
- •Бактериологический метод диагностики
- •Основные принципы выделения и идентификации чистых культур бактерий
- •2. Состав некоторых питательных сред
- •Выделение чистой культуры аэробных бактерий
- •1. Методы, основанные на принципе механического разделения микроорганизмов. Техника посева.
- •2. Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
- •Ферментативная активность микроорганизмов
Модульная единица 2. Физиология и генетика микроорганизмов.
ЗАНЯТИЕ №4
«ФИЗИОЛОГИЯ МИКРОБОВ. МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР АЭРОБОВ. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ БАКТЕРИЙ»
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
изучить основные биологические свойства аэробов и основные принципы их культивирования
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Особенности метаболизма бактерий.
Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.
Питание бактерий.
Характеристика питательных сред.
Основные принципы культивирования аэробных бактерий.
Способы получения энергии.
Принципиальная схема лабораторной диагностики бактериальных инфекций
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
описать культуральные свойства;
идентифицировать микроорганизмы
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
О методах выделения и идентификации чистых культур аэробов.
Бактериологический метод диагностики
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТА
СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ
|
Органоиды клетки |
Функции |
1. |
Клеточная стенка
|
|
2. |
ЦПМ
|
|
3. |
Включения
|
|
4. |
Рибосомы
|
|
5. |
Липосомы
|
|
6. |
Нуклеоид
|
|
7. |
Жгутики
|
|
8. |
Капсула
|
|
9. |
Спора
|
|
10. |
Плазмиды
|
|
Микроэлементы_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Белки__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Нуклеиновые кислоты________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Липиды________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Углеводы_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ПИТАНИЕ БАКТЕРИЙ.
Автотрофы______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Гетеротрофы____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Сапрофиты______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Паразиты_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Способы проникновения веществ в бактериальную клетку_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ БАКТЕРИЙ:
Вода______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Микроэлементы____________________________________________________________________________________________________________________________________________
Макроэлементы_____________________________________________________________________________________________________________________________________________
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Работа № 1. Схема выделения и идентификации чистой культуры аэробов
Цель: разобрать и записать схему выделения и идентификации аэробов (под руководством преподавателя)
I
II
III
А)
*
IV
III
Ж)
)
Б)
Г)
Е)
В) Д)
Реакция агглютинации
I. Сбор исследуемого материала
II. Посев исследуемых микроорганизмов на простые, ДДС и элективные питательные
среды с целью получения изолированных колоний
III.Накопление чистой культуры на скошенной питательной среде
IV. Идентификация выделенной чистой культуры
А) изучение морфологических и тинкториальных свойств
Б) изучение культуральных свойств
В) изучение антигенной структуры возбудителя с помощью постановки реакции агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными сыворотками
Г) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на среды Гисса
Д) определение чувствительности микробов к антибиотикам, с помощью метода бумажных дисков
Е) проба с бактериофагами (реакция фаголизабельности) – метод стекающей капли по Отто для выявления вида возбудителя
Ж) биопроба на лабораторных животных – изучают клинику и патогенез заболевания
* проведение внутривидовой идентификации для выявления источников инфекции (фаготипирование)
Работа № 2 Питательные среды
Цель: создать представление о питательных средах.(см. теоретическую справку)
Требования, предъявляемые к питательным средам:
1.__________________________________________________________________________
2.__________________________________________________________________________
3.__________________________________________________________________________
4.__________________________________________________________________________
5.__________________________________________________________________________
Самостоятельная работа: классифицировать предложенные питательные среды. Результаты оформить в виде таблицы
среда |
происхождение |
консистенция |
Назначение | |||||||
|
Естеств. |
Искусств. |
жидкие |
полужидкие |
плотные |
общего |
ДДС |
Элективные | ||
Мясопептон ный агар (МПА) |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Мясопептонный Бульон (МПБ) |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Среда Эндо |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Кровяной агар |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Пептонная вода |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Среда Гиса |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Среда 199 |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Свернутая сыворотка |
|
|
|
|
|
|
|
| ||
Желточно солевой агар (ЖСА) |
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Характер роста бактерий на плотных питательных средах (дифференциально-диагностические признаки).
Цель: изучить характер роста бактерий на плотных питательных средах.
Самостоятельная работа: изучить культуральные свойства микроорганизмов на плотных средах.
Критерии |
Описание |
Характер роста |
Форма
|
|
|
Размер
|
|
|
Характер края
|
|
|
Пигмент (цвет)
|
|
|
Поверхность
|
|
|
Прозрачность
|
|
|
Структура
|
|
|
Консистенция
|
|
|
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 4. Характер роста бактерий на жидких питательных средах (дифференциально-диагностические признаки).
Цель: изучить характер роста бактерий на жидких питательных средах.
Самостоятельная работа: изучить особенности роста микроорганизмов, результат оформить в виде рисунка, сделать вывод.
Опыт №1 Опыт №2 Опыт №3
МПБ МПБ 1% пептонная вода
(кишечная палочка) (возбудитель сибирской язвы) (возбудитель холеры)
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 5. Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
Цель: ознакомиться с техникой посева на плотные и жидкие питательные среды и указать значение метода.
Самостоятельная работа: апробировать различные методы посевов:
Название |
Рисунок |
Значение |
Седиментации по Коху
|
|
|
Посев по Дригальскому
|
|
|
Посев по Шукевичу
|
|
|
Методом укола
|
|
|
Посев по МПБ
|
|
|
Вывод:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 6. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки).
а) Сахаролитическая и протеолитическая активность
Цель: изучить ферментативную активность микроорганизмов.
Самостоятельная работа: изучить ферментативную активность неизвестной культурырезультаты внести в таблицу, определить вид возбудителя, пользуясь таблицей «Биохимическая активность микробов».
БИОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МИКРОБОВ
Вид м/о
|
Сахаролитическая
|
Протеолитическая | ||||||
лактоза |
глюкоза |
мальтоза |
маннит |
сахароза |
индол |
Н2S | ||
|
|
|
|
|
|
|
|
Б) Каталазная активность аэробов
Цель: изучить каталазную активность микроорганизмов.
Самостоятельная работа: определить тип дыхания исследуемой культуры.
Результат:
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА
к Работе №1