Сборник №1_Итоговая конференция СНО_ПМГМУ_2013

ФАРМАЦИЯ

РАЗРАБОТКА МЕТОДИК ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ИЗОФЕРМЕНТОВ ЦИТОХРОМА Р450 ДЛЯ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИММУНОКОРРЕКТИРУЮЩЕГО ЛЕЧЕНИЯ

Р.Х. Абдрашитов Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

DETERMINATION OF DEVELOPMENT OF TECHNIQUES CYTOCHROME P450 TO EVALUATE THE EFFECTIVENESS IMMUNOKORREKTIRUYUSCHEGO TREATMENT

A.D. Abdrashitov

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: Фенотипирование является «прямым» методом определения активности того или иного фермента метаболизма ЛС по фармакокинетике его специфического субстрата и его метаболита.

Цель: разработать методики определения активности изоферментов цитохрома Р450 для препаратов корректирующих иммунитет.

Материалы и методы: Подбор условий экстракции пинолина из мочи, и последующее хроматографическое исследование этого соединения выполнялся на основании анализа данных зарубежных источников, посвящённых данной теме, и по их физико-химическим. Для разработки методики количественного определения пинолина и 6-гидрокси-тетрагидрокарболина был выбран метод

LC/MS.

Для разработки методики жидко-жидкостной экстракции к моче пациента добавляли известное количество пинолина и его метаболита. Самый наилучший результат показал метод экстракции ацетонитрилом после осаждения белков.

Результаты: В результате была разработана новая чувствительная и селективная методика, позволяющая определить активность одного из основных изоферментов CYP 2D6 без использования экзогенных маркеров.

Выводы: Данную методику возможно использовать для анализа активности метаболизма многих иммунокорректоров - субстратов изофермента CYP2D6.

НОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ – ИНГИБИТОРЫ АГРЕГАЦИИ ТРОМБОЦИТОВ И ОЦЕНКА ИХ ЭФФЕКТИВНОСТИ

А.А. Алексеев Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

THE NEW COMPOUNDS – INHIBITORS OF PLATELET AGGREGATION

AND EVALUATE THEIR EFFECTIVENESS

А.А. Alekseev

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: Сердечно-сосудистые заболевания занимают первое место среди причин смерти и утраты трудоспособности. Основное место в этой группе

211

заболеваний имеет артериальная недостаточность сердца и мозга, причиной которой является тромбоз сосудов. Антагонисты GPIIb/IIIa (интегрин αIIb/β3) рецепторов тромбоцитов блокируют конечную стадию агрегации тромбоцитов

– связывание фибриногена с рецептором. Среди всех антагонистов рецепторов тромбоцитов наиболее перспективными соединениями являются вещества пептидной природы.

Цель: Проведение компьютерного моделирования, синтез и оценка специфичности действия пентапептидов с антиагрегационным действием. Методы исследования: Моделирование проводилось с помощью программы «Алгокомб». Синтез наиболее эффективных пептидов осуществляли на автоматическом пептидном синтезаторе ABI 433A Peptide Synthesizer. Строение соединений подтверждали методами хромато-масс-, ЯМР 1Н- и двумерной ЯМР 1Н/1Н (COSY, NOESY)-спектроскопии. Исследование агрегации проводили по методу Борна на двухканальном лазерном анализаторе агрегации тромбоцитов 230LA-2 (НПФ «Биола»).

Полученные результаты: Оценка специфической активности пептидов доказала способность соединений уменьшать агрегацию тромбоцитов, наиболее активным ингибитором оказался пептид Lys-His-Ala-Asp-Asp (IC50 11.1 мкМ).

Выводы: Выполнена оценка специфичности действия смоделированных соединений in vitro на крови здоровых доноров и показано доз-зависимое снижение АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЯГКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ

С АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Е.О. Бахрушина, М.Н. Анурова Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

COMPARATIVE DATA BIOPHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS WITH

ANTIBACTERIAL ACTION

E.O. Bakhrushina, M.N. Anurova

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: Мягкие лекарственные формы различаются консистентными свойствами, реологией и скоростью высвобождения лекарственных веществ. Важной задачей является выбор оптимальной лекарственной формы для конкретного лекарственного вещества.

Цель: Изучить кинетику высвобождения фурацилина из мази, крема, геля. Материалы и методы: Изготовлены мазь, гель и крем с 5% содержанием фурацилина.

Оценку кинетики высвобождения проводили диализом по Крувчинскому и методом 5 «Мешалка над диском» по фармакопее США (USP 35) на тестере растворения Erweka DT 6. Среда растворения - фосфатный буфер, pH=7,5.

Количественное содержание вещества в среде растворения определяли на спектрофотометре Analytik Jena AG Specord 250 при 377 нм.

212

Результаты: Высвобождение из мази не превышает 0,5±0,1%, из крема 3±1%, из геля достигает 4±1%. По методу 5 фармакопеи США результаты сопоставимые: из мази - 1±0,5%, из крема 4±1%, из геля 5±0,5%.

Выводы: Результаты методов коррелируют между собой. Высвобождение фурацилина из эмульсионных основ 6 раз больше, чем из липофильных, и в 1,5 раза меньше, чем из гидрофильных. Близость значений для крема и геля объясняется повышением растворимости вещества в присутствии эмульгаторов.

ИЗУЧЕНИЕ СОСТАВА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА ORIGANUM L.

Д.О. Боков Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

INVESTIGATION OF ORIGANUM L. MEDICINAL PLANT MATERIALS

BIOLOGICAL ACTIVE SUBSTANCES COMPOSITION

D.O. Bokov

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: Использование лекарственных препаратов (ЛП) растительного происхождения имеет важное значение в лечении многих хронических заболеваний.

Фармацевтическая практика постоянно требует увеличения ассортимента и количества лекарственного растительного сырья (ЛРС). Расширение ассортимента ЛРС возможно за счет внедрения в медицинскую практику растений, имеющих сходный химический состав и прежде всего видов, систематически близких к официнальным. К таким растениям относится душица, официнальным видом в России является душица обыкновенная (Origanum vulgare L.). В Европейской фармакопее 7-го издания наряду с данным видом возможно использование душицы турецкой (Origanum onites L.,

син. душица смирнская - Origanum smyrnaeum Sibth. & Sm.).

Поскольку более 90 % экспортных поставок травы душицы Турции в Россию приходится именно на траву O. onites (только в качестве специи), представляется весьма актуальным фармакогностическое изучение данного растения с целью внедрения его для получения лекарственных средств наравне с душицей обыкновенной.

Цель: Обоснование использования новых видов сырья, для получения эффективных и безопасных лекарственных препаратов, применяемых в лечении заболеваний бронхолегочной системы.

Материалы и методы: Объектами исследования служили коммерческие образцы высушенной травы O. vulgare и O. onites, приобретённые в аптечной сети. В процессе исследования использовались фармакопейные методики приготовления микропрепаратов листа с поверхности, стебля, венчика, чашечки и пыльцы. Методом газожидкостной хроматографии был определён качественный состав компонентов эфирного масла (полученного методом перегонки с водяным паром), их количественное содержание. С

213

использованием метода тонкослойной хроматографии (ТСХ) был проведён анализ фенольной фракции. При помощи дифференциальной спектрофотометрии (∆E-метод) установлено количественное содержание флавоноидов. В водном извлечении, приготовлен-ном в соответствии с общей фармакопейной статьей (ОФС) «Настои и отвары» Государственной Фармакопеи XI издания (ГФ XI), титриметрически определялись дубильные вещества и аскорбиновая кислота.

Результаты: В ходе сравнительного фармакогностического изучения ЛРС травы душицы обыкновенной и турецкой был определён состав БАВ гидрофильной и липофиль-ной фракции, выявлено наличие тимола в эфирном масле, лютеолина-7-гликозида в спиртовом извлечении. Разработана методика идентификации флавоноидов при помощи ТСХ. Предложена методика стандартизации травы душицы по количественному содержанию суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-гликозид. Показано, что в изучаемом сырье присутствуют дубильные вещества конденсированной группы, в достаточных количествах содержится аскорбиновая кислота. Определены основные анатомо-диагностические признаки, позволяющие с высокой точностью идентифицировать производящее растение ЛРС различной степени измельчённости.

Выводы: Полученные результаты могут служить основой для создания нормативной документации, регламентирующей показатели и нормы качества ЛРС травы душицы, используемой в медицинской практике. Траву душицы турецкой, наравне с душицей обыкновенной, можно рекомендовать к использованию в качестве лекарственного средства. Рассмотрена схема комплексной переработки ЛРС травы душицы.

РАЗРАБОТКА ПОДХОДОВ К СТАНДАРТИЗАЦИИ И МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА АЛЛЕРГЕННЫХ ЭКСТРАКТОВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АЛЛЕРГЕН-СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ (АСИТ)

Д.О. Боков Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

DEVELOPING STANDARDIZATION AND QUALITY CONTROL APPROACHES OF ALLERGENIC EXTRACTS USED DURING ALLERGEN-SPECIFIC IMMUNOTHERAPY (ALLERGEN-SIT)

D.O. Bokov

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: В настоящий момент прослеживается чёткая тенденция к возрастанию частоты встречаемости аллергических заболеваний во всём мире. Аллерген - специфическая иммунотерапия (АСИТ) – это терапевтический метод лечения IgE-опосредованных аллерги-ческих заболеваний, применение которого заключается в использовании возрастающих доз аллергена, который вызывает основные клинические проявления заболевания и к которому была определена повышенная чувствительность. Поскольку лечебные и диагностические аллергены производятся из натурального сырья (пыльца

214

растений, питательные субстраты, получаемые в процессе культивирования клещей), следует учитывать ряд факторов, способных оказывать влияние на качественные и количественные характеристики получаемого продукта. Качество экстрактов аллергена сильно зависит от качества исходного сырья, которое должно соответствовать высоким стандартам, а так же добываться и обрабатываться согласно регуляторным требованиям. Стандартизация экстрактов аллергенов является основным гарантом стабильности, который обеспечивает химическую однородность производимых субстанций от серии к серии путем сглаживания вариаций биологической активности между сериями. Вопрос относительно проведения стандартизации количественного содержания и качественного состава аллергенов в экстрактах находится в данный момент в центре внимания аллергологов всего мира. До сих пор не принята единая международная система стандартизации аллергенов. Широкая вариабельность аллергенов обуславливает трудности создания подобной системы. Появление клонированных или высокоочищенных аллергенов, которые экспрессированы в бактериальные или дрожжевые клетки, даёт возможность получать аллергенные экстракты в неограниченных количествах, которые практически не отличаются от маточных растворов. Данные методы требуют больших временных и материальных затрат, поэтому одним из способов решения сложившейся проблемы является разработка унифицированной методики стандартизации экстрактов аллергенов. Протоколы стандартизации экстракта пыльцы берёзы принятые в РФ не отражают аллергенной активности, поскольку далеко не все экстрагированные белки обладают аллергенными свойствами. Кроме того, многие комплексные аллергены разрушаются при проведении жёсткой процедуры выделения. Эти проблемы возникают при проведении биологических исследований функциональной активности аллергенов. Таким образом, существует необходимость разработки и валидации методики стандартизации экстракта пыльцы березы с использованием физикохимических методов анализа.

Цель: Изучение химического состава экстракта пыльцы берёзы, а так же разработка и валидация методики его стандартизации.

Материалы и методы. Оборудование: жидкостной хроматограф SHIMADZU (Япония) с тандемным масс-селективным детектором (Япония); весы аналитические Precisa Gravimetrics AG, Швейцария; центрифуга Eppendorf 5415D, Германия; встряхиватель типа вортекс ELMI, Латвия; концентратор

Eppendorf Concentrator plus, Германия; рН-метр Mettler Toledo, FE20,

Швейцария; дозаторы переменного объема Eppendorf 10 – 100 мкл и 100 – 1000 мкл, Германия; Фильтры 0,4 мкм; системаводоподготовки Millipore, Milli-Q Advantage A10, Франция. Реактивы: ацетонитрил (для высокоэффективной жидкостной хроматографии - ВЭЖХ); этанол (для ВЭЖХ);вода деионизированная Milli-Q. Пробоподготовка: Экстракт пыльцы березы (точную навеску около 10 мг) помещали в мерную колбу объемом 100 мл, растворяли в воде деионизированной и доводили объем до метки тем же растворителем. 2 мл полученного арствора пропускали через фильтр с размером пор 0,4 мкм. Фильтрат помещали во флакон для хроматографирования объемом 2 мл. Условия хроматографирования: В качестве подвижной фазы использовали смесь 0,1 % раствора муравьиной кислоты в воде с ацетонитрилом (55:45). Колонка: Agilent XDB-C18 4.6x150

215

мм; 5,0 мкм, температура колонки 30 0 C. Объем вводимой пробы составлял 10 мкл. Скорость потока 0,3 мл/мин. Условия МС: Тип ионизации – DUIS (ESI + APCI); режим: Product ion mode в положительной полярности. Q1 в SIM режиме при m/z = 876,1. Энергия ионизации в калюзионной ячейке - -35В. Q3 в режиме SCAN с диапазоном m/z от 123,2 – 876,1. Для количественного определения белка BetV1 использовался метод абсолютной калибровки. Была проведена валидация методики по показателям селективность, прецизионность, точность, линейность, предел обнаружения и предел определения.

Результаты: В результате исследования была разработана чувствительная и селективная методика количественного определения белка BetV1, которая может быть использована для стандартизации экстрактов пыльцы березы.

Выводы: Проведенные исследования позволили разработать универсальную методи-ку ВЭЖХ доказательства подлинности, количественного содержания мажорного белка BetV1в экстракте пыльцы берёзы. Результаты проведенной валидации подтверждают то, что разработанная методика пригодна для контроля качества экстракта пыльцы берёзы и может быть включена в соответствующую фармакопейную статью.

ОСОБЕННОСТИ ФАРМАКОТЕРАПИИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ПАЦИЕНТОВ С ФАТАЛЬНЫМ ИНСУЛЬТОМ

Т.А. Василевская, Н.К. Соколов Гродненский государственный медицинский университет,

г. Гродно, Республика Беларусь

CHARACTERISTICS OF PHARMACOTHERAPY ARTERIAL HYPERTENSION IN PATIENTS WITH FATAL STROKE

T.A. Vasilevskaya, N.K. Sokolov

Grodno State Medical University, Grodno, Republic of Belarus

Актуальность. Артериальная гипертензия (АГ) наиболее распространённая сердечно-сосудистая патология. Опасным осложнением АГ является инсульт. Цель. Изучалась адекватность проводимой антигипертензивной терапии у пациентов с АГ, умерших от инсульта.

Материалы и методы исследования. Использовался фармакоэпидемиологический метод ретроспективного изучения амбулаторных карт. Исследовались данные карт 300 пациентов с АГ II - III степеней и умерших от фатального инсульта.

Результаты и обсуждение. Средний возраст больных составил 64,6±0,8 лет. Среднее число лет от постановки диагноза АГ до смерти 7,6±0,5 года. Значит, пациенты либо не обращались за лечением, либо лечение было неэффективным.

Согласно данным II степень АГ была диагностирована у 81% пациентов с фатальным инсультом, у 19% был выставлен диагноз - III степень АГ. При АГ II тиазидный диуретик (ТД) отсутствовал у 48% пациентов в назначениях, а при АГ III – у 14%. Средняя дневная доза пяти наиболее часто прописываемых пациентам ЛС (в скобках - рекомендуемая): эналаприл -15 мг (20 мг); лизиноприл - 15 мг (20 мг); бисопролол - 3.1 мг (10 мг); метопролол – 68 мг (225 мг); амлодипин – 5.4 мг (5 мг). Только амлодипин применялся в дозировке,

216

близкой к средней терапевтической и ни одно из ЛС – в максимальной суточной дозе.

Выводы. Полученные результаты показывают, что занижалось количество ЛС при комбинированной терапии АГ, отсутствовали в назначениях у многих пациентов ТД, занижались суточные дозировки ЛС.

ПРИМЕНЕНИЕ ДИУРЕТИКОВ ПРИ ОСТРОЙ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ

В.А. Волкова Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

DIURETICS IN ACUTE HEART FAILURE

V.A. Volkova

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: Острая сердечная недостаточность является наиболее распространенной причиной госпитализации среди пациентов старше 65 лет, с тенденцией охватывания все более молодых слоев населения. Внутривенные петлевые диуретики являются одним из важнейших компонентов современного лечения данного недуга.

Цель: изучение эффективности диуретических средств при острой сердечной недостаточности, принцип назначения доз и методов введения.

Материалы и методы: обзор литературных данных и научных статей отечественных и зарубежных исследователей.

Результаты: Основные исследования эффектов петлевых диуретиков проводятся с использованием препарата Фуросемида. Быстрое гипотензивное действие фуросемида обусловлено уменьшением объема плазмы крови. При систематическом применении фуросемида гипотензивный эффект в основном определяется расширением кровеносных сосудов, которое связано с выведением избытка натрия. Начальные дозы подбирают с учетом клинического состояния, титрования дозы в зависимости от клинического ответа, с последующим снижением дозы при уменьшении степени выраженности задержки жидкости. При введении высоких доз фуросемида существует риск рефлекторной вазоконстрикции.

Выводы: Средствами выбора при острой сердечной недостаточности являются петлевые диуретики, одним из основных - фуросемид. Его применение требует постоянного мониторинга ионного состава сыворотки крови, а также функции почек.

ЭФФЕКТ ПЛАЦЕБО

В.А. Волкова, Д.В. Трощенко Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

EFFECT OF PLACEBO

V.A. Volkova, D.V. Troshchenko

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

217

Цель: разработка методики сквозной стандартизации травы чабреца и лекарственных форм на его основе (настой, жидкий экстракт) по содержанию суммы флавоноидов.

Материалы и методы: Объектом исследования служил промышленный образец измельченной высушенной травы чабреца. Определение суммы флавоноидов проводилось методом спектрофотометрии по реакции комплексообразования с алюминия хлоридом. Определение содержания суммы флавоноидов в траве чабреца оптимизировали по таким условиям как соотношение сырья и экстрагента, время и кратность экстракции, концентрация экстрагента, кинетические характеристики реакции образования комплекса флавоноидов с алюминия хлоридом. Пересчет суммы флавоноидов в траве чабреца целесообразно проводить на рутин в связи с тем, что полученные спектры исследуемых образцов имели максимумы поглощения, укладывающиеся в полуширину полосы поглощения стандартного образца рутина. Настой травы чабреца готовили согласно Инструкции по применению в соотношении 1:20. Получение жидкого экстракта в рамках эксперимента осуществляли методом перколяции с использованием растворителя, позволяющего достичь максимального выхода флавоноидов.

Результаты: Был подобран оптимальный экстрагент для извлечения флавоноидов из травы чабреца – 50% спирт этиловый. Максимальная эффективность экстракции флавоноидов травы чабреца была достигнута при экстрагировании в течение 50 минут при соотношении сырья и экстрагента 1:40; наиболее целесообразно проведение реакции комплексообразования флавоноидов с алюминия хлоридом в течение 20 минут. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в траве чабреца в пересчете на абсолютно сухое сырье составило 1,36±0,01%, а в настое и жидком экстракте травы чабреца - 0,039±0,001% и 0,12±0,01% соответственно.

Выводы: Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в траве чабреца. Установлено содержание суммы флавоноидов в настое и жидком экстракте травы чабреца. Также доказана возможность проведения сквозной стандартизации травы чабреца и его препаратов по содержанию суммы флавоноидов.

РАЗРАБОТКА ХАРАКТЕРИСТИК ПОДЛИННОСТИ ТРАВЫ ТАВОЛГИ ВЯЗОЛИСТНОЙ

О.В. Граб Первый Московский государственный медицинский университет

им. И.М. Сеченова, г. Москва

DEVELOPMENT CHARACTERISTICS OF AUTHENTICITY HERBS

MEADOWSWEET MEADOWSWEET

O.V. Grab

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

Введение: трава таволги вязолистной используется в отечественной и зарубежной медицинской практике, а нормативная документация на траву таволги вязолистной входит в ряд ведущих фармакопей мира. Отечественная нормативная документация на данное сырье отсутствует.

219

Цели и задачи. Разработать характеристики подлинности травы таволги вязолистной с учетом современных требований.

Материалы и методы. Объектом исследования служила трава таволги вязолистной. Методы: информационно-аналитический, микроскопический, хроматографический.

Результаты: Изучено анатомическое строение цельной и измельченной травы таволги вязолистной, а также мелкой фракции (частицы менее 0,16 мм) травы с использованием традиционной и модифицированной методик микроскопического анализа и с использованием микрохимической реакции; визуализированы и сфотографированы основные анатомо-диагностические признаки. Разработана методика хроматографического анализа для определения подлинности травы и препаратов таволги вязолистной с использованием двумерной хроматографии на отечественных пластинках «Сорбфил».

Выводы. Разработаны характеристики подлинности травы таволги вязолистной, показана возможность использования в ее микроскопическом анализе модифицированных методик, а в химическом анализе - двумерной хроматографии на отечественных пластинках.

ГЛАЗНАЯ КРАСКА: ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ТОНОМЕТРИИ И ТЕХНОЛОГИЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Д. E. Гребнева

Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, г. Москва

EYE COLOR: USE IN TONOMETRY AND TECHNOLOGY

D.E. Grebneva

Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow

В настоящее время в связи с появлением новых технологий и инноваций, широким использованием компьютерной техники, большой нагрузкой на организм человека возникает ряд проблем, связанных со здоровьем, в том числе отмечается рост глазных заболеваний, в частности глаукомы. Как правило, заболевание протекает бессимптомно и выражается в повышении внутриглазного давления, без лечения может привести к слепоте.

Одним из способов диагностики глаукомы является тонометрия с помощью глазной краски.

Целью данного исследования было изучение технологии изготовления глазных красок для использования в тонометрии.

Диагностику глазного давления проводят с помощью тонометров Маклакова с использованием специальной краски (бисмаркбраун, колларголовая, метиленовый синий).

Изучение технологии изготовления глазных красок производилось на базе Централизованной аптеки Первого МГМУ им. И.М. Сеченова. Предварительно были рассмотрены прописи используемых в медицине глазных красок следующих составов:

1.Rp.: Bismark-braun 2,0; Glycerini; Aquaе purificataе aa gtt. XX

2.Rp.: Methyleni coerulei 2,0; Glycerini; Aquaе purificataе aa gtt. XX

3.Rp.: Collargolum 1,0; Glycerinum; Aquaе purificataе aa gtt.X

220