Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Скачиваний:
175
Добавлен:
13.02.2016
Размер:
54.78 Кб
Скачать

Министерство здравоохранения Республики Беларусь

Учреждение образования

«Гомельский государственный медицинский университет»

Кафедра биохимии

Обсуждено на заседании кафедры биохимии

Протокол № _10___от 2006______

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА

Для проведения занятия со студентами

2-го курса лечебного факультета по

биохимии

Тема: Введение в биохимию. Современные методы исследования. Строение и функции белков

Время 3 часа

1. УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: сформировать представление о биохимии как фундаментальной медико-биологической науке. Изучить структуру и физико-химические свойства белков. Научиться определять содержание общего белка в плазме крови биуретовым методом.

ТРЕБОВАНИЯ К ИСХОДНОМУ УРОВНЮ ЗНАНИЙ

1.1 Основные правила техники безопасности при работе в химической лаборатории.

1.2 Строение и классификацию альфа-аминокислот.

1.3 Кислотно-основные свойства аминокислот. Реакции на их функциональные группы.

1.4 Уровни структурной организации белка.

1.5 Особенности строения пептидной связи.

1.6 Качественные реакции на белки и пептиды.

1.7 Комплексные соединения (комплекс меди в биуретовой реакции).

В результате проведения занятия студент должен:

1) Знать строение и функции белков. Современные методы исследования.

2) Уметь строить ди-, три-, тетра- и пентапептиды.

2. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИЗ СМЕЖНЫХ ДИСЦИПЛИН

2.1 Классификация, строение и свойства аминокислот (биоорганическая химия).

2.2 Роль аминокислот в обмене веществ организма (физиология).

3. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ

3.1 Введение в биохимию. Краткая история биохимии. История отечественной биохимии. Общая характеристика обмена веществ. Понятие об анаболизме, катаболизме и метаболизме. Значение биохимии для врача.

3.2 Характеристика основных биохимических методов, используемых в эксперименте и клинике:

а) на уровне целого организма:

  • наблюдение за организмом:

- при удалении органа;

- изменении диеты (голодание или усиленное питание);

- приеме лекарств;

- введении специфических ядов и токсинов;

  • наблюдения за человеком и животными со специфическими заболеваниями;

  • использование ЯМР-спектроскопии и др.;

б) перфузия изолированного органа;

в) использование тканевых срезов;

г) использование целых клеток;

д) использование гомогенатов;

е) выделение изолированных клеточных органелл;

ж) метод субфракционирования клеточных органелл;

з) выделение метаболитов и ферментов;

и) клонирование генов, кодирующих ферменты и другие белки.

3.3 Белки – важнейшие компоненты организма. Функции белков, строение, классификация и свойства аминокислот. Обзор уровней структурной организации белковой молекулы. Молекулярная масса белков. Форма и размеры белковой молекулы.

4. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ ЗАНЯТИЯ

4.1 Лабораторная работа №1 «Инструктаж по технике безопасности»

4.2 Лабораторная работа №2 «Применение Международной системы единиц (СИ) в международной лабораторной практике»

4.3 Лабораторная работа №3 «Количественное определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (УИРС) »

Лабораторные работы выполняются согласно учебно – методическому пособию « Практическая биохимия », часть 1, 2003 год, Грицук А. И. с 6 – 7.

5. ХОД ЗАНЯТИЯ

5.1 Лабораторные работы №1 и №2 выполняются по соответствующим инструкциям

5.2 Лабораторная работа №3 «Количественное определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (УИРС)»

ВНИМАНИЕ! Соблюдать меры безопасности при работе с гидроксидом натрия.

Принцип метода. В щелочной среде пептидные связи белка образуют с ионами двухвалентной меди комплекс фиолетового цвета. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации белка, определяемой фотометрически.

Ход работы. В пробирку наливают 0,05 мл сыворотки крови, затем добавляют 2,5 мл биуретового реактива. Содержимое пробирки осторожно перемешивают, избегая пенообразования, и через 30 мин фотометрируют в кюветах 5 мм при 540 нм (зеленый светофильтр) против контрольного раствора (дистиллированная вода). Измерив экстинкцию исследуемого раствора, по калибровочной кривой определяют концентрацию белка.

Клинико-диагностическое значение. Нормальное содержание белка в сыворотке крови у взрослых людей – 65–85 г/л, у детей – 58–85 г/л.

Повышенное содержание белка в сыворотке крови (гиперпротеинемия) встречается редко. Это наблюдается при ревматизме, миеломной болезни. Кратковременная относительная гиперпротеинемия отмечается при сгущении крови из-за значительных потерь жидкости, например, при усиленном потоотделении, неукротимой рвоте, профузных поносах, несахарном диабете, холере, тяжелых ожогах.

Снижение уровня белка в крови (гипопротеинемия) наблюдается при нефритах, злокачественных опухолях, длительном голодании и др.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагно­стическую оценку.

6. ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ ЗНАНИЙ

6.1 Рассмотрите указанные группы аминокислот и отметьте, какие из них являются гидрофобными: а) тир, асп, глу; б) ала, лиз, сер; в) иле, лей, лиз; г) вал, лей, ала; д) арг, гли, цис?

6.2 Многие белки, содержащие 2 и более доменов, обнаруживают гомологию аминокислот. Эти белки образуются путем: а) посттрансляционной модификации (процессинга); б) генетических изменений; в) дупликации генов и их слияния; г) аллостерической кооперации; д) транспептидных образований.

6.3 Остатки каких аминокислот в белках-гликопротеидах ковалентно связывают углеводы? Напишите пентапептид с этими аминокислотами (-ала-X-трп-Y-гли), где X и Y – названные аминокислоты.

6.4 Остатки каких аминокислот в белках-гистонах обладают положительным зарядом? Напишите пентапептид с этими аминокислотами (-ала-X-мет-Y-гли), где X и Y ‑ названные аминокислоты.

6.5 Из приведенных обозначений аминокислот

Асп-Асн-Глн-Сер-Глу-Вал-Тир-Лиз-Гис-Гли-Ала

а б в г д е ж з и к л

6.6 выберите и напишите формулы тех из них, которые:

а) могут образовывать водородные связи; б) могут участвовать в гидрофобных взаимодействиях; в) остальные.

7. ЛИТЕРАТУРА

Основная

7.1 Материал лекций.

7.2 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1998. С. 19–77.

7.3 Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. С. 11–61.

Дополнительная

7.4 Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 2004. Т. 1. С. 9–51.

7.5 Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Флинта, 1999. С. 23–95.

7.6 Ленинджер А. Л. Основы биохимии. М.: Мир, 1985. Т. 1. С. 107–225.

7.7 Тюкавкина Н. А., Бауков Ю. И. Биоорганическая химия. М.: Медицина, 1991. С. 313–376.

7.8 Албертс Б. и др. Молекулярная биология клетки, М.: Мир, 1994. Т. 1. С. 113–171.

Методическую разработку составила ассистент кафедры биохимии

Яськова Н. С.

Дата

Соседние файлы в папке Ферменты