Новосибирская Государственная медицинская академия

Кафедра нормальной физиологии

ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ

Учебно-методическое пособие

по проведению лабораторных работ

по курсу нормальной физиологии

Новосибирск

2004

Новосибирская Государственная медицинская академия

Кафедра нормальной физиологии

ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ

Учебно-методическое пособие

по проведению лабораторных работ

и оформлению протоколов опытов

на занятиях по нормальной физиологии

Авторы-составители: Антропова Л.К., ассистент кафедры нормальной физиологии, канд.мед.наук

Курдубан Л.И., профессор кафедры нормальной физиологии, доктор мед.наук

Новосибирск

2004

УДК 612.1(072)

Физиология крови. Учебно-методическое пособие по проведению лабораторных работ и оформлению протоколов опытов на занятиях по нормальной физиологии. Новосибирск: Новосибирская Государственная медицинская академия, 2001.  32с.

Настоящее учебно-методическое пособие представляет практические работы по физиологии крови человека и животных. Пособие составлено в соответствии с требованиями учебных программ по нормальной физиологии и предназначено для самостоятельной работы студентов при выполнении лабораторных работ.

Издание рассчитано на студентов всех факультетов медицинских академий, педагогических академий и университетов.

Печатается по постановлению ЦКМС от «17» июня 1998 г., протокол №7.

Авторы-составители: Антропова Л.К., ассистент кафедры нормальной физиологии, канд.мед.наук

Курдубан Л.И., профессор кафедры нормальной физиологии, доктор мед.наук

Редактор: Куликов В.Ю., заведующий кафедрой нормальной физиологии, профессор, доктор мед.наук

Технический редактор: Пыстина Е.А.

Рецензенты: доцент каф.педагогики и мед.психологии Меркушев В.В.

Доцент кафедры патологической физиологии

Начаров Ю.В.

 Новосибирская государственная медицинская академия, 2004

О г л а в л е н и е

Предисловие	2
1. Кровь как внутренняя среда организма	3
2.1.Определение осмотической резистентности эритроцитов	3
2.2.Буферные системы крови	4
2.3.Расчет осмотического и коллоидно-осмотического (онкотического) давления в биологических жидкостях	7
2. Форменные элементы крови	8
3.1.Подсчет форменных элементов крови	8
3.1.1.Подсчет эритроцитов в счетной камере с использованием смесителя для разведения	8
3.1.2.Подсчет эритроцитов в счетной камере с использованием пробирочного метода для разведения	12
3.1.3.Подсчет лейкоцитов в счетной камере с использованием смесителя для разведения	12
3.1.4.Подсчет лейкоцитов в счетной камере с использованием пробирочного метода для разведения	13
3.2.Определение количества гемоглобина	14
3.3.Вычисление цветового показателя	16
3. Плазма крови. Антигенные свойства крови	18
4.1.Определение скорости оседания эритроцитов	18
4.2.Определение группы крови системы АВО	20
4.2.1.Определение группы крови с помощью стандартных гемагглютинирующих сывороток	20
4.2.2. Определение группы крови с помощью цоликлонов	23
4.3.Определение группы крови системы резус	25
4.3.1.Определение группы крови с помощью стандартных гемагглютинирующих сывороток	25
4.3.2. Определение группы крови с помощью цоликлонов	26
4. Механизмы свертывания крови	28
5.1.Анализ механизма свертывания крови	28
5.2.Определение времени свертывания крови	30
5.3.Коагулография (коагулометрия)	31

Предисловие

Настоящее учебно-методическое пособие является логическим продолжением предыдущего и посвящено вопросам проведения практических занятий по физиологии крови. Оно содержит разработки форм выполнения на современном методическом уровне ряда классических лабораторных работ, традиционно включаемых в курс обучения студентов.

Пособие знакомит студентов с принципами работы, возможностями и правилами использования новых медицинских приборов, выпускаемых отечественной промышленностью для научно-исследовательских лабораторий и клиник.

Методическое пособие включает описание наиболее важных методов исследования крови, имеющих значение для клиники; содержит разработки лабораторных работ, знакомящих студентов с рядом современных теоретических и практических проблем физиологии.

Вместе с тем в пособии сохранены ценные в методическом отношении классические лабораторные работы в общепринятой форме их выполнения.

В каждом разделе даны рекомендации по оформлению протоколов выполненных работ.

Глава I

физиология крови

1. КРовь как внутренняя среда организма

1.1. Определение осмотической резистентности эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам

Для оценки физико-химических свойств эритроцитов исследуют резистентность (стойкость) эритроцитов к различным воздействиям. Наибольшее распространение в клинической практике получило исследование осмотической резистентности эритроцитов.

При помещении эритроцитов в изотонический раствор (0,9% раствор хлорида натрия) форма и объем клеток не изменяются, так как количество воды, поступающее в эритроцит, будет равно количеству воды, выходящему из него.

В гипертонических растворах эритроциты сморщиваются, так как согласно осмотическим законам жидкость покидает клетку.

В гипотонических растворах вода поступает из окружающей среды в эритроциты, они набухают, увеличиваются в размерах, оболочка клеток разрывается и гемоглобин выходит в раствор, окрашивая его в красный цвет.

Осмотическая резистентность эритроцитов определяется такой концентрацией гипотонического раствора, при которой они не подвергаются гемолизу. Эритроциты одной и той же крови обладают неодинаковой осмотической резистентностью, поэтому различают начало гемолиза, то есть ту концентрацию гипотонического раствора, при которой гемолизу подвергаются наименее стойкие эритроциты (появляется слабое окрашивание гипотонического раствора жидкости), и полный гемолиз - ту концентрацию гипотонического раствора, при которой гемолизируются все эритроциты (раствор ярко окрашен, осадок отсутствует).

Для работы необходимы: донорская кровь, гипотонический раствор хлорида натрия разной концентрации (0,6%; 0,55%; 0,45%; 0,40%; 0,35%; 0,30%; 0,25%), восемь пробирок, штатив, глазная пипетка.

Проведение работы. В штатив помещают 8 пробирок, в каждую из которых налито по 2 мл гипотонического раствора хлористого натрия различной концентрации (от 0,6% до 0,25%). Затем в каждую пробирку глазной пипеткой капают по 2 капли дефибринированной крови. После заполнения всех пробирок кровью их встряхивают и оставляют стоять в течение часа при комнатной температуре. После этого по цвету раствора отмечают минимальную и максимальную осмотическую резистентность эритроцитов. Границы осмотической резистентности эритроцитов человеческой крови: минимальная - 0,48% и максимальная - 0,32%.

Оформление протокола. Записать полученные результаты в таблицу, оценить их, выявив наличие полного, частичного гемолиза или отсутствие его.

Таблица оформления протокола

№ пробирки	1	2	3	4	5	6	7	8
Концентрация (%) раствора NaCl Количество раствора (мл)	0,6	0,55	0,5	0,45	0,4	0,35	0,3	0,25
	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
Результаты: гемолиза нет (-), гемолиз неполный (+-), гемолиз полный (+)

Вывод: Сравнить полученные результаты с физиологической нормой, дать определение понятий минимальной и максимальной резистентности эритроцитов, указать возможные клинические варианты изменений этого показателя.