
- •Лекція 4. Використання люмінесцентного спектрального аналізу для контролю харчових виробництв
- •4.1. Поняття люмінесценція, флуоресценція, фосфоресценція
- •4.2. Основи люмінесцентного аналізу
- •4.3. Прилади для люмінесцентного аналізу
- •4.4. Використання люмінесцентного аналізу для дослідження харчових продуктів
4.3. Прилади для люмінесцентного аналізу
Основними вузлами апаратури для люмінесцентного аналізу є: освітлювач із світлофільтрами, кювети, діафрагми і пристрій для вимірювання інтенсивності свічення. Освітлювачем для люмінесцентного аналізу, як правило, використовують ртутні лампи, а як приймач люмінесценції – фотоелементи і фотопомножувачі. Принципова схема лабораторного флуориметра ЄФ-ЗМ, призначеного для кількісного аналізу вітамінів та інших люмінесціюючих речовин, показана на рис.14.
Світло від кварцової лампи 1, проходячи через діафрагму 2, світлофільтр 4 і кварцову оптику 5, потрапляє на посудину з розчином. Люмінесцентне свічення розчину, що досліджується, проходить через кварцову оптику 7, вторинні світлофільтри 8, потрапляє на фотоелемент 9. Фотоелемент, перетворюючи світлову енергію в електричну, подає її на електронний підсилювач, в анодний ланцюг якого увімкнений мікроамперметр. Покази мікроамперметра прямо пропорційні до концентрації люмінесціюючої речовини.
4.4. Використання люмінесцентного аналізу для дослідження харчових продуктів
Люмінесцентний аналіз знаходить широке використання при дослідженні харчових продуктів рослинного і тваринного походження. Люмінесцентний аналіз розділяють на якісний (сортовий) і кількісний. Встановлено, що початок гниття на ранній стадії бобів, білої і червоної капусти, огірків можна визначити по зміні кольору і інтенсивності флуоресценції. Люмінесценція свіжого, залежалого і зіпсованого зерна різна. Можливо застосування даного методу аналізу для контролю якості картоплі. Метод дає змогу виявити деякі захворювання і виявити клубні, які зіпсовані морозом. Підморожені клубні визначають по слабкому біло-голубому свіченню.
По кольору люмінесценції встановлюють сорт муки, чим більше в ній висівок, тим інтенсивніше світіння.
Широко використовують люмінесцентний аналіз для визначення білків. Здатність до люмінесценції – загальна властивість білкових речовин, яка обумовлена вмістом в них ароматичних амінокислот. Висока чутливість люмінесценції дає змогу визначити структурні і фізико-мімічні перетворення в білковій макромолекулі.
Ретельно розроблені методи якісного і кількісного люмінесцентного аналізу для ряду вітамінів. Методика люмінесцентного визначення вітаміну В2 (рибофлавіну) приведена нижче.
Спектральні люмінесцентні характеристики використовуються для ідентифікації жирів. Аналізуючи зміни положення максимуму спектрів люмінесценції жирів роблять висновок про ступінь їх окиснення.
+Методика люмінесцентного визначення вітаміну В2 (рибофлавіну)
Здатність рибофлавіну до люмінесценції дає можливість кількісно визначити його методом люмінесцентного аналізу.
У мірну колбу місткістю 250 мл наливають 2,5 мл розчину А, розводять водою до позначки. Свіжовиготовлений стандартний розчин (розчин В) містить 0,4 мкг/мл вітаміну В2. У мірні колби місткістю 50 мл наливають відповідно 5; 10; 12,5; 25; 40; 50 мл стандартного розчину В, розводять водою до позначки, перемішують і вимірюють інтенсивність люмінесценції кожного розчину на флуориметрі. За результатами вимірів будують калібрувальний графік, за яким визначають вміст В2 у розчині з невідомою концентрацією.