Гусейнов / Вопросы к зачету 18.12.10

Вопросы к зачету:

1. В чём состоит необходимость выделения ДНК плазмид?

2. Какие способы выделения ДНК плазмид вы знаете?

3. В чём состоит отличие способов выделения ДНК плазмид от способов выделения хромосомной ДНК бактерий?

4. Какими способами можно очистить ДНК от белков?

5. Для чего применяют рестриктирование ДНК?

6. Как получают рекомбинантные молекулы ДНК, используя плазмиды и рестриктазы?

7. Перечислите основные стадии получения плазмидной ДНК.

8. Что такое ПЦР? Суть метода.

9. Перечислите алгоритм проведения ПЦР.

10. Перечислите компоненты реакции ПЦР.

11. Из каких стадий состоит цикл ПЦР?

12. В чем состоит ПЦР-диагностика при определении возбудителя заболевания?

13. Опишите биуретовый метод определения белка.

14. Опишите принцип спектрофотометрического метода определения белка.

15. Опишите метод проведения гель-электрофореза в агарозе.

16. ДНК каких размеров рекомендуется разделять в 1 % агарозном геле?

17. ДНК каких размеров рекомендуется разделять в 2,5 % агарозном геле?

18. При каких концентрациях агарозы рекомендуется разделять молекулы ДНК размером 10000-15000 пар оснований методом гель-электрофореза в агарозе?

19. В чём состоит принцип метода гель-фильтрации?

20. В чём состоят преимущества метода гель-фильтрации перед другими методами?

21. Как определить молекулярную массу макромолекул методом гель-фильтрации?

22. Назовите параметры гель-фильтрационных колонок, применяемых для обессоливания белков.

23. Назовите параметры гель-фильтрационных колонок, применяемых для белков, имеющих близкие молекулярные массы.

24. Назовите методы очистки и разделения белков.

25. Перечислите диапазоны применимости разных методов очистки и разделения белков.

26. Назовите преимущества и недостатки имеющихся методов очистки и разделения белков.

27. Опишите особенности афинной хроматографии.

28. Опишите особенности абсорбционной хроматографии.

29. Что представляет из себя голубой декстран? Как его получают и для чего используют?

30. Бычий сывороточный альбумин, характеристика, выделение, применение.

31. Рибонуклеазы, распространение, характерные черты, выделение, применение.

32. Какие свойства рибонуклеаз позволяют получать их препараты в чистом виде?

33. В чём состоят преимущества иммобилизованных ферментов перед нативными?

34. В чем состоит метод иммобилизации ферментов?

35. Назовите два основных метода иммобилизации ферментов и клеток, а также охарактеризуйте их.

36. Благодаря чему по поглощению раствора при 280 нм можно определить концентрацию белка в нём?

37. Влияет ли изменение рН раствора на спектр поглощения аминокислот и как?

38. При каких значениях оптической плотности наблюдается наименьшая ошибка определения?

39. В каких случаях можно проводить количественное определение вещества по результатам измерения спектров поглощения?

40. Какие подходы можно использовать для определения концентрации вещества в растворе?