Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

296 Экспрессия генетического материала

Рис. 18.5. Получение гибридной клеточной линии человек - грызун. Человеческие клетки, в данном случае лейкоциты, смешиваются с клетками выбранной линии грызуна в присутствии вируса Сендай. Сначала формируются клетки с двумя ядрами, дикарионы. При слиянии ядер образуются одноядерные гибридные клетки, синкарионы. Если клетки переносятся на селективную среду, то вырастают только гибридные линии. Например, если реципиентная линия клеток грызуна несет ауксотрофность по глицину, используют селективную среду, не содержащую этой аминокислоты. Неслившиеся лейкоциты человека также неспособны пролиферировать в культуре клеток. Каждая выросшая колония клеток содержит полный геном реципиентной клеточной линии грызуна и несколько донорских хромосом человека.

также могут слиться с образованием синкариона, содержащего хромо» сомы обоих родителей. По непонятным причинам в течение нескольких первых делений гибридной клетки происходит быстрая потеря хромосом одного из объединяемых видов. У клеточных гибридов мышь—хомячок происходит утрата хромосом мыши. У гибридов клеток мыши и человека утрачиваются хромосомы человека. Обычно через 30 поколений гибридная клеточная линия мышь—человек содержит полный хромосомный набор мыши и только семь человеческих хромосом. Эта цифра является средней, некоторые клетки содержат только одну-две пары человеческих хромосом, тогда как другие-до 20 (рис. 18.5). Одна клеточная линия, хромосомы которой утрачиваются после слияния, называется донорной, а другая - реципиентной.

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

18. Генетика соматических клеток: картирование генома 297

Таблица 18.1. Схема, иллюстрирующая процесс соотнесения генов и хромосом человека; « + » и « — » отражают присутствие или отсутствие исследуемого фермента (верхние три ряда) или хромосомы (нижние четыре ряда)
Гибридные линии клеток
	I	II	III	IV	V VI
Экспрессирующиеся гены
LDHA	+	+	—	+	+ -
GALK	-	+	+	+	- —
ТК	—	+	+	+	— —
Присутствующие хромосомы
11	+	+	—	+	+ —
15	+	—	+	-	1 _
16	+	+	-	-	- +
17	—	+	+	+	— —

Вариабельность потери хромосом человека у клеточных гибридов мышь—человек облегчает картирование человеческих генов. Для картирования генов мыши используют клеточные гибриды мышь—хомячок. Если присутствие продукта изучаемого гена коррелирует с наличием какой-либо одной хромосомы в гибриде, то этот ген, скорее всего, локализован в этой хромосоме. Должны соблюдаться два условия. Вопервых, исследуемый признак, кодируемый хромосомами человека, должен четко (на клеточном уровне) отличаться от аналогичного признака мыши. Например, исследуемая линия клеток человека содержит мутантную лактатдегидрогеназу A (LDH-A). Этот фермент отличается от белка, кодируемого соответствующим мышиным геном. Эти две формы легко разделяются при гель-электрофорезе. Второе условие, необходимое для картирования, - возможность идентификации данной человеческой хромосомы, присутствующей в исследуемой клеточной линии.

Способ отнесения изучаемого локуса к определенной хромосоме проиллюстрирован данными табл. 18.1. Лактатдегидрогеназа человеческого типа присутствовала в клетках гибридных линий I, II, IV и V. Во всех этих линиях была только одна общая человеческая хромосома, хромосома II. Таким образом, очевидно, что локус дегидрогеназы расположен на этой хромосоме.

Сцепление генов в соматических клетках предложено называть синтенией, от греческого «син» - совместно, «тени» - поддерживать. Этот термин введен для того, чтобы отличать данные о хромосомной локализации, полученные в опытах с соматическими клетками, от результатов по сцеплению генов, полученных при анализе родословных. Если два гена присутствуют или оба отсутствуют в гибридных клеточных линиях, то они называются синтеничными. Из результатов, приведенных в табл. 18.1, следует, что гены ТК и GALK синтеничны. Оба этих гена локализованы в семнадцатой хромосоме.