2.C белком DnaA связываются белки DnaB (тоже хеликазы) и тоже разматывают двойную спираль ДНК. Эти белки играют ключевую роль в образовании репликативных вилок, поскольку именно они будут двигаться в разных направлениях и разматывать двойную спираль ДНК в элонгации.

3.Все остальные белки, участвующие в репликации, связываются с DnaB.

4.Хеликазы DnaB движутся по цепи ДНК в направлении 5’→3’, оставляя позади одиночные несвязанные между собой цепи ДНК. Образуется репликативная вилка. Повторному сворачиванию цепей ДНК в двойную спираль препятствуют SSB-белки (single-strand binding, связывающиеся с одной цепью ДНК). ДНК-гиразы снимают торсионное напряжение на цепях ДНК.

5.Для начала синтеза дочерней ДНК (лидирующей и отстающей цепей) требуется синтез РНК-праймера («затравки», т.е. цепочки рибонуклеотидов). Все ДНК-полимеразы синтезируют цепи ДНК, присоединяя нуклеотиды к свободной 3’-OH группе уже существующей цепи (т.е. полимеразам нужна цепь нуклеотидов и свободный 3’-конец для начала синтеза). Праймер синтезируется праймосомой — ферментом, состоящим из белков DnaB (хеликаза) и DnaG (праймаза). Длина праймера — 9–11 нуклеотидов. Затем эти праймеры вырезаются и застраиваются ДНК-полимера- зой I. Вместо них в цепь включаются комплементарные дезоксирибонуклеотиды. Сами фрагменты сшиваются между собой ДНК-лигазами.

4.3Элонгация репликации у прокариот

АОбщая характеристика

Элонгация — это вторая стадия репликации, в ходе которой происходит синтез лидирующей и запаздывающей цепей ДНК. Обе цепи синтезируются на матрице родительских цепей по принципу комплементарности.

У кишечной палочки E. coli обе цепи — лидирующая и отстающая — синтезируются ДНК-полимеразой III (см. Рис. 64 ▲). Это происходит внутри крупного белкового комплекса, включающего две ДНК-полимеразы III — реплисомы. Чтобы реплисома могла двигаться в направлении 5’→3’, запаздывающая цепь должна образовать петлю определённым образом (см. Рис. 65 ▼).

Для элонгации очень важно присутствие β-субъединицы ДНК-полимеразы III, которую ещё называют «β-хомутом», поскольку она удерживает полимеразу на цепи ДНК и не даёт ей диссоциировать (отсюда и название — «хомут»). Скорость репликации у E. coli составляет ~1 000 нуклеотидов в секунду.