Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БИООРГАНИКА / Модификация_химическая_аффинная_лекция_19.ppt
Скачиваний:
47
Добавлен:
06.06.2015
Размер:
3.52 Mб
Скачать

ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ

Кое-что вспомним

При прохождении белков по секреторным путям эукариотической клетки происходит уменьшение уровня глутатиона и NAD(Р)Н, поэтому белки находятся часто в структурах, стабилизированных S-S мостиками

O

 

O

 

C

NH

C

NH

 

CH

O2

CH

 

 

 

HS

 

-S

 

 

SH

S

OH

CH

CH

 

NH

C

NH C

 

 

O

O

 

 

 

глутатион

 

 

 

редуктаза

O

C NH

CH

S S

CH

NH C

O

NADP+

NADPH + H+

Химические модификации

 

-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

NO

 

 

NO

 

 

 

 

 

 

 

 

 

NO2

 

 

 

 

2

 

 

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

COO

 

 

 

 

COO

 

 

 

 

 

 

 

 

 

COO

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

412 нм

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

-

 

 

S

 

E412 = 1,3*104

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

pH 8

 

 

Природные модификации

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

CH2

O

 

OOC

COO

 

 

 

OH

 

 

 

H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

 

C

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

C

C

 

O2N

 

S S

NO2

 

 

S

 

 

 

H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H

H

 

 

реактив Эллмана

 

 

 

 

 

 

 

 

CH2

O

 

 

 

 

 

 

H2C

O

 

 

 

 

 

R'''

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

C

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

R'''

S S

 

 

(б)

H

H

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

 

 

O2

 

 

 

 

 

H2C

O

 

CH2

O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

(в)

 

( )

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

C

C

 

S

 

 

а

 

 

 

 

 

N

 

C

C

 

HN

 

 

 

 

 

 

 

 

H

 

H

 

H

H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

SO3H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S NO

 

CH2

O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

NO

 

 

 

CH2

O

N

C

C

 

HCOOH, H2O2

 

 

 

 

 

 

N

 

C

C

H

H

 

 

 

 

 

(е)

 

(ж)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H

 

H

R'

 

CH2COO-

 

 

 

 

SH

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

O-

O-

 

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

CH2 O

 

 

 

 

 

 

 

CH2 O

 

 

ICH COO-

 

R' O P O P O-

 

 

CH2 O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

O

O

 

 

 

 

N

C C

 

 

 

2

N

C

C

 

 

N

 

C

C

 

 

(г)

pH 8,6;

 

 

(д)

 

 

 

H

H

O

 

H

H

 

 

 

 

 

H

 

H

 

 

 

 

 

трис-HCl

 

 

 

 

 

 

 

ppi

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

N

R''

 

 

 

 

 

 

 

 

 

R O

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

 

(з)

 

(

)

 

 

 

 

 

 

 

 

O

 

 

 

 

 

и

 

 

 

 

CH2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

O

 

S

 

 

CH2

O

 

 

 

O

 

 

R

O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

CH2

 

OH

OH

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

O

CH2 O

N

C

C

 

R''

 

N

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H

H

 

 

 

 

 

 

 

O

 

 

OH

OH

N

 

C

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

O

 

 

C NH2

 

 

 

H

 

H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H3C

 

 

 

 

 

 

 

 

N

 

 

 

 

O

 

 

 

 

 

H2

 

 

 

 

никотинамид

 

 

 

 

 

 

 

R' =

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

C

C C

CH3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H

 

 

 

 

 

 

 

 

NH2

 

 

 

H3C

 

(H2C C C CH2)n

 

 

 

R O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

CH2 O

N

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

n = 2 - остаток фарнезила

 

 

 

 

 

 

 

 

R = ppA

 

n = 3 - остаток геранилгернила

 

 

 

 

OH

OH

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Модификация цистина

Химическая модификация аминокислотных остатков. Аналитическое применение

Определение количества сульфгидрильных групп на белке

Реагент Эллмана - 5,5’-дитио-бис(2- динитробензойная кислота)

Поглощение 5-тио-2-нитробензоата= 412 нм = 13 600

Пост-колоночная детекция аминокислот

 

 

O

 

 

 

 

O

 

 

 

 

 

C

 

H2N CH C

O

 

C

OH

 

H2O

 

 

C

O

OH

C

 

 

O

 

 

C

 

R

C

NH CH C

OH

O

 

O

 

 

O

 

O

R

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

C

 

O

 

 

 

C

N CH

R

 

 

 

C N C H

C

 

 

 

C

C

O

 

 

C

R

O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

O

O H

O

 

 

 

OH

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

O

 

 

 

O

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C O

 

 

C

H

 

 

C

H

O

 

 

 

H2O

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

N

 

C NH2

R C

H

O

 

 

C H

 

H2O

 

 

C

 

R

 

C

O

 

 

 

 

O

 

 

 

Дикет о гидрин дам ин

 

 

 

O

O

 

 

 

O

O

 

 

 

C

H

C

 

H

 

C

C

 

Ñèí å-ô èî ëåò î âû é

C N C

 

 

 

 

C N

C

 

 

 

 

 

 

Ðóýì àí à

C

 

C

 

 

 

C

C

 

 

 

 

 

 

 

 

O

O

 

 

 

O

O

 

 

 

Детекция пролина

O

 

O

 

 

O

HN

N

CO2

H2O

O

COOH

O

 

 

н ин гидрин

ï ðî ëèí

æ åëò û é