Посттранскрипционный процессинг пре-мРНК 113
1.Внутри транскрипта разрываются связи примерно через 15-25 нуклеотидов после цепочки нуклеотидов AAUAAA и за менее чем 50 нуклеотидов до участка богатого U- или GU-нуклеотидами.
2.Поли(А)-хвост синтезируется из АТФ ферментом поли(А)-полимера-
зой.
Как только эукариотическая мРНК попадает из ядра в цитозоль, к её поли(А)- хвосту присоединяется особый поли(А)-связывающий белок. Экспериментально было доказано, что синтез поли(А)-хвоста и связывание этого белка с ним стабилизирует мРНК и защищает её от действия клеточных нуклеаз.
В Сплайсинг
Большинство генов у высших эукариот содержат интроны (некодирующие участки), которые подвергаются сплайсингу после транскрипции, т.е. удаляются, а оставшиеся экзоны (кодирующие последовательности) сшиваются между собой. В этом процессе участвуют малые ядерные РНК в комплексе с белками (сплайсосома).
Первичные транскрипты эукариот (пре-мРНК или гетерогенные ядерные РНК, гяРНК) варьируются по длине своей цепочки, но в целом длиннее, чем кодируемые ими белки (от ~2 000 до 20 000 нуклеотидов). Это значит, что они очень часто содержат интроны, которые позже удаляются. Малая часть гяРНК переносится в цитозоль из ядра. Если к таким цепочкам не будет присоединён кэп и поли(А)-хвост, они будут расщеплены ядерными ферментами нуклеазами.
У человека количество интронов на один ген варьируется от 0 (в генах, кодирующих гистоны и интерфероны) до 364 (у гена белка титина), а их длина — от 65 нуклеотидов до 800 000 (у гена мышечного белка дистрофина). Как правило, интрон начинается с последовательности из двух нуклеотидных остатков GU и заканчивается остатками AG. При этом на 3’-конце интрона находятся 10 пиримидиновых остатков (U или C), после которых находится любое основание, за ним — цитозин (C) и заканчивается интрон остатками AG, как было сказано выше. У интрона есть ещё один внутренний сайт — сайт ветвления, расположенный в 20-50 нуклеотидах от 3’-конца интрона (см. Рис. 78 ▼).
Рис. 78. Строение интрона.
Ядро содержит множество видов малых РНК длиной менее 300 нуклеотидов, которые ещё называют мяРНК (малые ядерные РНК). Некоторые из них — U1, U2, U4, U5 и U6 — необходимы для сплайсинга пре-мРНК. Эти мяРНК ассоциированы с белками и образуют рибонуклеопротеиновые комплексы. Вместе с факторами сплайсинга эти комплексы образуют надкомплекс — сплайсосому.
113