Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО НГМУ Минздравсоцразвития)

Кафедра клинической иммунологии иммунологические методы исследования Учебное пособие для студентов 6 курса лечебного и педиатрического факультетов

Составил: доц. Сенникова Ю.А.

Новосибирск 2011

Содержание.

Предисловие……………………………………………………………….……………..2

Введение…………………………………………………………………………….…....3

1. Области использования иммунодиагностики…………………………………….....4

2. Иммунологические методы в диагностике заболеваний иммунной системы….…6

2.1. Количественное определение популяций лимфоцитов……….…………...…..8

2.1.1. Проточная цитометрия…………...………………………….…………….8

2.1.2. CD-классификация мембранных молекул иммунокомпетентных клеток……………………………………………………………………………………10

2.1.2. Маркеры активации лимфоцитов………………….…………………….10

2.2. Методы оценки функциональной активности лимфоцитов………………….12

2.2.1. Определение пролиферативной способности лимфоцитов……………12

2.2.2. Определение цитотоксической активности Т-лимфоцитов…...……...13

2.2.3. Оценка ГЗТ in vivo……………………………………………………….13

2.2.4. Оценка цитотоксической активности естественных киллеров………..14

2.2.5. Методы количественного определения иммуноглобулинов………….14

2.3. Методы исследования функций фагоцитов........................................................16

2.3.1. Методы определения хемотаксиса лейкоцитов……………..…………..17

2.3.2. Определение адгезивных свойств…………………………..……………17

2.3.3. Определение фагоцитарной способности……………….………………18

2.3.4. Оценка бактерицидной активности………………………………………18

2.4. Методы оценки системы комплемента…………………………………………19

3. Иммунологические методы, основанные на реакции антиген-антитело. ………20

3.1. Иммуноферментный анализ……………………………...…………………….21

3.2. Радиоиммунный анализ………………………………………………...……….22

3.3. Иммунофлюоресцентный анализ…………..…………………………………..22

4. Методы исследования цитокинов…………………………..………………………24

Заключение…………………………………………………………………………..….25Вопросы для самоконтроля ………………………………...………………………….25

Задания в тестовой форме……………………………………………………...………26

Словарь иммунологических терминов………………………………………………..29 Библиографический список…………………………………………………………....32

Предисловие.

Согласно определению ВОЗ клиническая иммунология – это клиническая и лабораторная дисциплина, занимающаяся изучением вопросов диагностики и лечения больных с различными заболеваниями и патологическими состояниями, в основе которых лежат иммунологические механизмы, а также состояниями, в терапии и профилактике которых иммуноактивные препараты играют ведущую роль. Обращает на себя внимание то, что иммунология – это и лабораторная дисциплина. Сложилось так, что иммунологические методы используются очень широко в различных областях медицины. Главным образом, это методы, основанные на иммунных реакциях (антиген+антитело, ГЗТ). Одной из задач клинической иммунологии в современной медицине является обогащение ее иммунологическими подходами к диагностике и лечению заболеваний.

Данное пособие адресовано студентам лечебного и педиатрического факультетов, изучающим клиническую иммунологию, в частности, при подготовке по разделу 2 «Оценка иммунного статуса. Иммунодиагностика», темы 2 «Методы оценки иммунного статуса и их клиническая интерпретация» учебно-методического плана. Пособие содержит развернутый систематизированный материал по данной теме, освещающий возможности современной иммунодиагностики, области использования иммунологических методов в различных областях клинической медицины, методологию иммунодиагностики основных заболеваний иммунной системы, основные иммунологические методы. Настоящее учебное пособие будет способствовать формированию представлений о принципах иммунодиагностики; приобретению знаний о показаниях для исследования иммунного статуса, количественных и функциональных тестах оценки Т-клеточного, В-клеточного иммунитета, НК-клеток, фагоцитоза, комплемента и их клинического значение, умений определять показания для исследования иммунного статуса, интерпретировать основные показатели иммунного статуса.

Изучение данного вопроса предполагает преемственность и базируется на знаниях, приобретенных студентами на младших курсах при изучении смежных дисциплин (микробиология, общая биология, и др.). В то же время, полученные студентами знания могут быть востребованы при изучении целого ряда других клинических дисциплин образовательной программы (гематология, трансплантология, онкология, инфекционные болезни и др.).

Настоящее пособие посвящено 2 и 3 разделам рабочей программы по дисциплине “клиническая иммунология”.

Введение.

Впервые методология иммунодиагностики заболеваний иммунной системы была разработана в нашей стране Р.В. Петровым и соавторами, опубликовавшими в 1984 г. методические рекомендации «Оценка иммунного статуса человека». В соответствии с этими методическими рекомендациями все методы иммунодиагностики разделены на тесты I и II уровней. Тесты I уровня направлены на идентификацию грубых поломок иммунной системы, т.е. первичных иммунодефицитов; тесты II уровня – на углубленное изучение функционального состояния иммунной системы. К тестам I уровня относят:

– определение функциональной активности фагоцитов;

– определение численности основных популяций и субпопуляций лимфоцитов;

– определение концентрации иммуноглобулинов в сыворотке крови.

К тестам  II  уровня относятся: – определение субпопуляций регуляторных Т-лимфоцитов; – тест торможения миграции лейкоцитов с использованием в качестве стимулятора ФГА (фитогемагглютинина); – оценка пролиферативной активности Т- и В- лимфоцитов на митогены, антигены, аллогенные клетки; – оценка активности киллерных лимфоцитов; – выявление циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК); – определение различных компонентов комплемента; – оценка различных этапов фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитов; – тесты по определению медиаторов иммунной системы, в том числе продукции и рецепции интерлейкинов; – анализ генов, ответственных за экспрессию иммунологически значимых молекул.

В пособии приведены современные принципы оценки состояния основных звеньев иммунной системы человека для диагностики нарушений иммунной системы при иммунопатологических состояниях. Представлен краткий обзор современных лабораторных методов, используемых в иммунологии. Также охарактеризованы возможности использования иммунологических методов в различных областях клинической медицины.