Gos_farmokopeya_RB_2_tom_2007
.pdfОльхи соплодия |
391 |
|
|
Рисунок 1. Хроматограмма испытуемого раствора.
1. Гиперозид; 2. Эллаговая кислота.
––спектрофотометрический детектор,
длина волны 360 нм;
––время уравновешивания системы: 20 мин перед каждым вводом;
––объем вводимой пробы: 20 мкл.
Порядок выхода пиков: гиперозид, эллаго-
вая кислота (рисунок 1).
Пригодность хроматографической систе-
мы: раствор сравнения:
––разрешение: между пиками гиперозида и эллаговой кислоты не менее 1,5.
Содержание гиперозида в процентах рассчитывают по формуле:
S1 ×C×6 , S2 ×m
где:
S1 — площадь пика гиперозида на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 — площадь пика гиперозида на хроматограмме раствора сравнения;
m — масса навески испытуемого сырья, г; С — содержание гиперозида в растворе
сравнения, мг/мл.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Ольхи соплодия
Alni fructus
ALDER FRUIT*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные поздней осенью и зимой, высушенные соплодия Alnus incana (L.) Moench и Alnus glutinosa (L.) Gaerth. Содержат не менее 10 % дубильных веществ в пересчете на танин в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Яйцевидные или продолговатые соплодия ольхи («шишки»), расположенные по несколько штук на общей плодоножке или одиночные, с плодоножками либо без них, чешуйки и плоды. На твердой оси соплодия расположены многочисленные веерообразные чешуйки с утолщенным, слегка лопастным наружным краем. В пазухах чешуек находятся односеменные двукрылые сплюснутые плоды-орешки. Длина общей плодоножки до нижнего соплодия до 15 мм, длина соплодий до 20 мм, диаметр до 13 мм. Цвет соплодий и веточек темно-красновато-коричневый или темнокоричневый. Запах слабый.
В. Микроскопия (#2.8.3). На попереч-
ном срезе оси соплодия располагаются 5—6 сосудисто-волокнистых коллатеральных пучков, у основания которых находится многоклеточная перимедулярная зона. Флоэма деформирована; над флоэмой располагается механическая ткань, состоящая из крупных или продолговатых
392 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
клеток. На поперечном срезе чешуйки в средней части видны 5 сосудисто-волокнистых коллатеральных пучков, состоящих из ксилемы, тонкого слоя деформированной флоэмы и 3—5 рядов склеренхимы, расположенных по обеим сторонам пучка. Чешуйки покрыты эпидермисом с кутикулой, более толстой на внешней стороне соплодий.
С. 2 г измельченного сырья (1000) помещают в колбу, прибавляют 20 мл воды Р и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Горячее извлечение фильтруют. К 2 мл полученного раствора прибавляют 2 капли раствора железа (III) аммония сульфата Р5. Появляется черно-синее окрашивание, быстро переходящее в черное.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: веточки и отделившиеся плодоножки — не более 1 %; соплодия с длиной общей плодоножки свыше 15 мм — не более 3 %; измельченные частицы, проходящие сквозь сито (710), — не более 3 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 12,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 3,5 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
2,000 г измельченного сырья (2400) помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 500 мл, прибавляют 250 мл кипящей воды Р и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Охлаждают до комнатной температуры, процеживают и доводят водой Р до объема
250,0 мл.
25,0 мл полученного извлечения помещают в коническую колбу вместимостью 750 мл, прибавляют 500 мл воды Р, 25,0 мл раствора индигосульфокислоты (0,25 мг индигокарми-
на Р растворяют в 6,5 мл кислоты серной Р,
прибавляют 6,5 мл кислоты серной Р, доводят водой Р до объема 250 мл и фильтруют). Титруют при постоянном перемешивании 0,02 М
раствором калия перманганата до желтого окрашивания.
Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,02 М раствора калия перманганата
соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Ольхи черной листья
Alni glutinosae folia
BLACK ALDER LEAF*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные в течение лета, высушенные и обмолоченные листья Alnus glutinosa (L.) Gaertn.
Cодержат:
––неменее5,0 %суммыфенольныхсоедине- ний в пересчете на эллаговую кислоту (C14H6O8; М.м. 302,2) в сухом сырье;
––неменее0,5 %эллаговойкислоты(C14H6O8; М.м.302,2)инеменее0,3 %гиперозида(С21Н20О12; М.м. 464,4) в пересчете на сухое сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Листья че-
решковые, широкообратнояйцевидные или почти округлые с цельнокрайним клиновидным основанием, на верхушке притупленные или выемчатые, с городчато-пильчатым краем. Молодые листья очень клейкие. Жилкование перистое, количество жилок 5—7 (реже 9). Длина листа от 2,3 см до 12 см, ширина от 2,5 см до 6 см, длина черешка от 0,7 см до 3 см. Листья сверху темно-зеленые, блестящие, снизу светлозеленые, почти голые (с редкими волосками по жилкам). Запах слабый.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны: многоугольные клетки верхнего эпидермиса с незначительно утолщенными оболочками, нижнего — более мелкие с сильно извилистым контуром; устьица овальные, преимущественно на нижней стороне, окружены 4—9 клетками (аномоцитный тип); многочисленные волоски на обеих сторонах листа (на нижней стороне их больше); волоски простые, одноклеточные, с заостренной верхушкой, иногда с коричневым содержимым, расположенные в основном по крупным жилкам, особенно с нижней стороны; на обеих сторонах листа железки на короткой ножке с головкой из пяти клеток с коричневым содержимым. В мезофилле листа много друз оксалата кальция. Жилки листа сопровождаются секреторными включениями, заполненными коричневым зернистым или маслянистым содержимым, которые окрашиваются
раствором судана III Р в красный цвет.
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-
го сырья (355) прибавляют 30 мл спирта (60 %, об/об) Р и кипятят с обратным холодильником в течение 40 мин. Охлаждают, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин и собирают надосадочную жидкость.
Раствор сравнения. 1,0 мг эллаговой кислоты Р, 1,0 мг гиперозида Р и 1 мг рутина Р раст-
воряют в 1 мл метанола Р.
Ольхи черной листья |
393 |
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем целлю-
лозы для хроматографии Р.
Подвижная фаза: 2-пропанол Р — кислота муравьиная безводная Р — вода Р (2:5:5,
об/об/об). Камеру насыщают парами подвижной фазы в течение 30 мин.
Наносимый объем пробы: по 5 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раст вором 20 г/л алюминия хлорида Р в 96 % спирте Р и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.
Верх хроматографической пластинки
|
Зона голубого цвета |
———— |
———— |
Рутин: зона желтого |
Зона желтого цвета |
цвета |
|
Гиперозид: зона жел- |
Зона желтого цвета |
того цвета |
|
———— |
———— |
Эллаговая кислота: |
Зона фиолетового |
зона фиолетового |
цвета |
цвета |
|
|
|
Раствор сравнения |
Испытуемый раствор |
|
|
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: потемневшие и побуревшие листья — не более 3 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более
0,5 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 5,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение содержания суммы фенольных соединений в пересчете на эллаго-
вую кислоту. 0,500 г измельченного сырья (355) помещают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл спирта (60 %, об/об) Р, взвешивают с точностью до 0,01 г и кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 40 мин при периодическом встряхивании для смывания частиц сырья со стенок колбы.
Охлаждают, доводят массу до первоначальной спиртом (60 %, об/об) Р и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. К 10,0 мл надоса дочной жидкости прибавляют 10,0 мл спирта
(60 %, об/об) Р (раствор А).
Испытуемый раствор. К 0,1 мл раствора А прибавляют 0,5 мл реактива фосфорномо либденово-вольфрамового Р, 10 мл воды Р и
доводят до объема 25,0 мл раствором 150 г/л
натрия карбоната безводного Р. Компенсационный раствор. К 0,5 мл реак-
тива фосфорномолибденово-вольфрамового Р
прибавляют 10 мл воды Р и доводят до объема
25,0 мл раствором 150 г/л натрия карбоната безводного Р.
Через 40 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при
760 нм.
Концентрацию суммы фенольных соединений в испытуемом растворе (мг/мл) в пересчете на эллаговую кислоту определяют по градуировочному графику.
Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на эллаговую кислоту в процентах рассчитывают по формуле:
C×1500m ,
где:
C — содержание фенольных соединений в пересчете на эллаговую кислоту, найденное по калибровочному графику, мг/мл;
m — масса навески испытуемого сырья, г.
Построение градуировочного графика. 12,5 мг эллаговой кислоты Р в пересчете на сухое вещество растворяют 10 мл метанола Р и доводят до объема 25,0 мл этим же растворителем. В пять мерных колб вместимостью
25 мл помещают по 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; и 0,5 мл по-
лученного раствора соответственно, прибавля-
ют по 0,5 мл реактива фосфорномолибденововольфрамового Р, по 10 мл воды Р и доводят до объема 25,0 мл раствором 150 г/л натрия карбоната безводного Р. Для построения градуировочного графика на оси абсцисс откладывают концентрацию раствора (мг/мл), а на оси ординат — их оптическую плотность.
Определение содержания эллаговой кис-
лоты и гиперозида. Жидкостная хроматогра-
фия (2.2.29).
Испытуемый раствор. 1,00 г измельченно-
го сырья (355) помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 60 мл спирта (60 %, об/об) Р, взвешивают с точностью до 0,01 г и кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 40 мин. Охлаждают, доводят массу до первоначальной спиртом (60 %, об/об) Р и центрифугируют. Надосадочную жидкость фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
394 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
Раствор сравнения. 2,5 мг гиперозида Р, 5,0 мг эллаговой кислоты Р растворяют в метаноле и доводят до объема 25,0 мл этим же растворителем.
Условия хроматографирования:
––колонка длиной 0,150 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем окта-
децилсилильным для хроматографии Р с раз-
мером частиц 5 мкм;
––температура: 20°С;
––подвижная фаза:
––подвижная фаза А: вода Р — кислота уксусная ледяная Р (97:3, об/об);
––подвижная фаза В: метанол Р;
Время |
Подвижная |
Подвижная |
Скорость |
(мин) |
фаза А |
фаза В |
подвижной |
|
( %, об/об) |
( %, об/об) |
фазы |
|
|
|
(мл/мин) |
|
|
|
|
0—10 |
100 → 90 |
0 → 10 |
0,9 → 1,0 |
10—40 |
90 → 30 |
10 → 70 |
1,0 |
40—44 |
30 → 100 |
70 → 0 |
1,0 → 0,9 |
44—47 |
100 |
0 |
0,9 |
|
|
|
|
––спектрофотометрический детектор,
длина волны 360 нм;
––время уравновешивания системы: 20 мин перед каждым вводом;
––объем вводимой пробы: 20 мкл.
Порядок выхода пиков: гиперозид, эллаго-
вая кислота (рисунок 1).
Пригодность хроматографической систе-
мы: раствор сравнения:
––разрешение: между пиками гиперозида и эллаговой кислоты не менее 1,5.
Содержание гиперозида в процентах рассчитывают по формуле:
S1 ×C×6 , S2 ×m
где:
S1 — площадь пика гиперозида на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 — площадь пика гиперозида на хроматограмме раствора сравнения;
m — масса навески испытуемого сырья, г; С — содержание гиперозида в растворе
сравнения, мг/мл.
Содержание эллаговой кислоты в процентах рассчитывают по формуле:
S3 ×C1 ×6 , S4 ×m
где:
S3 — площадь пика эллаговой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S4 — площадь пика эллаговой кислоты на хроматограмме раствора сравнения;
m — масса навески испытуемого сырья, г; С1 — содержание эллаговой кислоты в рас-
творе сравнения, мг/мл.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Рисунок 1. Хроматограмма испытуемого раствора.
1. Гиперозид; 2. Эллаговая кислота.
Ортосифона тычиночного листья |
395 |
Ортосифона тычиночного листья (Почечного чая листья)
Orthosiphonis staminei folia
JAVA TEA
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные в течение вегетации и высушенные листья и верхушки побегов Orthosiphon stamineus Benth. (O. aristatus Maq.; O. spicatus Bak.).
Содержатнеменее0,05 %синенсетина(С20Н20О7; М.м. 372,4) в пересчете на сухое сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Листья час тичноскрученные,короткочерешковые.Пластинка цельного листа ромбовидно-эллиптическая или продолговато-яйцевидная, на верхушке заостренная с крупнопильчатым краем, у основа- ния—клиновидная,цельнокрайняя,сверхуголая, снизу по жилкам с редкими волосками. По всей пластинке листа (при увеличении 10×) видны точечныежелезки.Верхушкипобеговссупротивными листьями, стебли и черешки четырехгранные. Цвет листьев зеленый, серовато-зеленый или фиолетово-коричневый; стеблей — зеленоватокоричневый или фиолетово-коричневый, на изломе — желтовато-белый. Запах слабый.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны: клетки эпидермиса верхней стороны — многоугольные с прямыми или слабо извилистыми стенками; около жилок и по краю листа заметна складчатость кутикулы; клетки нижнего эпидермиса более извилистые в очертании; устьица аномоцитного типа, окружены 2—3 (реже 4) околоустьичными клетками, расположены с обеих сторон; по жилкам и по краю листа простые 1—7-клеточные волоски с бородавчатой поверхностью; с обеих сторон листа железистые волоски на короткой ножке с однодвухклеточной головкой. В небольших углублениях с обеих сторон листа имеются эфиромасличные железки, состоящие из четырех (реже шести) выделительных клеток и одноклеточной ножки.
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 1 г измельченного сырья (710) прибавляют 10 мл метанола Р и нагревают в водяной бане при температуре 60°С в течение 5 мин при встряхивании. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 1 мг синенсетина Р
растворяют в метаноле Р и доводят до объема 20 мл этим же растворителем.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: метанол Р — этилацетат Р — толуол Р (5:40:55, об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети и около фронта подвижной фазы могут обнаруживаться флуоресцирующие зоны красного цвета.
Верх хроматографической пластинки
|
Одна или две флуо- |
|
ресцирующие зоны от |
|
синего до фиолетово- |
|
синего цвета |
———— |
———— |
Синенсетин: интен- |
Основная флуоресци- |
сивная флуоресци- |
рующая зона синего |
рующая зона светло- |
цвета (синенсетин) |
синего цвета |
|
———— |
———— |
|
Две флуоресцирующие |
|
зоны синеватого цвета |
|
|
Раствор сравнения |
Испытуемый раствор |
|
|
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: стебли диаметром более 1 мм — не более 5 %; почерневшие с обеих сторон листья — не более 2 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Потеря в массе при высушивании
(2.2.32). Не более 11,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.
Общая зола (2.4.16). Не более 12,5 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 5,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Жидкостная хроматография (2.2.29).
Испытуемый раствор. К 2,5 г измельченно-
го сырья (355) прибавляют 100 мл метиленхлорида Р и нагревают на водяной бане в течение 30 мин при перемешивании. Фильтруют. Экстракцию повторяют дважды. Фильтраты объединяют
ивыпаривают при пониженном давлении досуха. Остаток растворяют в 25,0 мл подвижной фазы, при необходимости используют ультразвуковую баню. Фильтруют через нитроцеллюлозный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Раствор сравнения. 5 мг синенсетина Р
растворяют в 80 мл подвижной фазы, при необходимости используя ультразвуковую баню,
идоводят до объема 100,0 мл этим же растворителем.
396 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
Условия хроматографирования:
––колонка длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем окта-
децилсилильным для хроматографии Р с раз-
мером частиц 5 мкм;
––подвижная фаза: тетрагидрофуран Р — кислота уксусная Р — вода Р — метанол Р
(5:8:42:45, об/об/об/об);
––скорость подвижной фазы: 0,5 мл/мин;
––спектрофотометрический детектор,
длина волны 258 нм.
––объем вводимой пробы: 20 мкл.
Содержание синенсетина в процентах рассчитывают по формуле:
m2 ×S1 ×25 , m1 ×S2
где:
S1 — площадь пика синенсетина на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 — площадь пика синенсетина на хроматограмме раствора сравнения;
m1 — масса навески испытуемого сырья, г; m2 — масса навески синенсетина Р, г.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 100°С до 105°С.
Пассифлоры трава
PassifIorae herba
PASSION FLOWER
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная в фазу цветения и/или начала плодоношения, измельченная и высушенная трава многолетнего растения PassifIora incarnatа L. Содержит не менее 1,5 % суммы флавоноидов
в пересчете на витексин (С21Н20О10; М.м. 432,4) в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь ку-
сочков листьев, стеблей, закрученных в спираль усиков, бутонов, цветков и незрелых плодов размером от 1 мм до 7 мм. Кусочки стеблей цилиндрические, мелкобороздчатые, голые или очень слабо опушенные, полые, от зеленого до зеленовато-серогоиликоричневатогоцвета,диа метром до 8 мм; кусочки листьев с пильчатым краем, трехраздельные с крупной центральной лопастью, зеленые или зеленовато-коричневые, снизу серо-зеленые с хорошо заметной центральной жилкой, с обеих сторон слабоопушенные. Цветки одиночные, крупные, пятичленные с двойным околоцветником. Плоды от зеленого до коричневатого цвета, плоские, овальные; со-
держат несколько плоских коричневато-желтых ямчатых семян. Запах слабый, неприятный.
В. Микроскопия (#2.8.3). Диагностическими признаками являются извилистостенный эпидермис верхней и нижней сторон листа, простые одно-, трех- и пятиконечные, редко сосочковидные волоски. В клетках мезофилла, главным образом по жилкам, встречаются друзы оксалата кальция. Клетки эпидермиса стебля при рассмотрении с поверхности имеют многоугольную форму. Устьица располагаются в бороздках, ориентированы главным образом вдоль оси стебля. При измельчении сырья (355) видны: фрагменты эпидермиса листа с извилистыми стенками и устьицами аномоцитного типа; множество друз оксалата кальция, отдельных либо расположенных вдоль жилок; большое количество отдельных или сгруппированных фибрилл с ямчатыми сосудами и трахеидами; 1—3-клеточные простые волоски с тонкими стенками, прямые или слабо изогнутые, остроконечные или крючковатые. Встречается эпидермис лепестков, зерна пыльцы с сетью экзины; коричневато-желтые, ямчатые части семенной кожуры плодов.
С. Просматривают хроматограмму, полученную в испытании «Другие виды Passiflora». На хроматограмме испытуемого раствора ниже зоны рутина на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается зона с интенсивной флуоресценцией желтого цвета, над ней — флуоресцирующая зона зеленого цвета (дигликозилфлавон); ниже зоны гиперозида на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается флуоресцирующая зона желтого цвета (изоориентин), над ней — флуоресцирующая зона зеленого цвета (изовитексин); над зоной гиперозида на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается флуоресцирующая зона коричневатожелтого цвета (ориентин), над ней — флуоресцирующая зона зеленого цвета (витексин). Последние две зоны могут отсутствовать. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: незрелые плоды — не более 6 %; части стеблей — не более 60 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Другие виды Passiflora. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 1,0 г измельчен-
ного сырья (355) прибавляют 5 мл метанола Р и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 2,0 мг рутина Р и
2,0 мг гиперозида Р растворяют при нагревании в 10 мл метанола Р.
Пастушьей сумки трава |
397 |
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — метилэтилкетон Р — этилацетат Р (10:10:30:50, об/об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раст вором 10 г/л дифенилборной кислоты амино этилового эфира Р в метаноле Р и затем раст вором 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р.
Через30минпластинкупросматриваютвультра фиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: на хроматограмме раствора сравнениявнижнейтретиобнаруживаетсяфлуо- ресцирующаязонажелтовато-коричневогоцвета (рутин) и в центальной части — флуоресцирующая зона желтовато-коричневого цвета (гиперозид). На хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться флуоресцирующие зоны зеленовато-желтого или оранжево-желтого цвета между зонами дигликозилфлавона и изо ориентина (P. coerulea, P. edulis).
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 13,0 %. 1,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 13,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
0,200 г измельченного сырья (250) помещают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл спирта (60 %, об/об)
Ри нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температуре 60°С в течение 30 мин при перемешивании. Охлаждают, процеживают через ватный тампон в колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон с остатками сырья переносят обратно в круглодонную колбу, прибавляют 40 мл спирта (60 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин. Охлаждают,фильтруютчерезбумажныйфильтр вместе с первым фильтратом в мерную колбу вместимостью 100 мл. Ополаскивают круглодонную колбу, колбу вместимостью 100 мл и фильтр спиртом (60 %, об/об) Р и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем (раствор А).
Испытуемый раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают
ввакууме. Остаток растворяют в 10 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной
Р(10:100, об/об), прибавляют 10 мл раствора,
содержащего 25 г/л кислоты борной Р и 20 г/л
кислоты щавелевой Р в кислоте муравьиной безводной Р и доводят кислотой уксусной без-
водной Р до объема 25,0 мл.
Компенсационный раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают в вакууме. Остаток растворяют в 10 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об), прибавляют 10 мл кислоты муравьиной безводной Р и доводят кислотой уксусной безводной Р до объема 25,0 мл.
Через 30 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при
401нм.
Содержание суммы флавоноидов в пере-
счете на витексин в процентах рассчитывают по формуле:
А×500 , m×628
где:
628 — удельный показатель поглощения витексина;
А — оптическая плотность испытуемого раствора;
m — масса навески испытуемого сырья, г.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Пастушьей сумки трава
Bursae pastoris herba
SHEPHERD’S PURSE HERB*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная в фазы цветения и начала плодоношения (до побурения плодов) и высушенная надземная часть однолетнего растения Capsella bursa-pastoris L.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешниепризнаки(#2.8.3).Олиственные стеблидлинойдо40см,простыеиливетвистые,с ребристой поверхностью, голые или в нижней части слабоопушенные, с цветками или незрелыми плодами на вытянутых кистевидных соцветиях, часто с розетками прикорневых листьев. Прикор- невыелистьяпродолговато-ланцетные,черешко- вые, перистораздельные с острыми треугольными струговидно-выемчатыми, цельнокрайними илизубчатымидолями;стеблевые—очередные, сидячие, продолговато-ланцентые цельнокрайние или выемчато-зубчатые; верхние — почти линейные со стреловидным основанием. Цветки мелкие, правильные, раздельнолепестные. Чашечка из четырех продолговато-яйцевидных
398 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
зеленых чашелистиков. Венчик из четырех обратно-яйцевидных лепестков. Тычинок шесть, из них четыре длиннее остальных. Плоды — стручочки, обратнотреугольно-сердцевидные, на верхушке слегка выемчатые, сплюснутые, с двумя раскрывающимися створками. Цвет стеблей, листьев и плодов зеленый, цветков — беловатый. Запах слабый.
B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны мелкие клетки эпидермиса с тонкими стенками, с верхней стороны слегка извилистые в очертании, с нижней — сильно извилистые. Устьица с обеих сторон, на нижней стороне их больше, мелкие, окружены тремяклеткамиэпидермиса,изкоторыходназначительно мельче двух других (анизоцитный тип). На обеих сторонах листа много одноклеточных волосков: разветвленные волоски трех-, шести- и реже семиконечные с грубобородавчатой поверхностью, лучи волоска прижаты к поверхности листа; простые волоски крупные, одноклеточные, реже двух- и трехклеточные, с широким основанием и узким заостренным концом, поверхность гладкая или слегка бородавчатая; двухконечные вильчатыеволоскислучами,приподнимающимися над поверхностью листа, встречаются редко. Эпидермис стебля состоит из клеток с прямыми стенками, сильно удлиненными по продольной оси стебля; имеются устьица. На поперечном срезе стебля видны: снаружи — эпидермис, к нему примыкает коровая паренхима, затем следует сплошное механическое кольцо, в котором выделяются проводящие пучки, состоящие из ксилемы, флоэмы и сопровождающей группы склереид. Сердцевина большая, заполненная тонкостеннойпаренхимой,местамиразорванной. Пыльца гладкая, круглая, с тремя порами.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: корни (в том числе отделенные при анализе), части растения, пораженные мучнистой росой, и пожелтевшие листья — не более 3 %; частицы, проходящие сквозь сито (710), — не более 2 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более
1 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Вещества, извлекаемые спиртом (70 %,
об/об) (#2.8.18). Не менее 10 %.
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Первоцвета корни
Primulae radices
PRIMULA ROOT
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Цельные или разрезанные на части высушенные корневища и корни растения Primula veris L. или P. elatior (L.) Hill.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешние признаки (#2.8.3). Корневи-
ща прямые или слегка искривленные, длиной от 1 см до 5 см и толщиной от 2 мм до 4 мм. На корневище часто имеются остатки стебля или листьев. От корневищ отходят многочисленные корни толщиной около 1 мм и длиной 6—8 см. Цвет корневищ серовато-коричневый. Цвет корней P. elatior от светло-коричневого до красновато-коричневого, корней P. veris — от светло-желтого до желтовато-белого. Поверхность на изломе гладкая. Вкус горький.
B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании измельченного сырья (355) (сероватокоричневого цвета) с использованием раствора хлоралгидрата Р видны: фрагменты паренхимы коры корней, сердцевины и коры корневищ, состоящие из округлых клеток с утолщенными ямчатыми стенками; коричневатые фрагменты поверхностной ткани с корневыми волосками; сосуды ксилемы с сетчатыми утолщениями. Корневища P. elatior отличаются наличием желтовато-зеленых склереид с сильноямчатыми стенками.
При использовании 50 % (об/об) раствора глицерина Р в измельченном сырье (355) видны зерна крахмала различной формы и размера.
С. Просматривают хроматограмму, полученную в испытании «Корень Vincetoxicum hirundinaria medicus». Пластинку опрыскивают
раствором анисового альдегида Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете. На хроматограмме раствора сравнения обнаруживается основная зона синевато-фиолетового цвета (эсцин), расположенная на границе между нижней и средней третями. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются одна или две интенсивные зоны темно-фиолетового цвета, расположенные немного ниже зоны эсцина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться зоны бледно-фиолетового, желтоватого и коричневато-зеленого цвета.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма до-
пустимых примесей: не более 2 %.
Пижмы цветки |
399 |
Корень Vincetoxicum hirundinacea medicus. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-
го сырья (500) прибавляют 10 мл спирта (70 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в течение 15 мин. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 10 мг эсцина Р растворяют в 1,0 мл спирта (70 %, об/об) Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-
кагеля F254 Р.
Подвижная фаза: верхний слой смеси из
кислоты уксусной ледяной Р, воды Р, бутанола
Р (10:40:50, об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.
Высушивание: при температуре от 100°С до
105°С.
Проявление: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм и отмечают зону эсцина на хроматограмме раствора сравнения и испытуемого раствора. Просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм
Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться флуоресцирующие зоны светло-синего или зеленоватого цвета ниже зоны эсцина на хроматограмме раствора сравнения.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 10,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.
Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Пижмы цветки
Tanaceti vulgaris flores
TANSY FLOWER*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные в начале цветения и высушенные соцветия (цветки) многолетнего травянистого растения Tanacetum vulgare L. Содержит не менее 2,5 % суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в пересчете на лютеолин (C15H10O6; М.м. 286,2) в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Части слож-
ного щитковидного соцветия и отдельные цветочные корзинки. Корзинки полушаровидной
формы с вдавленной серединой, диаметром 6—8 мм, состоят из мелких трубчатых цветков: краевых — пестичных, срединных — обоеполых. Цветоложе голое, неполое, слегка выпуклое, окружено обверткой из черепитчато расположенных ланцетных с пленчатым краем листочков. Цветоносы бороздчатые, голые, реже слабо опушенные. Цвет цветков желтый, листочков обвертки — коричневато-зеленый, цветоносов — светло-зеленый. Запах своеобразный.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-
вании листочка обвертки с поверхности видна центральная жилка, сопровождающаяся секреторными ходами. Клетки эпидермиса с наружной стороны листочка крупные, с прямыми или слегка извилистыми стенками, заметна складчатость кутикулы. Клетки эпидермиса с внутренней стороны узкие и сильно вытянутые. Устьица и волоски встречаются только с наружной стороны листочка обвертки и сосредоточены главным образом по центральной жилке и по краю. Устьица окружены 4—6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Волоски многоклеточные, бичевидные,конечнаяклеткаоченьдлинная,перекрученная и часто обломанная. Клетки эпидермиса венчика — многоугольные, тонкостенные, некоторые из них имеют четковидные утолщения. На поверхности цветков имеются эфиромасличные железки, наиболее густо расположенные на завязи и у основания трубочки венчика. Железки четырех-, шестиклеточные, двухрядные, двухтрехярусные. В мезофилле и клетках эпидермиса венчика встречаются друзы оксалата кальция, сосредоточенные в местах срастания лепестков и на границе венчика и завязи. На поверхности листочка обвертки железки встречаются редко.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: другие части растения (стебли, листья) — не более 40 %; почерневшие и побуревшие корзинки — не более 8 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.
Потеря в массе при высушивании (2.2.32).
Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Испытуемый раствор. 2,000 г измельчен-
ного сырья (710) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 300 мл со шлифом и прибавляют 200 мл 96 % спирта Р. Колбу закрывают и взвешивают с точностью до 0,01 г и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 3,5 ч. Колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и доводят массуколбыдопервоначальной96 %спиртомР. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр,
400 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
отбрасывая первые 20 мл фильтрата. 50,0 мл фильтрата переносят в круглодонную колбу вместимостью 250 мл и выпаривают в вакууме досуха. Сухой остаток в колбе промывают три раза по 20 мл 1,2-дихлорэтаном Р, насыщенным во-
дой Р. Затем содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл с помощью буферного раствора рН 9,0 Р1 четы-
ре раза порциями по 20 мл и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем. Содержимое колбы переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл и очищают 1,2-дихлорэтаном Р четыре раза порциями по 20 мл. 1,0 мл очищенного раствора разводят буферным раствором рН 9,0 Р1 до объема 25,0 мл.
Раствор сравнения. 0,0500 г ФСО лютео-
лина, предварительно высушенного при температуре от 105°С до 110°С в течение 2 ч, раство-
ряют в буферном растворе рН 9,0 Р1 и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем (раствор 1). 1,0 мл раствора 1 разводят буфер-
ным раствором рН 9,0 Р1 до объема 50,0 мл
(раствор 2). Раствор 1 стабилен в течение 7 сут, раствор 2 готовят перед использованием.
Измеряют оптическую плотность (2.2.25) растворов при длине волны 310 нм, используя в качестве компенсационного раствора буферный раствор рН 9,0 Р1.
Содержание суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в пересчете на лютеолин в процентах рассчитывают по формуле:
А×m0 ×200 ,
А0 ×m
где:
А — оптическая плотность испытуемого раствора; ненияА0; — оптическая плотность раствора срав-
m — масса навески испытуемого сырья, г; m0 — масса навески ФСО лютеолина, г.
хранение
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Пиона уклоняющегося корневища и корни
Paeoniae anomalae rhizomata et radices
PEONY ROOT*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные в период цветения, очищенные от земли, отмытые, разрезанные на куски и высушенные корневища и корни многолетнего растения Paeonia anomala L. Содержат не менее 3,5 % суммы иридоидов в пересчете на пеони флорин (C23H28O11; М.м. 480,5) в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешние признаки (#2.8.3). Куски корне-
вищ и корней различной формы длиной от 1 см до 9 см, толщиной от 0,2 см до 1,5 см. Снаружи от желтовато-коричневого до темно-коричневого цвета, продольно-морщинистые. Излом неровный, белого или беловато-желтоватого цвета, по краю иногда красновато-фиолетовый. На поперечном разрезе или изломе видны: снаружи — тонкий слой перидермы; белый слой коры; резко выступающие желтоватые клиновидные участки древесины и светлые сердцевинные лучи. Запах сильный, своеобразный.
B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании поперечного среза корня видно, что покровная ткань представлена 3—6 рядами небольших клеток пробки. Под пробкой лежат крупные тангентально-вытянутые клетки, имеющие значительное утолщение тангентальной стенки оболочки и в углах (уголково-пластинчатая колленхима). Кора состоит из округло-овальных клеток паренхимы, среди которых встречаются тяжи клеток с неравномерно утолщенными оболочками, пронизанными овальными порами. Линия камбия четкая. Флоэма и ксилема расположены
ввиде узких радиальных секторов, разделенных широкими сердцевинными лучами. Клетки флоэмной паренхимы имеют уголковые утолщения оболочек. Ксилема состоит из сосудов, расположенных группами и радиальными рядами, примыкающих к ним узких трахеид и древесной паренхимы. В сердцевинных лучах часто встречаются участки клеток с утолщенными оболочками, пронизанными овальными порами. В клетках паренхимы содержаться: округлые, овальные,
удлиненно-овальные зерна крахмала, часто с усеченным концом, диаметром от 3 мкм до 30 мкм; оксалат кальция в виде друз или сростков неопределенной формы и скоплений мелких кристаллов.
С. К 2 мл раствора А, приготовленного как указано в разделе «Количественное определение», прибавляют 2 мл раствора 20 г/л кислоты хлористоводородной Р и нагревают в течение
5 мин. Появляется характерный запах. При прибавлении к полученному раствору 2 мл раствора 30 г/л железа (III) хлорида Р появляется фиолетовое окрашивание.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: корневища с остатками стеблей длиной до 3 см — не более 10 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.