Гистология книги2 / Репин В.С., Ржанинова А.А. - Эмбриональные стволовые клетки
.pdf.
.
.
.
(
).
Hand1 ,
(Fan Y., Melhem M., Chaillet R.,1999).
.
(Odorico J.S., Kaufman D.S., Thomson J.A., 2001).
8 ,
-, - . ,
TGF-beta ,
, bFGF, EGF, BMP-4 -
. HGF NGF.
7. in vitro
. ,
.
( ).
,
. NTERA2,
.
61
,
, . ( . www.biolayton.com).
1996 (Weiss M., Orkin S.D., 1996).
F9 P19
(
). ,
.
IL-3 . ,
: IL-3, SCF, bFGF, IGF-1, IL-6, GCSF.
in situ
, (Odorico J.S., Kaufman D.S., Thomson J.A., 2001).
)
.
ID – (Nogieira M.M., MitjavilaGarcia M.T., LePasteur F. et al., 2000). « »
,
(Reubinoff B.M., Pera M.F., Fong C. et al., 2000).
in vitro
: 1) LIF 2)
.
.
, :
.
de novo ( ).
(sprouting) .
.
62
, ,
, in situ.
« »
in viro,
(Wang S., Gaerhart J.D., 2000).
1-10
.
" ",
. , ,
Hox-B4,
in vitro.
63
|
, |
|
|
|
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in |
vitro |
|
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( |
in |
situ). |
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|
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|
|
||||
|
|
|
|
|
|||||
- .
.
,
.
, .
(Inamdar M., Roch T., Rapoport R. t al., 1997).
, ,
(CD 19, CD24, CD117, CD45R+). C
V,D, J .
FLt3 (Cho S.K., Webber T.D., Carlyle J. et al.,1999)
in vitro LIF .
100 1% (FCS).
: -6 SHH. SHH
. -6
.
NT2 80%
10
6 ( BioLayton).
, + .
,
64
10-30 %.
. ,
,
.
, , ,
, .).
.
in vitro . ,
in vitro Wnt-13.
.
.
,
. "software"
. , « -
» .
.
0,5
(
bFGF). master-genes (NeuroD, Hu, NeuN, p21), (BDNF, NT-3, NGF)
" " . BMP-2 BMP-4 . ,
in vitro ,
in situ.
65
,
( ),
.
,
( ) (Tropepe V., Hiftoshi S., Sirard C. et al., 2001).
: polysyalated-NCAM -
; , -
. - glial fibrillar acidic protein (GFAP) – ,
(Alvarez-Buyilla, 2000). ,
, in situ.
1 .
1 ,
, polysyalated-NCAM. 1
, -6.
,
-2, NeuN, betaIII-tubulin. -
, .
.
(Brustle O, Jones K, Lerish R, et al., 1999; Liu S., Qu Y., Stewart T.J. et al., 2000).
(SAGE)
( ) :
, .
( , G- ,
, , ). 588
. SAGE ,
66
18 " "
, . , 61 " ".
,
2.5 . ,
, ,
« »
.
, ,
(Kelly, Rizzino, 2000)
( ). ,
( ,
) .
Crypto. ,
founder cells . Crypto- /- .
. ,
, ,
(Doevendans P.A., Kubalak S.W., An R.H. et al, 2000; Kehat I. et al., 2001 ).
( ,
, , , )
.
( 10T1/2) (Dani C., Smith A.G., Dessolin S., et al, 1997).
(E14TG2a, CGR8, ZIN40)
,
.
,
67
( 30-60 % ). ,
, ,
, « »
« »
Brachyury, Zeta-globin, Nkx5-2, . ,
« » , ,
, ,
(Dani C., Smith A.G., Dessolin S. et al., 1997) .
( ),
, , 3 ( )
.
.
,
.
.
, ,
. ,
.
15% FSC (HyClone).
, ,
.
-2, -4 TGF-beta. ,
|
Sox-9, Pax-1 – |
. |
|
scleraxis II .
- (Kramer J., Hegert C., Guan K. t
68
al., 2000). |
, , - |
|
|
|
|
. , ,
,
7-15 . ,
.
, ,
: 1)
2)
,
.
. ,
in vitro.
« ».
, , ,
.
,
,
.
,
, |
|
in situ. |
|
, |
|
, |
, |
« »
. ,
» in vitro -
,
. ,
« »,
.
69
. ,
(Wernig M., Brustle O., 2002). ,
, .
.
8.
,
, , |
|
|
|
|
. |
|
|
,
) . ,
4
. -
-1 ( ) -2 ( ),
-1, -2 (Vieille-Grosjean I., Roullot V., Courtis G.,1992)
.
, ).
–
. « » ,
70