7. Иммунологические методы.

Методы основаны на изучении антигенного состава клеток и жидкостей организма - крови, слюны, желудочного сока. Чаще всего используют антигены эритроцитов, лейкоцитов, а также белков крови. Различные виды антигенов эритроцитов образуют системы групп крови - АВ0, Rh - фактор. Знание особенностей иммуногенетики крови необходимо при переливании крови.

8. Онтогенетический метод.

Онтогенетический метод позволяет изучать закономерности проявления признаков в процессе развития. Целью метода является ранняя диагностика и профилактика наследственных заболеваний. Метод основан на биохимических, цитогенетических и иммунологических методах. На ранних стадиях постнатального онтогенеза проявляются такие заболевания как фенилкетонурия, галактоземия, Витамин -Д- резистентный рахит, своевременная диагностика которых способствует профилактическим мероприятиям, снижающих патологию заболеваний. Такие заболевания как сахарный диабет, подагра, алкаптонурия проявляются на более поздних стадиях онтогенеза. Особое значение метод имеет при изучении активности генов, находящихся в гетерозиготном состоянии, что позволяет выявлять рецессивные сцепленные с Х-хромосомой заболевания. Гетерозиготное носительство выявляется с помощью изучения симптомов заболевания (при анофтальмии - уменьшение глазных яблок); с помощью нагрузочных тестов (повышенное содержание фенилаланина в крови у больных фенилкетонурией); с помощью микроскопического исследования клеток крови тканей (скопление гликогена при гликогенозах); с помощью прямого определения активности генов.

9. Метод генетики соматических клеток.

Основан на изучении наследственного материала в клонах клеток из тканей, выращенных вне организма на питательных средах. В этом случае можно получить гены в чистом виде, получить клетки-гибриды. Это позволяет провести анализ сцепления генов и их локализацию, механизмы взаимодействия генов, регуляции активности генов, генные мутации.

Использование методов антропогенетики позволяет своевременно установить диагноз наследственного заболевания.

Вопрос 3

Пренатальная диагностика связана с задачами предупреждения рождения ребенка с патологией, не поддающейся лечению. На современном уровне развития такой диагностики можно установить диагноз всех хромосомных болезней, большинства врожденных пороков развития, энзимопатий, при которых известен биохимический дефект. Часть из них можно установить практически в любом сроке беременности (хромосомные болезни), часть - после 12й недели (пороки конечностей, атрезии, анэнцефалии), часть - только во второй половине беременности (пороки сердца, почек).

Показания для пренатальной диагностики:

1. наличие в семье точно установленного наследственного заболевания;

2. возраст матери старше 37 лет;

3. носительство матерью гена Х-сцепленного рецессивного заболевания;

4. наличие в анамнезе у беременных спонтанных абортов в ранние сроки беременности, мертворождений, детей с пороками развития и хромосомной патологией;

5. наличие структурных перестроек хромосом у одного из родителей;

6. гетерозиготность обоих родителей по одной паре аллелей при патологии с аутосомно-рецессивным типом наследования;

7. беременные из зоны повышенного радиационного фона.

В настоящее время применяют непрямые и прямые методы пренатальной диагностики. При непрямых методах исследуют беременную (сыворотку крови на альфа-фетопротеин). При прямых методах исследуют плод. Существуют прямые без хирургического вмешательства методы, например ультрасонография (эхография) и прямые с нарушением целостности тканей - хорионбиопсия, амниоцентез и фетокоспия.

Методы определения альфа-фетопротеина (АФП) в амниотической жидкости и сыворотке крови беременной женщины позволяет диагностировать некоторые серьезные пороки развития плода (открытые дефекты невральной трубки, анэнцефалия, врожденные дефекты кожи, при которых его содержание значительно повышается. В случаях хромосомных болезней, напротив, концентрация АФП снижается. Повышение его содержания обусловлено поступлением этого белка из сыворотки крови плода через плаценту. АФП продуцируется только клетками плода. Тест информативен на 16-18 неделе беременности. Уровень АФП определяют радиоиммунологическим и иммуноферментным методами с использованием диагностических наборов. АФП обнаруживается в амниотической жидкости уже на 6-й неделе беременности и составляет 1, 5 мкг\мл.; наиболее высокая концентрация - на 12-14 неделе беременности - 30 мкг\мл, на 20-й неделе резко снижается до 10 мкг\мл. На 16-18 неделе 31-44мкг\мл.

Метод ультрасонография (эхография) - это использование ультразвука для получения изображения плода и его оболочек. Метод безопасен, продолжительность исследования не ограничена. Высокочастотные звуковые волны проникают через ткани организма и отражаются от границ сред с различными акустическими свойствами. Ультразвук не проникает через костную ткань и полые органы, заполненные воздухом. Начиная с 5-й недели беременности можно получить изображение оболочек эмбриона, а с 7-й недели - и его самого. К концу 6-й недели регистрируется сердечная деятельность. Впервые два месяца исследование выявляет жизнеспособность плода, аномалии не выявляются. На 2-ом триместре (12-20 недель) возможна диагностика близнецовой беременности, локализация плаценты, анэнцефалии, дефектов костной системы, невральной трубки, желудочно-кишечного тракта.

Хорионбиопсия - взятие эпителия ворсинок хориона для исследования. Проводится на 8-10 неделе беременности. Полученную ткань используют для цитогенетических и биохимических исследований и анализа ДНК. Выявляются все виды мутаций (генные, хромосомные, геномные).

Амниоцентез - получение амниотической жидкости и клеток плода для последующего анализа. Пункцию проводят на 15-17 неделе беременности через брюшину под контролем ультразвукового обследования. Жидкость используют для биохимических исследований (генные мутации), а клетки для анализа ДНК (генные мутации), цитогенетического анализа и выявление полового хроматина (геномные и хромосомные мутации).

Фетоскопия - осмотр плода фиброоптическим эндоскопом введенным в амниотическую полость через брюшную стенку матки. Метод позволяет осмотреть плод, пуповину, плаценту, произвести биопсию. Сопровождается высоким риском прерывания беременности, имеет ограниченное применение.