1. Для некоторых исследований (подсчет эритроцитов и лейкоцитов) пользуются специальными смесителями или надевают на пипетку резиновую трубку с наконечником и, взяв его в рот, насасывают в пипетку необходимое количество крови. Выпускают кровь («выдувают») в пробирки с приготовленным раствором, препятствующим свертыванию. Для получения мазков (для подсчета лейкоцитарной формулы и других исследований) берут каплю крови на предметные стекла. Для взятия мазка к капле крови с края прикладывают предметное стекло, затем с помощью короткого края второго предметного стекла, поставленного под острым углом к расположенной на стекле капле, равномерно распределяют ее по всей поверхности стекла; таким образом делают мазок для исследования.
2.
|
Задание |
Программа действий |
|
1. Подсчет количества эритроцитов в крови человека |
1. Подготовить камеру. 2. Набрать кровь в капилляр до метки 0,5, затем 3% NaCl до метки 101 (разв. в 200 раз). 3. Заполнить камеру, считать под малым увеличением микроскопа. 4.3ная объем камеры и разведение крови, высчитывают кол-во эритроцитов по формуле: (А*4000*200)/80 = в 1 мкл и 1л крови. |
|
2.Подсчёт лейкоцитарной формулы |
1. Окрашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой. Используют окуляр 7 или 10 и об. 90 (конденсор поднят, диафрагма открыта). 2. На мазок наносят каплю иммерсионного масла. 3. Считают все встречающиеся лейкоциты, дифференцируя их по видам. Всего считают 200 клеток, подсчитывают каждый вид и делят на 2, чтобы получить процентное соотношение |
3.
резистентности эритроцитов. |
1. Приготовить в 8-ми пробирках 5 мл р-ра NaCl различной концентрации (0.9 - 0.2%). 2. В каждую пробирку пипеткой ввести по 3 капли дефибринированной крови. 3. Оставить на 1 час. 4. По цвету р-ра и его прозрачности определяют осмотическую стойкость. |
4.
|
1. Подготовить гемометр, заполнив градуированную пробирку 0.1 н. р-ром НС1 до метки 0.2 мл (первое кольцо). 2.Набрать кровь 0.02 мл. и выдуть в пробирку с кислотой. 3.Оставить гемометр на 5 мин., приливать по каплям дист. воду. Разведение проводят до полного совпадения цвета пробирки с цветом стандарта. Показания гемометра считают по нижнему мениску. |
5.
|
1 Определение времени свертывания крови (метод Сухарева, Бюркера и Дьюка). |
Метод Сухарева: 1. Кровь в кол-ве 25-30 мл набирают в капилляр от аппарата Панченкова и переводят в середину капиллярной трубки. 2.Включают секундомер и через каждые 20 сек. наклоняют капилляр вправо, влево, под углом 30-40 градусов. 3. Определяют начало и конец свёртывания, с замедления движения и до полной остановки в капилляре. Метод Бюркера: Каплю крови берут на предметное стекло и углом другого предметного стекла приподнимают каплю крови. Определяют время свёртывания от начала появления нитей до конца образования сгустка. По Дьюку: Проколоть палец, ватным тампоном вытирают каплю крови через каждые 30 сек. До прекращения кровотечения. Определить время свёртывания. |
6.
|
2.Определение объёмного соотношения плазмы и форменных элементов крови |
Промыть капилляр центрифуги. Шкляра цитратом, набрать кровь в капилляр и центрифугировать в течении 1 мин. |
7.
|
3. Определение группы крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов анти-А и анти-В |
В две ячейки белой пластины вносят по капле исследуемой крови, затем в одну вносят цоликлон анти-А, в другую – анти-В (соотношение 1: 10), планшет покачивают и наблюдают за агглютинацией. |
8.
|
4. Определение резус-фактора |
В ячейку белой пластины внести каплю крови и цоликлон анти-D. |
9.
|
Вычисление проводят по определенным ранее показателям эритроцитов и гемоглобина. Вычисление проводят путем деления утроенного числа гемоглобина в граммах на 1л на первые 3 цифры числа эритроцитов. |
10.
|
1.Определение СОЭ методом Панченкова |
1.Подготовить капилляр, промыть цитратом 2.На часовое стекло нанести р-р цитрата, отмеренного капилляром (половина метки «Р»). З.Набрать кровь до метки «К». 4.Перемешать кровь с цитратом, набрать до отметки «О» и поставить на час в штатив. |
11.
Расшифровка анализа крови:
|
Обозначения, сокращения |
Нормальные величины - общий анализ крови |
|||||||||
|
дети в возрасте |
взрослые |
|||||||||
|
1 день |
1 мес |
6 мес |
12 мес |
1-6 лет |
7-12 лет |
13-15 лет |
мужчина |
женщина |
||
|
Гемоглобин Hb, г/л |
180-240 |
115-175 |
110-140 |
110-135 |
110-140 |
110-145 |
115-150 |
130-160 |
120-140 |
|
|
Эритроциты RBC |
4,3-7,6 |
3,8-5,6 |
3,5-4,8 |
3,6-4,9 |
3,5-4,5 |
3,5-4,7 |
3,6-5,1 |
4-5,1 |
3,7-4,7 |
|
|
Цветовой показатель MCHC, % |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
0,85-1,15 |
|
|
Ретикулоциты RTC |
3-51 |
3-15 |
3-15 |
3-15 |
3-12 |
3-12 |
2-11 |
0,2-1,2 |
0,2-1,2 |
|
|
Тромбоциты PLT |
180-490 |
180-400 |
180-400 |
180-400 |
160-390 |
160-380 |
160-360 |
180-320 |
180-320 |
|
|
СОЭ ESR |
2-4 |
4-8 |
4-10 |
4-12 |
4-12 |
4-12 |
4-15 |
1-10 |
2-15 |
|
|
Лейкоциты WBC, % |
8,5-24,5 |
6,5-13,8 |
5,5-12,5 |
6-12 |
5-12 |
4,5-10 |
4,3-9,5 |
4-9 |
4-9 |
|
|
Палочкоядерные, % |
1-17 |
0,5-4 |
0,5-4 |
0,5-4 |
0,5-5 |
0,5-5 |
0,5-6 |
1-6 |
1-6 |
|
|
Сегментоядерные, % |
45-80 |
15-45 |
15-45 |
15-45 |
25-60 |
35-65 |
40-65 |
47-72 |
47-72 |
|
|
Эозинофилы EOS, % |
0,5-6 |
0,5-7 |
0,5-7 |
0,5-7 |
0,5-7 |
0,5-7 |
0,5-6 |
0-5 |
0-5 |
|
|
Базофилы BAS, % |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
0-1 |
|
|
Лимфоциты LYM, % |
12-36 |
40-76 |
42-74 |
38-72 |
26-60 |
24-54 |
25-50 |
18-40 |
18-40 |
|
|
Моноциты MON, % |
2-12 |
2-12 |
2-12 |
2-12 |
2-10 |
2-10 |
2-10 |
2-9 |
2-9 |
|