
г) прерывание инфекционного процесса в клетке
9. Что такое вирусемия:
а) Первичное инфицирование
б) Состояние при переходе ВИЧ в СПИД
в) Циркуляция вируса с током крови в течение заболевания
г) интеграция генома вируса в хромосому клетки
10. Что такое вирогения:
а) Первичное инфицирование
б) Состояние при переходе ВИЧ в СПИД
в) Циркуляция вируса с током крови в течение заболевания
г) интеграция генома вируса в хромосому клетки и их совместное существование
Задача
У больного В. клинически диагностировали грипп. Врач назначил лечение. Одновременно провели вирусологическое исследование.
Вопросы:
1. Какой исследуемый материал взят у больного?
2. С помощью каких реакций можно провести индикацию и идентификацию возбудителя?