§ 4. Влияние подкисленной воды и подкисленного спирта на извлечение примесей, переходящих в вытяжки из биологического материала

При изолировании ядовитых веществподкисленнойводойили подкисленнымэтиловым спиртомв вытяжки из биологического материала совместно с ядовитымивеществамипереходят примесибелков, продуктов ихгидролиза(пептидов, аминокислот),липидови ряда других соединений.

Состав и количественное содержание примесей, переходящих в вытяжки, зависят от состава и степени гнилостного разложения биологического материала, от природы извлекающей жидкости, рН среды и от некоторых других факторов.

Из биологического материала в подкисленную водусовместно с ядовитымивеществамипереходят примеси белковыхвеществ(главным образом альбуминов), некоторыхаминокислоти других соединений. Известно, что вдистиллированной водебелковыевеществарастворяются в незначительных количествах. От прибавления кводекислот или основанийрастворимостьбелковыхвеществповышается. Таким образом, подкислениеводы, применяемой для изолирования ядовитыхвеществ, способствует увеличению количества белковыхвеществв вытяжках из биологического материала.Гидратациямолекулбелковыхвеществтакже повышает ихрастворимостьвводе. В результатегидратациимолекулнекоторых белковыхвеществони содержат «связанную»воду, которая иногда составляет 30—50 % их массы. Гидратированныемолекулыбелковыхвеществлегче переходят в водныерастворы, чем негидратированные.

В подкисленную водупереходят и отдельныеаминокислоты, являющиеся продуктамигидролизабелковыхвеществв трупах. Некоторые из этихаминокислотрастворяются в подкисленнойводе. С увеличением длины углеродной цепи вмолекулахаминокислотрастворимостьих вводепонижается, арастворимостьвэтиловом спиртеповышается. Поэтому в кислые водные вытяжки из биологического материала в основном переходятаминокислоты, имеющие относительно короткую цепь углеродныхатомов.

Липиды, в виду их нерастворимости вводе, практически не переходят в кислые водные вытяжки из биологического материала. В подкисленныйэтиловый спиртиз биологического материала в основном переходятлипиды, часть белковыхвеществ, некоторыеаминокислотыи другие примеси.

К липидамотносится группавеществ, содержащихся вклеткахорганизмаи растворяющихся в органическихрастворителях(этиловомспирте,диэтиловом эфире,хлороформеи др.).Липидыпрактически не растворяются вводе. К числулипидовотносятся:жиры, жирные кислоты,воски, алифатическиеспирты, фосфогли-цериды, липопротеиды,холестерини ряд другихвеществ.

За небольшим исключением белковые веществане растворяются вэтиловом спирте. Под влияниемэтилового спиртаи других органическихрастворителей, смешивающихся сводой(метиловыйспирт,ацетони др.), происходитденатурациябелков. От прибавленияэтилового спиртак биологическому материалу понижается степеньгидратациибелковыхвеществ, уменьшается ихрастворимость.

Растворимостьбелковыхвеществи ихосаждениев значительной степени зависят от диэлектрической проницаемостирастворителей. Диэлектрическая проницаемостьэтилового спирта(D = 24) ниже, чем уводы(D = 80). При понижении диэлектрической проницаемостирастворителейсилы притяжения междумолекуламирастворенныхвеществвозрастают. В результате этого под влияниемэтилового спиртапроисходит агрегациямолекулбелковыхвеществ, понижается ихрастворимостьи происходит выпадение в осадок.

Кроме природы растворителей, их диэлектрической проницаемости и рН среды нарастворимостьбелковыхвеществвлияет ионная силарастворов, зависящая отконцентрацииэлектролитовв этихрастворах. О влиянииэлектролитовнарастворимостьбелковыхвеществуказано ниже (см. гл. V, § 5).

При изолировании ядовитых веществподкисленнымспиртомможет происходитьденатурациябелковыхвеществна поверхности кусочков биологического материала. В результате этого создаются затруднения для проникновенияэтилового спиртав биологический материал и для практически полного извлечения из него исследуемыхвеществэтимспиртом.

До настоящего времени остается не изученным вопрос о загрязнении вытяжек, полученных при настаивании гнилостного биологического материала с подкисленной водойи подкисленнымэтиловым спиртом. Это объясняется тем, что в гнилостном биологическом материале содержится значительное число продуктов гниения, принадлежащих к различным классамхимическихсоединений (см. гл. II, § 17). Число и состав этих соединений зависят от сроков и условий гниения биологического материала. При изолировании токсическихвеществиз гнилостного биологического материала продукты гниения в зависимости от ихрастворимостимогут переходить как в подкисленнуюводу, так и в подкисленныйэтиловый спирт.

Многие продукты гнилостного разложения биологического материала даюттакие же реакции, как и некоторые ядовитыевещества. Поэтому при исследовании гнилостного биологического материала на наличие ядовитыхвеществтребуется тщательная очистка водных и спиртовых вытяжек от примесей, являющихся продуктами гниения объектов биологического происхождения.