4. Методы исследования цитокинов.

Цитокины – это регуляторные белки, которые образуют универсальную сеть медиаторов иммунной системы. Продуцируемые иммунокомпетентными клетками, выделяемые в межклеточное пространство цитокины можно определять количественно с помощью целого ряда методов иммуноанализа, использующих поли- и моноклональные антитела. По концентрации этих белков в сыворотке крови можно судить о характере патологического процесса и о функциональном состоянии клеток. Можно исследовать внутриклеточное содержание цитокинов и их продукцию в тканях методом проточной цитофлюориметрии. Важную информацию может иметь исследование экспрессии мРНК цитокинов. Оценивают биологическую активность цитокинов в различных биологических средах.

Заключение.

В заключении следует сказать, что исследование иммунного статуса имеет определяющее значение в диагностике иммуноопосредованных заболеваний. При дальнейшем изучении дисциплины следует обратить внимание на объем иммунологического обследования, необходимый для уточнения диагноза, определения тактики лечения и прогноза при первичных иммунодефицитах, чаще встречающихся в практике врача вторичных иммунодефицитах, а также аутоиммунных и аллергических заболеваниях.

Логично предположить, что возможности использования иммунологических методов в различных областях клинической медицины могут быть расширены в связи с дальнейшим изучением тонких механизмов работы иммунной системы, разработкой новых методических подходов.

Вопросы для самоконтроля.

1. Назовите иммунологический метод, используемый для количественного определения популяций и субпопуляций лимфоцитов.

2. Что понимают под иммунным статусом?

3. Перечислите основные дифференцировочные антигены (маркеры) зрелых Т-лимфоцитов, хелперных Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, НК-клеток.

4. Назовите метод, используемый для оценки функциональной активности Т- и В-лимфоцитов.

5. Какие методы используются для количественного определения иммуноглобулинов сыворотки крови (IgG, IgM, IgA)?

6. Назовите иммунологический метод, наиболее часто используемый для определения специфических антител.

7. Какие функции моноцитов и макрофагов можно оценить с помощью лабораторных методов?

8. Какие методы используются для оценки бактерицидности фагоцитов?

9. Что такое НСТ-тест?

10. Функцию каких клеток позволяет оценить метод ГЗТ in vivo?

11. Назовите иммунологические методы, основанные на реакции антиген-антитело.

Словарь иммунологических терминов.

Агглютинация – слипание клеток, обусловленное действием антител.

Адгезия – прилипание. Адгезия клеток служит основой взаимодействия клеток иммунной системы между собой, с сосудистым эндотелием, межклеточным матриксом, обусловлена специализированными молекулами типа интегринов, селектинов и их рецепторов.

Активация клеток – переход клеток из покоящегося в функционально активное состояние.

Аллогенный, алло- – определение и приставка, обозначающие генетически различающиеся особи одного вида или трансплантации тканей между такими особями.

Ангтиген – чужеродная субстанция, при попадании в организм способная вызвать иммунный ответ, направленный на ее удаление. Обычно белок или полисахарид. Антигенспецифические рецепторы (рецепторы для антигенов) – ключевые структуры поверхности лимфоцитов, определяющие распознавание ими антигенных эпитопов и специфичность иммунного ответа.

Антитела – иммуноглобулины, обладающие специфичностью, т.е. сродством к конкретным антигенным эпитопам.

Антителозависимая клеточная цитотоксичность (АЗКЦ) – разновидность эффекторных клеточных реакций при иммунном ответе, состоящая в цитолизе опсонизированных клеток-мишеней NK-клетками.

Апоптоз – программированная гибель клеток.

В-лимфоциты – разновидность лимфоцитов, дифференцируются в костном мозге. При связывании антигена дифференцируются в плазматические клетки – продуценты антител.

ГЗТ (гиперчувствительность замедленного типа) – реакция на антигены, развивающаяся через 1-3 сут. Вариант клеточного иммунитета.

Гранзимы – сериновые протеиназы, которые выделяются Т-киллерами и NK-клетками, проникают в клетку-мишень через перфориновые поры и, активируя ядерные молекулы-мишени, запускают процесс апоптоза клетки.

Иммуноблоттинг – метод, основанный на выявлении индивидуальных белков в смесях путем переноса компонентов, разделенных методом электрофореза, на целлюлозную основу с последующим проявлением мечеными антителами.

Иммуноглобулины (Ig) – класс молекул, выполняющих функции антител.

Иммунолигандный анализ – группа методов исследований, основанная на количественном определении концентраций иммунологически значимых компонентов смесей (антигенов, антител) на основе связывания их с лигандами (соответственно антителами или антигенами), мечеными ферментами (иммуноферментный анализ) или радионуклидами (радиоиммунный анализ).

Иммунные комплексы – молекулярные комплексы, образующиеся при взаимодействии антигенов и антител.

Иммунофлюоресценция – феномен, основанный на визуализации клеток, несущих антигены, с помощью антител, меченных флюорохромами.

Иммуноэлектрофорез – метод анализа антигенных смесей, основанный на последовательном электрофоретическом разделении компонентов и иммунодиффузии с использованием антител заданной специфичности.

Интегрины – молекулы адгезии, экспрессируемые на поверхности клеток. Обуславливают двустороннюю передачу сигналов в клетку и из нее.

Кислородный взрыв – серия превращений, происходящих в фагоцитарных клетках с участием атома кислорода, с образованием продуктов, обладающих высокой бактерицидной активностью.

Кластеры дифференцировки (CD) – обозначения мембранных маркеров клеток костномозгового происхождения (буквы CD с номером; CD – от английского claster designation), основанные на выявлении маркеров с помощью группы (кластера) моноклональных антител, реагирующих с одним и тем же или разными эпитопами одной и той же молекулы.

Клон – потомство одной клетки.

Комплемент – система белковых факторов, каскадно активируемых в условиях внедрения в организм чужеродных агентов. Результатом является опсонизация или лизис клеток-мишеней.

Маркер клеток – признак, молекула (обычно антиген или фермент), наличие которого позволяет идентифицировать ее и отличить от других клеток.

Митогены – белки, способные активировать лимфоциты и вызывать их пролиферацию по поликлональному принципу.

Моноклональные антитела – антитела, однородные по всем показателям (включая специфичность), которые секретируются одним клоном антителообразующих клеток. Продуцируются клетками гибридомы.

Опсонизация – связывание антител, компонентов комплемента, острофазных белков с поверхностью клеток-мишеней, облегчающее их фагоцитоз.

Поликлональный ответ – разновидность иммунного ответа, состоящая в вовлечении в иммунный ответ лимфоцитов различных клонов.

Реакция «трансплантат против хозяина» (РТПХ) – иммунная реакция клеточного типа, развивающаяся при трансплантации Т-лимфоцитов в условиях тканевой несовместимости донора и реципиента. Обусловлена иммунным ответом трансплантированных Т-клеток против антигенов MHC хозяина.

Рецепторы – молекулы, расположенные как правило, на поверхности клетки или внутри нее. Специфически связывают субстанции (лиганды).

Специфичность – свойство антигенов, обусловленное структурой распознающих участков антител и рецепторов антигенов.

Т-лимфоциты – разновидность лимфоцитов, проходят дифференцировку в тимусе. Эффекторы клеточного иммунитета.

Хемотаксис – направленное движение клеток, обусловленное действием хемотаксических агентов.

Эпитоп (антигенная детерминанта) – часть молекулы антигена, обычно характеризующаяся структурной индивидуальностью, которая обусловливает специфичность антител и эффекторных Т-клеток, образующихся в процессе иммунного ответа.

Библиографический список.

1. Аллергология и иммунология: национальное руководство / Под ред. Хаитова Р.М., Ильиной Н.И. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2009. – 656 с. – (Серия «Национальное руководства»).

2. Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. Лолора-младшего Г., Фишера Т., Адельмана Д. Пер. с англ. – М.: Практика, 2000. – 806 с.

3. Система цитокинов: Теоретические и клинические аспекты / Под ред. Козлова В.А., Сенникова С.В.. – Новосибирск: Наука, 2004. – 324 с.

4. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Ярилин А.А. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы / Руководство для врачей. – М: ГОЭТАР-Медиа, 2009, – 352 с.

5. Хайдуков С.В., Зурочка А.В. Проточная цитометрия как современный метод анализа в биологии и медицине // Медицинская иммунология, 2007, Т. 9, N 4-5. с. 373-378.

6. Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина, 1999. – 607 с.

7. Ярцев М.Н., Яковлева К.П. Иммунная недостаточность: клинико-лабораторная оценка иммунитета у детей // Иммунология, 2005, N 1, с. 36-44.

30