Количественное определение глюкозы в моче с помощью глюкотеста (экспресс-метод)

Принцип метода:глюкоза специфически окисляется ферментом глюкозооксидазой, нанесенной на индикаторную полоску, до глюконовой кислоты в присутствии молекулярного кислорода. По степени окраски индикаторной полоски, и при сравнении ее со стандартной цветной шкалой можно приблизительно определить количество присутствующей в исследуемой моче глюкозы.

Материал исследования: моча.

Порядок выполнения работы:во взятую натощак свеженабранную мочу погружают полоску глюкотеста так, чтобы желтая полоса, имеющаяся на полоске, была полностью смочена. Быстро извлекают бумажку из исследуемой мочи, кладут смоченным концом на пласт­массовую пластинку и выдерживает в таком положении около 2 мин. В случае, присутствия глюкозы в моче желтая полоска станет окрашиваться в различные оттенки зеленого цвета в зависимости от концентрации глюкозы; при отсутствии глюкозы цвет полоски не меняется. Точно через 2 мин (не снимая бумажки с пластинки) сравнивают окраску цветной полоски с окраской цветной шкалы:0,1%, 0,5%,2% растворы глюкозы и выше.

Клинико-диагностическое значение:глюкозурия (появление глюкозы в определенных количествах в моче при увеличении ее в крови до 10ммоль/л) может быть обусловлена физиологическими причинами (алиментарный фактор, беременность, стресс) или связана с патологией (сахарный диабет, острый панкреатит, гипертиреоидизм, гипоталямический синдром, эпилепсия, острые инфекционные и нервные заболевания, снижение реабсорбции в почечных канальцах и др

Контрольные вопросы для самоподготовки:

1. Какие функции в организме выполняют углеводы?

2. Напишите формулы: глюкозы, фруктозы, сахарозы.

3. Какова структура крахмала?

4. Какие типы связей встречаются в молекуле гликогена?

5. Дайте определение понятиям: гомополисахариды, гетерополисахариды.

6. В каком отделе пищеварительного тракта, и под действием каких ферментов происходит переваривание углеводов?

7. В чем сущность анаэробного окисления углеводов?

8. Дайте определение гликолиза и гликогенолиза.

9. Напишите словами схему анаэробного окисления углеводов.

10. В чем сущность аэробного окисления углеводов?

11. Дайте характеристику этапов аэробного окисления углеводов и его энергетическую ценность.

Тесты для самоподготовки:

1. Выберите правильныйответ. У ребенка 2-х лет, перенесшего инфекционный энтерит, после еды появляются рвота, диарея, боли в животе. После исключения молока из пищи симптомы исчезли. Выберите возможную причину заболевания:

А) нарушен синтез панкреатической амилазы

Б) блок фермента сахаразы

В) наследственный дефект лактазы

Г) приобретенный дефицит лактазы

Д) приобретенный дефект мальтазы.

2. Выберитеправильныйответ.В реакции гликолитической оксидоредукции участвует:

1) гексокиназа,

2) альдолаза,

3) триозофосфатизомераза,

4) глицеральдегидфосфатдегидрогеназа,

5) лактатдегидрогеназа.

3. Выберитеправильныйответ.Реакции, лимитирующие скорость гликолиза:

1) гексокиназная,

2) фосфофруктокиназная,

3) альдолазная,

4) триозофосфатизомеразная,

5) пируваткиназная.

4. Выберитеправильныйответ.Энергетическая ценность гликолиза:

1)2 молекулы АТФ,

2) 4 молекулы АТФ,

3) 12 молекул АТФ,

4) 36 (38) молекул АТФ,

5) 130 молекул АТФ.

5. Выберитеправильныйответ.Энергетическая ценность аэробного окисления глюкозы:

1)2 молекулы АТФ,

2) 4 молекулы АТФ,

3)12 молекул АТФ,

4) 36 (38) молекул АТФ,

5) 130 молекул АТФ.

6. Выберитеправильныйответ.Содержание глюкозы в крови составляет:

1) 2,22-4,44 ммоль/л,

2) 3,33-5,55 ммоль/л,

3) 2,55-5,55 ммоль/л,

4) 4,44-6,66 ммоль/л,

5) 3,55-6,55 ммоль/л.

7. Выберитеправильныйответ.Гипергликемия - это:

1) повышение содержание глюкозы в крови,

2) появление глюкозы в моче,

3) повышение содержания аминокислот в крови,

4) повышение содержания кетоновых тел в крови,

5) появление кетоновых тел в моче.

8. Выберите несколькоправильных ответов.Какие состояния сопровождаются актива

цией процесса глю­конеогенеза:

1) длительное голодание,

2) инсулинотерапия,

3) физическая нагрузка,

4) лечение преднизолоном,

5) сахарный диабет.

9. Выберитеправильныйответ.Причины непереносимости сахарозы:

1) отсутствие в слизистой кишечника сахаразы,

2) отсутствие в слизистой кишечника лактазы,

3) отсутствие в слизистой кишечника мальтазы,

4) отсутствие амилазы,

5) отсутствие изомальтазы.

10. Выберите правильныйответ.Лактатдегидрогеназа относится к:

1) гидролазам

2) оксидоредуктазам

3) изомеразам

4) трансферазам

5) лиазам

Задания для самоподготовки:

Заполнить таблицу «Переваривание и всасывание углеводов»

Отдел желудочно-кишечного тракта	Ферменты	Субстраты	Продукты перевари­вания
Ротовая полость	амилаза	крахмал	мальтоза
Желудок
12-перстная кишка
Тонкий кишечник
Толстый кишечник

Задачи для самоподготовки:

Задача №1.У находящегося на естественном вскармливании двухмесячного ребенка наблюдались диспепсические явления. Объясните тактику врача, назначившего обязательное контрольное взвешивание ребенка до и после кормления и выписавшего рецепт на получение кефира в детской молочной кухне для замены одного кормления.

Задача №2. Ребенок стал быстро терять в весе после перевода на смешанное вскармливание (введение в рацион сахарозы и крахмала), появилась непроходящая диарея. О каких причинах можно думать в этом случае? Каковы биохимические подходы к коррекции этого состояния?

Задача №3. Для чего нужна лактатдегидрогеназа (ЛДГ) в эритроцитах? Что произойдет с эритроцитом в присутствии ингибитора ЛДГ? Для ответа на вопросы напишите схему процесса, включающего реакцию, катализируемую ЛДГ. Укажите физиологическое значение процесса для эритроцитов.

Пример решения задач:

Задача: Сколько моль АТФ синтезируется при окислении 100 г глюко­зы в процессе аэробного и анаэробного гликолиза?

Алгоритм решения:

а. Подсчитать количество моль АТФ, образующееся в процессе аэробного и анаэробного гликолиза при окислении 1 моль глюкозы.

6. Исходя из молекулярной массы глюкозы (Mr = 180), рассчитать коли­чество моль глюкозы в 100 г.

в. Произвести расчет количества моль АТФ. синтезирующегося при окислении 100 г глюкозы.