biotekhnika_ekzamen

39. сперматогенез. Это процесс образования спермиев, идет в извитых канальцах семенника. Различает 4 периода: размножение, рост, созревание, формирование. В течение этих периодов происходит увеличение размера, изменение формы и перестройка хромосом. процесс сперматогенеза обусловлен влиянием гармонов передней доли гипофиза, у самцов фолликулостимулирующий гормон, вызывает развитие семенных канальцев и стимулирует начальные стадии сперматогенеза. Лютеинезирующий гормон стимулирует выработку тестостерона, необходимого для нормального завершения сперматогенеза. В свою очередь ФСг и ЛГ выделяются под влиянием рилизинг факторов (либерины) – это нейросекреты гипоталамуса. В семенниках половозрелых самцов спермии образуются непрерывно. Так же тестостерон определяет вторичные половые признаки и потенцию. Сперматозоиды попадают в придаток семенника и дозревают ( то есть покрываются липопротеидной оболочкой и приобретают отрицательный электрический заряд). Хвост придатков семенника служит местом хранения спермиев.

40. искусственное осеменение овец и коз. Визоцервикальный метод (зеркало) осеменения, потому что они маленького размера. Сезонность размножения, требуется массовый подход к осеменению. Выявляют самку в охоте бараном-пробником, проверяют на предмет гинекологических заболеваний. Методика такая же как у КРС см вопрос 37. Но используется специальный шприц катетер на множественное осеменение, после каждого осеменения те части, которые соприкасаются с половой системой самки обрабатываются 96% раствором спирта.

41. искусственное осеменение свиней. Методы: фракционный, разработан в середине 20 века (Квасницкий), применяется редко, используются 2 фракции, первая неразбавленная сперма и вторая заполнитель, его функйия проталкивание спермы вперед. Хряк пробник выявляет матку в охоте (идет по проходу и свиньи на него реагируют). Флакон с неразбавленной спермой достают из термостата, его пропукают через влагалище во внутрь матки через катетер, прикручивают флакон, приподнимают выше уровня спины, сперма самотеком идет в матку, убирают флакон, меняют на второй флакон с заполнителем, и повторяют процесс. У свиней рога матки витиеватые и сперма проникает во все места спустя час. 2 метод ВИЖа: сперму можно использовать разбавленную (1мл спермы на 1 кг массы самки, максимально 150мл) или неразбавленную. Используют катетер и флакон. Флакон похож на первый метод, а катетер другой – имитирующий член быка

42. биотехнология нативной спермы. Сперма это жидкость от светло серого до соломено -желтого цвета, не имеет запаха (исключение баран – пахнет потом). Это получение максимального количества спермы с сохранением ее высокого качества и способностью к замораживанию при минимальных затратах. Генетические факторы: порода, вид животного, линия, кровность, племенная категория. Индивидуальные различия по качеству спермы дает возможность проводить селекцию и анализ паратипических факторов, влияющих на качество спермы (возраст). До середины роста качество спермы растет, потом начинается спад. На качество влияет сезон года (зимой и весной лучше), фаза луны. Оценка сперматозоидов по морфологическим признакам: оценка спермы органо-липтически (визуально), микроскопический: по густоте (если расстояние меньше диаметра головки, то густая, если расстояние рано расстоянию меду головками, то средняя, если расстояние больше диаметра между головками, то редкая), по концентрации (определяется в счетной камере Горяева – посчитывают по клеточкам, либо фотоэлектрокаллориметр – берут пробу, если сперма менее густая, то световые лучи проходят больше, потом включают прибор и он показывает по шкале показатели), по активности и подвижности в баллах от 1 до 10 (свежеполученная сперма имеет 8, а замороженная и оттаянная 4 балла, ниже 4х баллов сперма выбраковывается), типы движения: прямолинейно поступательные (норма), манежные, колебательные (стоит на месте и машет хвостиком), атоксия – недвижение, оценка по форме: усеченный хвост, короткий хвост, усеченная головка, отсутствие хвоста, раздвоенная головка, карликовый сперматозоид, гигантской сперматозоид допускается до 15% спермия патологической формы.

43. методика замораживания спермы и хранения в жидком азоте. См 27,22,23. Хранение в сосуде дюара. по скольку азот постоянно испаряется из сосудов дюара, его необходимо периодически наливать. В современных сосудах имеется специальное отверстие через которое идет доливка. 2 раза в год сосуды профилактически дезинфицируют, выливают азот, отогревают в помещении не менее 2х суток, моют горячей водои не выше 70 градусов, и подвергают влажной дезинфекции.

44. искусственное осеменение птиц. Особенности овуляция у кур каждый день, половой цикл = 24 часам, развитие плода вне матки, большое количество питательных веществ, атрофирован 1 яичник. Куры осеменяются во второй половину дня после снесения яйца, сперма живет 3 недели в половых путях самки, а у гусыни 1,5месяца. Сперма у петухов стимулируется поглаживанием, половой аппарат редуцирован, поэтому сперму берут через клоаку, надавливанием лонных костей, 2 оператора за 1 час могут осеменить 50 кур.

45. оборудование лаборатории для искусственного осеменения пчел. Взятие спермы у трутня, осеменение матки. Оборудование: микротрубочка, микрошприц, прибор для фиксации матки, штатив для крепления трубочки, микрокрючки, клетка Титова (для восстановления естественного запаха). Взятие спермы у трутня: собирают путем легкого надавливания на брюшко, микрошприцом собирают сперму. Оплодотворение матки: фиксируют штатив, на нем фиксируют трубочку, на которой фиксируют матку, ее усыпляют СО2 и при помощи микрокрючков раскрывают камеру жала и вливают сперму 10-15 трутней. Потом перемещают матку в клетку Титова, на несколько дней, для восстановления собственного запаха матки.

46. анатомия половых органов коровы. Микроскопическое строение яичника. Физиология полового цикла. Половая система состоит из наружных (вульва, клитор и преддверия влагалища) и внутренних (влагалище, матка, яйцепроводы, яичники) органов. Вульва – состоит из 2х половых губ и вертикально расположенной между них половой щелью, снаружи покрыта кожей, а внутри слизистой оболочкой. Клитор – рудимент полового члена самца, состоит из 2х ножек, прикрепляющихся к седалищным буграм, заканчивается головкой. Преддверия влагалища – начинаются от половых губ и тянутся до соединения с влагалищем, в него открывается мочеиспускательный канал, в нем заложены железы, которые увлажняют и обеззараживают. Влагалище – мускульно-эластичная трубка от преддверия до шейки матки, у крс 25-30 см, стенка влагалища имеет 3 слоя (мышечная, серозная и слизистая), упирается во влагалищную часть шейки матки. Матка – делится на шейку, тело и 2 рога, шейка толстостенная, лежит в тазовой полости, так же имеет 3 оболочки, легко прощупывается через прямую кишку, выделяет антибактериальную слизь, шейка матки 12 см, тело матки – короткое до 5 см, от него отходят 2 рога длинна каждого 30 см, межроговой желоб – точка бифуркации (раздвоения), вдоль всей длинны рога прикреплена маточная связка, с помощью которой рога подвешены, к верхней стенке тазовой полости, над поверхностью тела и рогов матки выступают курункулы (образования, обеспечивающие во время беременности связь плода с матерью). Яйцепроводы – парные сильно извитые трубочки, длинна 20 см, в них различают 3 участка (перешейк, ампула, воронка), много продольных и поперечных складок, эпителий представлен мерцательными и секреторными клетками. Яичники – парные органы в которых образуются половые клетки (яйцеклетки), и половые гормоны, у крс яичники эллипсоидной формы, длинна до 5см, наружный (занимает большую часть яичника и содержит фолликулы на разных стадиях развития и желтые тела) и внутренний (представлен сосудами, нервами и соединительной тканью) слой. Яичники при пальпации обнаруживаются в тазовой полости, зрелый фолликул прощупывается на поверхности яичника в виде напряженного пузырьковидного выпячивания, а желтое тело имеет вид грибовидного выступа. Физиология полового цикла – совокупность морфологических и физиологических, биохимических и этологических и др изменений в самке, направленных на оплодотворение и повторяющийся с определенной периодичностью. По Хиппу: основа периодизации эструс (течка). Периодизация: проэструс – подготовка к беременности, эструс – течка, метэструс – спад, анэструс – полный покой отсутствие всех выше перечисленных процессов. Студенцов: разделил период на 3 стадии, все стадии состоят из 21 дня: стадия возбуждения, стадия торможения и уравновешивания. Открыл 4 феномена полового цикла: течка, охота, общая реакция организма, изменения в яичнике заканчивающийся овуляцией. Половые циклы делятся на: полноценные (все 4 феномена) и не полноценные (если выпадает течка – анестральный, если выпадает охота – алебидный, если отсутсвует реакция организма – ареактивный, если отсутствует овуляция – ановуляторный); регулярные, не регулярные, полицикличные, моноцикличные, бицикличные. Физиология полового цикла коровы: регулируется нейрогуморально, на кору больших полушарий воздействуют внешние условия (звуки, температура, запахи, свет), кора бп действует на гипоталамус (нервно), гипоталамус действует на гипофиз (гуморально, релизинг гормоны: либерины и статины), гипофиз посылает фсг и лг в яичник, после действия лг на фолликул, фолликул лопается, на месте него образуется желтое тело, которое выделяет прогестерон, успокаивающий и сохраняющий беременность, если произошло оплодотворение, желтое тело сохраняется до конца беременности, в конце рассасывается и происходят роды, если оплодотворение не произошло, то желтое тело сохраняется на протяжении полутора недель, потом рассасывается под воздействием гормоноподобных веществ – простогрландинов, которые образуются в слизистой оболочке матки, начинает расти новый фолликул, цикл повторяется. Желтые тела: циклические, беременности, остаточные, патологические – персестентное. Овуляция: спонтанная и рефлекторная.

47. овогенез.

49. искусственное осеменение северных оленей (важенок): про сперму см вопрос 15, важенок осеменяют так же как и овец см вопрос 40.

50. оттаивание и оценка качества замороженной спермы: оттаивать замороженные спермии нужно быстро, чтобы не образовались кристаллы, которые губительно действуют на спермии, для оттаивания спермы необходима водяная баня и специальный разбавитель (обычно используют желточный разбавитель или лимонно кислый натрий. Желточный разбавитель лучше защищает сперму после оттаивания от неблагоприятных условий среды. Методика желточного разбавителя: в водяную баню помещают сухой стерильный флакон, после нагревания флакона, в него помещают 2,3 грамма желточного разбавителя, после того как температура желточного разбавителя достигнет38 градусов, в него помещают гранулы спермы для оттаивания, как только сперма оттает немедленно использовать, после оттаивания нельзя держать сперму на водяной бане, в шприце, на столе, так как это снижает ее качество. Оценка: сперму оценивают только по подвижности, по баллам от 1 до 10, самый наименьший 4, остальное выбраковка.

51. естественное осеменение пчел: улей состоит из рабочих и трутней и матки. Пол зависит от условий кормления: рабочая (смесь меда и пыльца), матка (маточное молоко). Матка вылетает один раз для спаривания с самцами на 9-15 метров от земли, удаленность 1,5-2 км от улея, трутни за ней. Матка спаривается с 7-10 партнерами, самцы после этого умирает , затем матка возвращается в улей. Начинается откладка яиц по 2000 в день, до тех пор пока не кончится сперма. После того как закончится – откладывает неолодотворенные яйца, из которых выходят трутни, живет 6-7 лет.

52. искусственное осеменении пчел. см вопрос 45

53,54,58. визуальная, микроскопическая оценка спермы. Методика исследований. См вопрос 42. Методика исследований: воздействие гипер- и гипотонического раствора – на предметное стекло помещают каплю спермы рядом помещают каплю гипотонического раствора, накрывают покровным стеклом, вода устремляется из спермия в окружающую среду, спермии гибнут от обезвоживания; так же с гипертоническим раствором, только вода устремляется в спермий и он лопается. Воздействие высоких и низких температур - сперму помещают на предметное стекло а накрывают покровным стеклом, выдерживают 30 секунд над стаканом воды (температура 37-40 градусов), снимают стекло, наблюдают резкое повышение активности спермиев; низкая температура: в чашку петри кладут сперму, помещают чашку на лед на 30 секунд, происходит резкое замедление движения спермиев. Воздействие йода на сперму: на предметное стекло капают каплю спермы, вокруг размещают несколько капель йода, не накрывают покровным стеклом, а сразу под микроскопом наблюдают постепенную гибель, а если перемешать с йодом, наступает мгновенная смерть.

55. виды патологических форм сперматозоидов. Соотношение нормальных и патологических форм. см вопрос 42

56. искусственное осеменение кобыл: метод визоцервикальный, ректально проверяют состояние яичника, используют резиновый катетер и шприц, овулирует 1 фолликул, осеменение маточное, спермодозу набирают в специальный шприц, катетер вводят в тело матки и выдавливают шприц.

57. концентрация и активность сперматозоидов. См вопрос 42.

59. организация искусственного осеменения. См вопрос 7.

60 организация работы племенного предприятия. См вопрос 6, 7.