2.3.5 Определение содержания пектиновых веществ Приборы: колбы вместимостью 500 мл, воронки для фильтрования,сушильный шкаф.

Реактивы:0,1 н раствор NaOH, 1 н раствор уксусной кислоты, 2 н CaCl.

Проведение анализа: К 100 мл экстракта (разбавленного дистиллированной водой: 10 мл экстракта и 90 мл воды), приливают 100 мл 0,1 н раствора NaOH. Полученную смесь оставляют при 20 - 25 °С на 5 - 7 часов, после чего к смеси добавляют 50 мл 1 н раствора уксусной кислоты и 50 мл 2 н раствора. Смесь оставляют на один час, затем кипятят 5 минут. Осадок пектата кальция отфильтровывают через предварительно взвешенный сухой фильтр, промывают водой, высушивают при 100 °С до постоянной массы. Содержание пектина x (в г на 100 мл) рассчитывают по формуле:

(6)

где m – масса осадка пектата, г;

0,92 – коэффициент перевода пектата кальция в пектин;

– колличество экстракта, взятое на анализ, мл;

2.3.6 Определение рН 1%-ного раствора пектина

Порошок пектина (1 г) растворяют при перемешивании в 100 мл дистиллированной воды. Полученную смесь нагревают в течение 10...15 мин. при температуре от 50 до 60°С. Раствор декантируют от нерастворимого остатка и определяют рН потенциометром с применением стеклянного или хингидронного электрода [17].

2.3.7 Определение массовой доли пектовой кислоты

Навеску пектина массой от 0,05 до 0,08 г растворяют в 20 мл дистиллированной воды со льдом и ставят на 2...3 ч для набухания и растворения пектина. Затем раствор пектина нейтрализуют по фенолфталеину, добавляя 1 мл 10%-ной соляной кислоты. В полученный раствор по каплям добавляют от 80 до 85 мл 96%-ного этилового спирта, энергично перемешивая. Через 1...2 ч образовавшийся осадок пектиновых веществ количественно переносят на плотный бумажный фильтр, промывают три раза водно-спиртовым раствором (четыре части 96%-ного спирта и одна часть воды) и один раз 96%-ным спиртом, не давая осадку высохнуть на фильтре.

Осадок количественно смывают с фильтра горячей водой в стакан вместимостью 500 мл, а фильтр помещают в отдельный стакан и промывают 2, 3 раза горячей водой. Промывные воды собирают в стакан вместимостью 500 мл, куда был смыт осадок пектина, причем количество промывной жидкости не должно превышать 200 мл. Содержимое стакана нейтрализуют по фенолфталеину 0,1 Н раствором гидроокиси натрия до слабо-розового окрашивания. Для гидролиза пектина добавляют 20 мл 0,5 Н раствора гидроокиси натрия и оставляют на 15...20 ч. Затем раствор нагревают до температуры 50...60°С и фильтруют через плотный бумажный фильтр. По окончании фильтрации фильтр промывают несколько раз горячей водой, присоединяя промывные воды к первому фильтрату. Общее количество жидкости должно быть от 275 до 300 мл. К фильтрату добавляют 50 мл 1 Н уксусной кислоты, 50 мл хлористого кальция (2 Н), перемешивают и ставят на 1 ч, после чего смесь кипятят в течение 5 мин и фильтруют через высушенный до постоянной массы и взвешенный беззольный фильтр. Осадок на фильтре промывают кипящей водой до отрицательной реакции на ион хлора (проверка по реакции Сl- с азотнокислым серебром). Затем осадок промывают 96%-ным этиловым спиртом. Фильтр с осадком высушивают в сушильном шкафу до постоянной массы.

Содержание пектовой кислоты (Пк, %) рассчитывают по формуле:

(7)

где – масса бюкса с осадком после сушки, г;

– навеска пектина, г;

0,92 – коэффициент пересчета пектата кальция на пектовую кислоту [17].

2.3.8 Определение массовой доли балластных веществ

Навеску пектина массой от 3 до 4 г помещают в коническую колбу, заливают подкисленным спиртом (100 мл 70 %-ного этилового спирта и 5 мл концентрированной соляной кислоты) и перемешивают 15 мин. Затем смесь переносят количественно на стеклянный фильтр № 2 и промывают подкисленным спиртом до отрицательной реакции на ионы кальция (с оксалатом аммония) и ионы алюминия (с ализарином).

Осадок промывают чистым 75 %-ным спиртом до отрицательной реакции на ион хлора (с азотнокислым серебром), затем чистым 96 %-ным спиртом и высушивают в сушильном шкафу при температуре от 80 до 85 °С до постоянной массы.

Количество балластных веществ (Б, %) рассчитывают по формуле:

Б=,

(8)

где Gn – масса пектина после промывки спиртом, г. [17].

2.3.9 Определение массовой доли ацетильных групп

Навеску пектина (1,0 г) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 25 мл 0,6%-ного раствора NaOH и оставляют на 6-8 ч. Затем содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой. Отбирают 20 мл раствора в перегонную колбу, добавляют 20 мл раствора MgS04 (100 г MgS04 растворяют в воде до 180 мл и добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты).

Дистилляцию проводят, в установке, состоящей из двухгорлой колбы с дистиллятом и отводящим шлангом. Шланг соединяется с круглодонной колбой с дистиллированной водой и шлангом для вывода пара. К двухгорлой колбе присоединяют холодильник для перегонки. Колбы нагревают на горелке, пока объем перегнанного дистиллята не составит 10 мл.. Отбирают 1 мл дистиллята и титруют в присутствии фенолфталеина 0,1 Н раствором NaOH.

Параллельно проводят холостой опыт с 20 мл раствора и 20 мл дистиллированной воды. Разница между титрованиями соответствует количеству ацетильных групп в порошке пектина (Ац, %), содержание которых рассчитывают по формуле:

(9)

где С – разность между количеством 0,1 Н раствора NaOH, израсходованного на титрование в опыте с навеской и в холостом опыте, мл;

43,04 – эквивалентная масса ацетильных групп [18].

2.3.10 Определение массовой доли свободных и метоксилированных карбоксильных групп

Водный раствор полисахарида потенциометрически или кондуктометрически титруют 0,1 Н раствором гидроксида натрия (определение свободных карбоксильных групп). К оттитрованному раствору полисахарида приливают 0,1 Н раствора гидроксида натрия и оставляют раствор на 24 ч при комнатной температуре для полного омыления сложноэфирных групп, после чего раствор титруют 0,1 Н раствором соляной кислоты. Затем к оттитрованному раствору полисахарида приливают 0,1 Н раствора соляной кислоты, нагревают 10 мин на кипящей водяной бане, охлаждают, фильтруют, промывают осадок на фильтре водой до отрицательной реакции промывных вод на кислоты, после чего осадок полиуроновой кислоты количественно переносят в стакан с помощью 0,1 Н раствора гидроксида натрия и в течение 30 мин при периодическом перемешивании растворяют. Затем полученный раствор титруют 0,1 Н раствором соляной кислоты.

Массовую долю свободных карбоксильных групп (, %) пектина определяют по формуле: