Тема 6. Медицинская энзимология.

Актуальность темы.

Уменьшение концентрации или полное отсутствие какого-нибудь фермента в живой системе является результатом генетической неспособности к его биосинтезу и проявляется специфической патологией. В настоящее время известно около 150

таких энзимопатий (в обмене простых и сложных белков, в обмене углеводов, липидов и азотистых оснований).

Изменение активности ферментов в тканях может служить критерием биохимической диагностики, а изучение динамики этих изменений указывает на эффективность лечения.

Чистые ферменты и их смеси широко используются как лекарственные препараты в терапии, хирургии, офтальмологии и других областях медицины.

Цель и исходный уровень знаний.

Общая цель.

Объяснить изменения хода ферментативных процессов и накопления промежуточных продуктов метаболизма при врожденных (наследственных) и

приобретенных пороках метаболизма – энзимопатиях.

Конкретные цели:

1.Анализировать изменения активности индикаторных ферментов плазмы крови при патологии определенных органов и тканей.

2.Объяснить применение ферментных препаратов и ингибиторов ферментов как фармакологических препаратов при определенных патологических состояниях.

Исходный уровень знаний-умений:

1.Знать строение глутарата, пирувата и α-аминокислот.

2.Знать принцип колориметрии и порядок работы на ФЕК.

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке.

14

Индивидуальная самостоятельная работа студентов.

Подготовить реферативное сообщение по теме:

1.Энзимопатология.

2.Энзимодиагностика заболеваний миокарда, печени.

3.Энзимотерапия.

Алгоритм лабораторной работы.

Количественное определение активности АсАТ и АлАТ в сыворотке крови.

Принцип метода: определяется оптическая плотность раствора гидразона

кетоглутарата и пирувата, которые образуются при взаимодействии аланина (или аспартата) с кетоглутаратом. Определение проводят в 1 см кювете при длине волны λ

– 500-530 нм. При определении АсАТ – пируват образуется путем декарбоксилирования оксалоацетата.

Реактивы:

1.Эталонные 2 мМ раствора пирувата.

2.1 мМ раствор 2,4-динитрофенилгидразина в 1 М НCl.

3.Раствор NаОН (16 ч. в 1000 мл Н2О).

4.Субстрат АсАТ: а) 0,1 мМ раствор аспартата;

б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата;

в) фосфатный буфер рН-7,4. 5. Субстрат АлАТ: а) 0,2 мМ раствор аланина;

б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата; в) фосфатный буфер рН-7,4.

Определение активности АсАТ.

15