2. Классификация и маркировка объективов микроскопов
. По степени скомпенсированности хроматической аберрации объективы подразделяются на монохроматы(Monochromat – для одной длины волны или узкой полосы спектра), ахроматы (Achromat – основная и две дополнительных длин волны) и апохроматы (Apochromat – основная и три дополнительных длины волны).
Кроме степени коррекции световых аберраций, объективы могут классифицироваться на объективы проходящего и отраженного света. Объективы проходящего света рассчитаны на постоянное применение покровных стекол (0,17 мм).
Объективы отраженного света – с приставкой «Epi» - имеют просветляющее покрытие для предотвращения бликов.
Предназначенные для работы с флуоресценцией объективы изготавливаются с применением специальных стекол с очень высоким коэффициентом пропускания в ближней ультрафиолетовой области. В название таких объективов включается слово «Fluar».
На каждом объективе нанесена маркировка, указывающая класс объектива, увеличение, числовую апертуру и тип иммерсионной среды, типы используемых контрастов (например, фазовый контраст), возможность корректировки с учетом толщины покровного стекла, тип оптики (оптика «на бесконечность») и другая необходимая информация.
Иммерсионная система.
Иммерсия в оптической микроскопии — это введение между объективом микроскопа и рассматриваемым предметом жидкости для усиления яркости и расширения пределов увеличения изображения. Применение иммерсии даёт возможность повысить а разрешающую способность микроскопа.
В качестве иммерсионных жидкостей применяются:
Кедровое или минеральное масло (показатель преломления 1,515)
Водный раствор глицерина (1,434)
Физиологический раствор (1,3346)
Вода (1,3329)
Монобромнафталин (1,656)
Вазелиновое масло (1,503)
Йодистый метилен (1,741)
3. Счетные камеры
КАМЕРЫ СЧЁТНЫЕ - приборы для подсчета форменных элементов крови, мочи и цереброспинальной жидкости, а также микроорганизмов. Представляют собой пластину из толстого стекла с углублением, на дне к-рого выгравирована счетная сетка. Углубление накрывают шлифованным покровным стеклом. Постоянная высота К. с. обеспечивается плотным притиранием покровного стекла к пластине до образования радужных ньютоновых колец. Счетная сетка состоит из больших и малых квадратов. Выделяют сетки различных типов - Тома, Бюркера, Предтеченского, Горяева, Фукса-Розенталя и др.; они различаются группировкой больших и малых квадратов. Высота камеры, площадь сетки и ее делений и разведение взятой для исследования крови позволяют подсчитать с помощью светового микроскопа количество форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов) в определенном объеме крови или другой среды. В клин, практике обычно пользуются счетной камерой Горяева. Сетка камеры Горяева состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 расчерчены вертикальными и горизонтальными линиями на 16 малых квадратов. Эритроциты считают в 5 больших (80 малых) квадратах, расположенных по диагонали (в 1 мкл крови при разведении в 200 раз). Полученное при этом число умножают на 10000. Лейкоциты подсчитывают при разведении крови в 20 раз в 100 больших (1600 малых) квадратах. Полученное число умножают на 50.
Определение общего количества клеток в цереброспинальной жидкости лучше производить в камере Фукса-Розенталя.
Клетки подсчитывают в 256 малых (16 больших) квадратах. Полученное число делят на 3. Определение количества форменных элементов в моче производят в камерах Фукса-Розенталя или Горяева.